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阳离子交换碲化镉量子点对莱克多巴胺的荧光可视化分析
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作者 张曦文 史永鑫 +1 位作者 季学涛 王宝娟 《分析测试学报》 北大核心 2025年第4期682-688,共7页
利用碲化镉量子点(CdTe QDs)和银离子(Ag+)之间的阳离子交换反应(CER)以及适配体的特异性识别性质,结合信号放大的无酶催化发夹组装(CHA),建立了一种低成本、高灵敏度的莱克多巴胺(RAC)现场定量检测方法,检出限低至2.3 pmol·L^(-1)... 利用碲化镉量子点(CdTe QDs)和银离子(Ag+)之间的阳离子交换反应(CER)以及适配体的特异性识别性质,结合信号放大的无酶催化发夹组装(CHA),建立了一种低成本、高灵敏度的莱克多巴胺(RAC)现场定量检测方法,检出限低至2.3 pmol·L^(-1),远低于食品法典委员会建议的最大残留限量(MRL)。该方法的关键是适配体识别RAC驱动发夹DNA中的胞嘧啶-Ag^(+)-胞嘧啶结构释放出Ag^(+),同时通过CHA有效促进多重CER发生,连续诱导CdTe QDs荧光猝灭,为RAC的高灵敏现场定量分析提供基础。验证了该方法的实际可行性,包括稳定性、可重复性以及优于非CHA系统的性能。该方法不仅可以实现不同含量RAC的裸眼区分,而且具有通用性,只需修改体系中识别区域即可用于其他目标物分析。该研究有利于食品安全和环境健康领域的进展,为RAC及其他潜在类似化合物的定量分析提供了一种高效的工具。 展开更多
关键词 瘦肉精 莱克多巴 荧光可视化分析 量子点 阳离子交换
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基于铽有机框架材料荧光法检测动物尿液中莱克多巴胺残留
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作者 沈丽 段苏峦 +2 位作者 李润娴 赵晓云 贺平丽 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期7435-7444,共10页
本研究旨在建立一种β-受体激动剂莱克多巴胺的快速检测方法。以三羧酸化合物作为配体,镧系金属铽作为中心离子合成多核镧系金属有机框架材料。该材料在550 nm处出现铽的强发射峰,能够被莱克多巴胺有效猝灭。结果表明:在0.3~30.0μmol/... 本研究旨在建立一种β-受体激动剂莱克多巴胺的快速检测方法。以三羧酸化合物作为配体,镧系金属铽作为中心离子合成多核镧系金属有机框架材料。该材料在550 nm处出现铽的强发射峰,能够被莱克多巴胺有效猝灭。结果表明:在0.3~30.0μmol/L范围内,莱克多巴胺浓度的对数与荧光强度之间存在良好的线性关系,检出限可达到6 nmol/L;不同种类β-受体激动剂对多核镧系金属有机框架材料荧光猝灭效率的影响很小,表明多核镧系金属有机框架材料对莱克多巴胺检测具有良好的选择性和抗干扰性;将多核镧系金属有机框架材料用于实际样品的检测,在尿样中莱克多巴胺的加标回收率为87.3%~108.7%。因此,多核镧系金属有机框架材料在莱克多巴胺的检测方面具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 镧系金属有机框架 莱克多巴 荧光猝灭 荧光检测
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分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定饲料中莱克多巴胺 被引量:32
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作者 黄怡 张青杰 +3 位作者 刘敏 王旭峰 李建琴 贺利民 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期56-61,共6页
以莱克多巴胺为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,合成了对莱克多巴胺具有高选择性的分子印迹聚合物。考察了甲醇、乙腈、丙酮和氯仿-甲醇与三乙胺构成致孔剂合成的聚合物性能及其形貌特征。通过正交试验优化... 以莱克多巴胺为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,合成了对莱克多巴胺具有高选择性的分子印迹聚合物。考察了甲醇、乙腈、丙酮和氯仿-甲醇与三乙胺构成致孔剂合成的聚合物性能及其形貌特征。通过正交试验优化的聚合反应配方为:1.0 mmol莱克多巴胺,4.0 mmol丙烯酰胺,20.0 mmol乙二醇二甲基丙烯酸酯,6.0 mL乙腈-三乙胺(30∶1,v/v),50.0 mg偶氮二异丁腈。建立的基于分子印迹固相萃取-高效液相色谱测定饲料试样中莱克多巴胺的方法,在0.50~100 mg/L质量浓度范围内有良好的线性关系(r=0.999 4);饲料试样中1.0、10及100 mg/kg 3个添加水平的莱克多巴胺平均回收率大于80%;批内、批间测定的相对标准偏差小于10%;检出限(信噪比为3)达到0.1 mg/kg。该方法灵敏、可靠,用于饲料等复杂基质中莱克多巴胺检测的效果优于相关标准分析方法。 展开更多
