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菌丝霉素的串联表达及其菌内抑菌活性分析
1
作者
管韬
余冰
+5 位作者
陈代文
韩国全
黄志清
毛湘冰
郑萍
毛倩
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期620-626,共7页
构建菌丝霉素(Plectasin,PT)的串联表达菌株,研究各串联体融合表达产物的菌内抑菌活性。根据大肠杆菌表达系统对密码子的偏爱性,人工合成优化后PT基因,构建表达质粒pGEX-PT/pe;并利用同尾酶法分别构建PT基因二聚体表达质粒pGEX-PT/pes2...
构建菌丝霉素(Plectasin,PT)的串联表达菌株,研究各串联体融合表达产物的菌内抑菌活性。根据大肠杆菌表达系统对密码子的偏爱性,人工合成优化后PT基因,构建表达质粒pGEX-PT/pe;并利用同尾酶法分别构建PT基因二聚体表达质粒pGEX-PT/pes2与PT基因三聚体表达质粒pGEX-PT/pes3;然后分别将各表达质粒转化入BL21(DE3)进行IPTG的诱导表达,对各表达蛋白进行SDS-PAGE、Western Blot分析,并测定各融合表达产物的菌內抑菌活性。测序结果表明,串联体扩增到产物大小分别为135、261和387bp的目的基因片段;SDS-PAGE分析各串联表达菌表达的融合蛋白相对分子质量分别约为30、35和40ku,其产量分别占细菌总蛋白的64.5%、26.4%和25.3%。Western Blot分析表明各表达蛋白均具有良好的免疫反应性;菌内抑菌结果显示,各融合表达产物均表现对DH5α的弱抑制作用,但随PT基因串联数的增加,融合表达产物的抑菌效果显著提高,且抑菌时间延长。各串联表达菌株的成功构建与其表达产物的宿主菌抑制作用,为菌丝霉素高效抑菌产品的开发奠定了基础。
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关键词
菌
丝霉素
串联表达
菌内抑菌活性
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职称材料
题名
菌丝霉素的串联表达及其菌内抑菌活性分析
1
作者
管韬
余冰
陈代文
韩国全
黄志清
毛湘冰
郑萍
毛倩
机构
四川农业大学动物营养研究所
四川农业大学动物抗病营养教育部重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期620-626,共7页
基金
生物饲料核心生物技术及产业化关键技术研究与应用(2010GZ0193)
教育部"长江学者和创新团队发展计划"项目(IRTO555-5)
文摘
构建菌丝霉素(Plectasin,PT)的串联表达菌株,研究各串联体融合表达产物的菌内抑菌活性。根据大肠杆菌表达系统对密码子的偏爱性,人工合成优化后PT基因,构建表达质粒pGEX-PT/pe;并利用同尾酶法分别构建PT基因二聚体表达质粒pGEX-PT/pes2与PT基因三聚体表达质粒pGEX-PT/pes3;然后分别将各表达质粒转化入BL21(DE3)进行IPTG的诱导表达,对各表达蛋白进行SDS-PAGE、Western Blot分析,并测定各融合表达产物的菌內抑菌活性。测序结果表明,串联体扩增到产物大小分别为135、261和387bp的目的基因片段;SDS-PAGE分析各串联表达菌表达的融合蛋白相对分子质量分别约为30、35和40ku,其产量分别占细菌总蛋白的64.5%、26.4%和25.3%。Western Blot分析表明各表达蛋白均具有良好的免疫反应性;菌内抑菌结果显示,各融合表达产物均表现对DH5α的弱抑制作用,但随PT基因串联数的增加,融合表达产物的抑菌效果显著提高,且抑菌时间延长。各串联表达菌株的成功构建与其表达产物的宿主菌抑制作用,为菌丝霉素高效抑菌产品的开发奠定了基础。
关键词
菌
丝霉素
串联表达
菌内抑菌活性
Keywords
plectasin
tandom expression
bacteriostatic activity in vivo
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
发文年
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1
菌丝霉素的串联表达及其菌内抑菌活性分析
管韬
余冰
陈代文
韩国全
黄志清
毛湘冰
郑萍
毛倩
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
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