关键词 分子印迹聚合物 固相萃取 高效液相色谱 莱克多巴 饲料
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克伦特罗和莱克多巴胺多残留胶体金免疫层析试纸条的研制 被引量:17
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作者 姜金庆 杨雪峰 +3 位作者 王自良 邓瑞广 王选年 张改平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期87-94,共8页
本试验旨在研制同时检测克伦特罗(CL)和莱克多巴胺(RAC)的多残留胶体金免疫层析试纸条(Multi-strip)。用细胞融合技术筛选CL和RAC杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体,金标抗体竞争性膜层析技术研制Multi-strip。该试纸条由样品垫、偶联垫、双... 本试验旨在研制同时检测克伦特罗(CL)和莱克多巴胺(RAC)的多残留胶体金免疫层析试纸条(Multi-strip)。用细胞融合技术筛选CL和RAC杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体,金标抗体竞争性膜层析技术研制Multi-strip。该试纸条由样品垫、偶联垫、双检测线和质控线标记的NC膜、吸收垫等几部分构成,其中偶联垫上灌注有CL和RAC两种金标单克隆抗体,双检测线由检测抗原CL-OVA和RAC-BSA喷膜构成,间距2mm。结果表明:多残留试纸条的CL和RAC目测检测限分别为1和2ng·mL-1,检测时间5~8min。基质呈阳性的真实样品用单残留试纸条、ELISA和GC-MS检测,结果一致,无假阳性或假阴性案例。该试纸条具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于现场检测和筛选。 展开更多
关键词 克伦特罗 莱克多巴 单克隆抗体 胶体金 多残留试纸条
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猪肾脏等组织中盐酸莱克多巴胺的HPLC检测方法及其残留消除 被引量:12
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作者 申屠芬琴 强致懿 +3 位作者 张素霞 丁双阳 江海洋 沈建忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期589-594,共6页
本研究建立了猪肝脏、肾脏、肌肉和脂肪中盐酸莱克多巴胺的高效液相色谱检测方法。方法的检测限为1ng/g,定量限为2 ng/g,肝脏的平均回收率在73.4%~83.2%,变异系数在2.1%~6.6%;肾脏的平均回收率在73.1%~95.5%,变异系数在3.8%~4.0%;... 本研究建立了猪肝脏、肾脏、肌肉和脂肪中盐酸莱克多巴胺的高效液相色谱检测方法。方法的检测限为1ng/g,定量限为2 ng/g,肝脏的平均回收率在73.4%~83.2%,变异系数在2.1%~6.6%;肾脏的平均回收率在73.1%~95.5%,变异系数在3.8%~4.0%;肌肉的平均回收率在80.7%~82.5%,变异系数在4.9%~9.1%;脂肪的平均回收率在73.3%~78.8%,变异系数在2.9%~6.7%。对60头健康猪以18 mg/kg的剂量混饲给药28d,停药饲喂14 d。在给药7、142、8 d和停药1、2、3、7、9、14 d分别屠宰6头猪,取各组织进行残留量测定。结果显示:肾脏中残留量最高,肝脏其次,残留量在停药期间较给药期间显著降低。其中肾脏和肝脏中的残留量分别在停药14 d、停药9 d后降至定量限以下;肌肉和脂肪中的残留量显著低于肾脏和肝脏,给药28 d时,残留基本低于定量限;停药1 d时均低至检测限以下。 展开更多
关键词 高效液相色谱 盐酸莱克多巴 猪组织 残留 消除
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量子点标记免疫层析试纸条快速检测莱克多巴胺的研究 被引量:19
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作者 张国华 赖卫华 +1 位作者 熊勇华 陈媛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第12期254-257,共4页
本实验通过莱克多巴胺抗原抗体的制备、量子点的制备、试纸条的组装和测试等步骤研究一种将量子点应用于莱克多巴胺免疫层析试纸条的新方法。结果表明,莱克多巴胺快速检测试纸条的检测限为3ng/ml,检测时间为10min。本法使用方便、经济,... 本实验通过莱克多巴胺抗原抗体的制备、量子点的制备、试纸条的组装和测试等步骤研究一种将量子点应用于莱克多巴胺免疫层析试纸条的新方法。结果表明,莱克多巴胺快速检测试纸条的检测限为3ng/ml,检测时间为10min。本法使用方便、经济,适合于莱克多巴胺现场快速检测。 展开更多
关键词 莱克多巴 量子点 免疫层析试纸条
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莱克多巴胺荧光胶乳颗粒免疫层析检测法的建立 被引量:16
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作者 崔浩 陈耀强 +3 位作者 唐勇 向军俭 徐霞玲 颜露 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期764-768,共5页
基于免疫竞争层析法原理,建立了莱克多巴胺(RAC)的荧光胶乳颗粒免疫层析快速检测技术,用于猪肉组织中莱克多巴胺残留的检测。应用自制的抗RAC单抗,标记胶乳荧光颗粒,将标记好的复合物喷涂于结合垫上。羊抗鼠IgG与人工合成的RAC-BSA检测... 基于免疫竞争层析法原理,建立了莱克多巴胺(RAC)的荧光胶乳颗粒免疫层析快速检测技术,用于猪肉组织中莱克多巴胺残留的检测。应用自制的抗RAC单抗,标记胶乳荧光颗粒,将标记好的复合物喷涂于结合垫上。羊抗鼠IgG与人工合成的RAC-BSA检测抗原包被在NC膜表面,分别作为质控线(C线)与检测线(T线)。检测过程中RAC-BSA与待测样品中RAC竞争结合有限的胶乳荧光颗粒标记的抗RAC单抗,样品中的RAC越多则其结合的荧光抗体越多,结合到T线的荧光抗体越少,则T线的紫外荧光强度越低,因此荧光强度可直观显示检测的半定量结果。该试纸条检测猪肉组织的最低检出限为0.5μg/L,且与克伦特罗、沙丁胺醇等类似物无交叉反应。所建立的方法操作便捷、稳定可靠、灵敏度高,可用于猪肉组织中莱克多巴胺残留的现场检测和监控。 展开更多
关键词 莱克多巴 胶乳荧光颗粒 免疫层析(ICA) 猪肉
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荧光免疫及磁免疫层析法检测莱克多巴胺的研究 被引量:8
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作者 王松柏 张彦 +3 位作者 卫艳丽 安文汀 王宇 双少敏 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第11期3100-3104,共5页
分别将量子点和超顺纳米磁珠作为荧光探针和磁信号探针应用于免疫反应中,构建了检测莱克多巴胺的荧光免疫和磁免疫层析的分析方法,并成功应用于尿液中莱克多巴胺的检测。两种方法均基于免疫竞争模式,在荧光免疫分析方法中,量子点偶联上... 分别将量子点和超顺纳米磁珠作为荧光探针和磁信号探针应用于免疫反应中,构建了检测莱克多巴胺的荧光免疫和磁免疫层析的分析方法,并成功应用于尿液中莱克多巴胺的检测。两种方法均基于免疫竞争模式,在荧光免疫分析方法中,量子点偶联上识别莱克多巴胺的抗体,样品中莱克多巴胺和包被在ELISA板上莱克多巴胺的完全抗原竞争结合量子点,样品中莱克多巴胺的浓度越高,ELISA板上吸附的量子点越少,所测荧光强度值越低,该方法的检出限为1ng·mL-1,检测时间为4h。在磁免疫层析方法中,检测线上特异性捕获的纳米磁珠颜色的深浅和尿液中莱克多巴胺浓度成反比例关系,即莱克多巴胺的浓度越高,检测线的颜色越浅,该方法的定性检出限为10ng·mL-1,检测时间为15min。两种方法各有优缺点,基于量子点的荧光免疫分析法在痕量检测和定量分析方面具有优势,而磁免疫层析法更适合于现场快速检测。 展开更多
关键词 量子点 荧光免疫分析 磁珠 磁免疫层析 莱克多巴
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固相萃取气相色谱-质谱联用法测定动物组织中的莱克多巴胺 被引量:10
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作者 刘勇军 吴银良 +2 位作者 刘素英 单吉浩 尤华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第8期231-234,共4页
通过液液分配和固相萃取提取、净化动物组织中添加的莱克多巴胺,TMS衍生化试剂BSTFA(N,O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺)衍生化,气相色谱-质谱联用(选择离子模式,选择离子为m/z163、m/z192、m/z234、m/z250)对衍生物检测分析,确定了动物... 通过液液分配和固相萃取提取、净化动物组织中添加的莱克多巴胺,TMS衍生化试剂BSTFA(N,O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺)衍生化,气相色谱-质谱联用(选择离子模式,选择离子为m/z163、m/z192、m/z234、m/z250)对衍生物检测分析,确定了动物组织中莱克多巴胺的定性、定量分析方法,该法检出限为0.5μg/L,衍生物的峰面积与样品浓度在1~1000μg/L范围内呈良好的线性关系,线性回归系数为0.9998。不同组织中不同莱克多巴胺加入量的加标回收率分别为:肝脏70.2%~75.4%,脂肪71.2%~84.7%,肾脏72.8%~80.9%,肌肉75.2%~86.4%;相对标准偏差为1.8%~5.6%。 展开更多
关键词 固相萃取 气质联用 莱克多巴 选择离子监测
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高效毛细管电泳法用于猪尿中莱克多巴胺含量的测定 被引量:13
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作者 马健 张明洲 +2 位作者 李晓 李艳 陈宗伦 《浙江农业学报》 CSCD 2006年第5期333-336,共4页
建立了高效毛细管电泳测定猪尿中莱克多巴胺残留量的方法。通过对缓冲体系的种类、浓度、酸度、分离时间、分离电压及进样时间等条件对分离影响的研究,明确了电泳分析的最佳条件。在214nm波长处,分离电压为15kV,进样时间为20s,分离... 建立了高效毛细管电泳测定猪尿中莱克多巴胺残留量的方法。通过对缓冲体系的种类、浓度、酸度、分离时间、分离电压及进样时间等条件对分离影响的研究,明确了电泳分析的最佳条件。在214nm波长处,分离电压为15kV,进样时间为20s,分离时间为12min,80mmol/L的醋酸-醋酸钠(pH5.04)运行缓冲液下,莱克多巴胺得到完全分离。莱克多巴胺质量浓度与电泳峰面积在0.05—100.00μg/mL范围内呈现良好的线性,相关系数为0.9961,最低检测限为0.05μg/mL,添加回收率为82.0%~94.3%。 展开更多
关键词 高效毛细管电泳 莱克多巴 尿样
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莱克多巴胺荧光微球免疫层析检测方法的建立 被引量:26
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作者 刘道峰 邓省亮 +1 位作者 赖卫华 夏骏 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2012年第1期73-77,共5页
以荧光微球作为新型标记物,采用EDC法进行偶联,制备莱克多巴胺抗体荧光微球复合物,复合物粒度均一、性质稳定,并以之为探针建立莱克多巴胺荧光微球免疫层析检测方法,检测限为2.5ng/mL,且特异性强、检测范围宽。与胶体金免疫层析方法相比... 以荧光微球作为新型标记物,采用EDC法进行偶联,制备莱克多巴胺抗体荧光微球复合物,复合物粒度均一、性质稳定,并以之为探针建立莱克多巴胺荧光微球免疫层析检测方法,检测限为2.5ng/mL,且特异性强、检测范围宽。与胶体金免疫层析方法相比,荧光微球免疫层析方法的灵敏度更高,新型的荧光微球可以提高免疫层析方法的灵敏度。 展开更多
关键词 荧光微球 莱克多巴 免疫层析 检测
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莱克多巴胺和土霉素人工抗原的合成及鉴定 被引量:6
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作者 宋珊珊 彭池方 +3 位作者 匡华 严文静 孙萌萌 胥传来 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第9期167-169,共3页
研究莱克多巴胺和土霉素免疫抗原的制备。实验中用碳二亚胺法将莱克多巴胺(ractopamine,RAC)与载体蛋白牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联,制备完全抗原;采用混合酸酐法将土霉素(oxytetracycline,OTC)与载体蛋白BSA偶联,制备... 研究莱克多巴胺和土霉素免疫抗原的制备。实验中用碳二亚胺法将莱克多巴胺(ractopamine,RAC)与载体蛋白牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联,制备完全抗原;采用混合酸酐法将土霉素(oxytetracycline,OTC)与载体蛋白BSA偶联,制备完全抗原,并对合成产物进行表征。紫外扫描对合成产物RAC-BSA、OTC-BSA进行鉴定结果显示偶联成功,经重氮化后利用混合酸酐法制备完全抗原的偶联比为5:1;经衍生后利用碳二亚胺法制备RAC完全抗原偶联比为7:1。利用制备的免疫原免疫兔子可以获得相应的抗体。 展开更多
关键词 土霉素 莱克多巴 偶联 抗原
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高效液相色谱-串联质谱法测定加工肉制品中莱克多巴胺及克伦特罗的含量 被引量:17
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作者 汪辉 彭新凯 +2 位作者 王玉枝 夏立新 曾欢 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期509-516,共8页
建立了高效液相色谱串联质谱测定加工肉制品中莱克多巴胺和克伦特罗的方法。采用阳离子交换色谱柱(SCX)分离目标化合物,改进了前处理方法,采用PXC固相萃取柱净化,并对洗脱溶液和高效液相色谱串联质谱的各参数进行优化。高效液相色谱流... 建立了高效液相色谱串联质谱测定加工肉制品中莱克多巴胺和克伦特罗的方法。采用阳离子交换色谱柱(SCX)分离目标化合物,改进了前处理方法,采用PXC固相萃取柱净化,并对洗脱溶液和高效液相色谱串联质谱的各参数进行优化。高效液相色谱流动相流速为0.4 mL/min,进样量为10μL,柱温为40℃。样品均质后加入30μLβ-盐酸葡萄糖醛苷酶-芳基硫酸酯酶,并经0.02 mol/L乙酸铵溶液(pH 5.2)提取,离心,过固相萃取柱净化。两种目标化合物在0.1~100μg/L范围内线性关系良好,检出限和定量下限分别不超过0.04μg/kg和0.15μg/kg。样品平均加标回收率为72%~98%,RSD低于8.5%。结果表明,此方法适于加工肉制品中莱克多巴胺和克伦特罗的测定。 展开更多
关键词 高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS) 加工肉制品 加工方式 莱克多巴 克伦特罗
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气相色谱-质谱法同时测定动物尿样中莱克多巴胺和克伦特罗 被引量:15
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作者 应永飞 皮雄娥 +3 位作者 吴平谷 陈慧华 朱聪英 陆春波 《质谱学报》 EI CAS CSCD 2006年第2期74-78,共5页
建立了固相萃取-气相色谱-质谱法(SPE-GC/MS)同时测定动物尿样中的莱克多巴胺和克伦特罗的方法。试样中的药物经乙酸乙酯提取后,经SLH固相萃取柱净化,氮吹至干,衍生化后进行气相色谱一质谱测定。两种药物的检出限均为0.3μg/L... 建立了固相萃取-气相色谱-质谱法(SPE-GC/MS)同时测定动物尿样中的莱克多巴胺和克伦特罗的方法。试样中的药物经乙酸乙酯提取后,经SLH固相萃取柱净化,氮吹至干,衍生化后进行气相色谱一质谱测定。两种药物的检出限均为0.3μg/L,定量限均为1.0μg/L,线性范围为0.02~1.0μg/L。加标浓度在4.0~20.0μg/L范围内.莱克多巴胺加标回收率为78.6%~101.2%,批内相对标准偏差≤7.0%;克伦特罗加标回收率为92.3%~112.2%.批内相对标准偏差≤6.9%。 展开更多
关键词 固相萃取-气相色谱-质谱法 莱克多巴 克伦特罗 残留量 动物尿样
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莱克多巴胺单克隆抗体的研制及阻断ELISA检测方法的建立 被引量:11
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作者 张海棠 王自良 +2 位作者 邓瑞广 钟华 范国英 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期904-908,共5页
用混合酸酐法将莱克多巴胺(RAC)偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成免疫原BSA-RAC,并用紫外和凝胶电泳鉴定;用BSA-RAC免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗RAC单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备RAC mAb。应用RAC mAb研制RA... 用混合酸酐法将莱克多巴胺(RAC)偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成免疫原BSA-RAC,并用紫外和凝胶电泳鉴定;用BSA-RAC免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗RAC单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备RAC mAb。应用RAC mAb研制RAC残留快速检测阻断ELISA试剂盒(RAC-Kit),并测定其性能。结果表明,BSA-RAC偶联成功,分子结合比为1∶24.5;筛选出3株杂交瘤细胞,其中最好的4D8株的亲和常数Ka为1.65×1010L/mol。RAC-Kit的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,线性范围为1~170μg/L,灵敏度为0.52μg/L,检测限为1μg/L,饲料样、猪尿样的平均添加回收率分别为91.1%和89.2%,平均批内和批间变异系数〈15%,与多巴酚丁胺的交叉反应率为22.3%,与其他化合物无交叉反应,RAC-Kit在4℃可保存180d。 展开更多
关键词 莱克多巴 人工免疫原 单克隆抗体 阻断ELISA 快速检测试剂盒
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莱克多巴胺免疫亲和柱的制备与应用研究 被引量:10
16
作者 王迪 杨曙明 +1 位作者 刘潇威 于洪侠 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期812-816,共5页
用多元酸酐与混合酸酐相结合的方法合成了莱克多巴胺(Rac)抗原,免疫动物获得特异性抗体,并以蛋白A柱纯化得到IgG抗体。琼脂糖凝胶(Sepharose4B)经溴化氰(CNBr)活化后与IgG抗体偶联,制备莱克多巴胺免疫吸附剂。据此建立了尿液... 用多元酸酐与混合酸酐相结合的方法合成了莱克多巴胺(Rac)抗原,免疫动物获得特异性抗体,并以蛋白A柱纯化得到IgG抗体。琼脂糖凝胶(Sepharose4B)经溴化氰(CNBr)活化后与IgG抗体偶联,制备莱克多巴胺免疫吸附剂。据此建立了尿液中莱克多巴胺的免疫亲和柱净化/液相色谱-荧光法(HPLC-FL)测定的分析方法。免疫制备特异抗体50%抑制浓度(IC50)为5μg/L。Sepharose4B经CNBr活化后与2mg抗体的偶联率达87.4%。1mL吸附剂的柱容量为67.57ng。尿液中莱克多巴胺的回收率为76%~90%。 展开更多
关键词 免疫亲和柱 莱克多巴 β-受体激动剂 检测
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莱克多巴胺胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制 被引量:11
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作者 郭荷梅 杜红丽 +2 位作者 刘文生 刘红 王小宁 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期82-84,共3页
应用胶体金免疫层析技术建立了一种快速检测莱克多巴胺的方法。采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记莱克多巴胺单克隆抗体并喷于玻璃纤维上,莱克多巴胺偶联OVA抗原和羊抗鼠IgG分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸... 应用胶体金免疫层析技术建立了一种快速检测莱克多巴胺的方法。采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记莱克多巴胺单克隆抗体并喷于玻璃纤维上,莱克多巴胺偶联OVA抗原和羊抗鼠IgG分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸组装切割成莱克多巴胺胶体金免疫层析快速检测试纸条。试验结果表明,该快速检测试纸条的灵敏度为5 ng/mL,检测时间为5 min,批内和批间重复性为100%,假阳性率和假阴性率均为0。 展开更多
关键词 莱克多巴 胶体金免疫层析 试纸条 快速检测
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莱克多巴胺人工免疫原合成及抗体特性 被引量:8
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作者 张海棠 王自良 +1 位作者 王艳荣 邓瑞广 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1-5,共5页
将莱克多巴胺(RAC)进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的RAC-戊二酸酐半醛化合物(RAC-SA);采用混合酸酐法(MA)将RAC-SA与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成人工免疫原BSA-RAC和包被抗原OVA-RAC,用红外(IR)、... 将莱克多巴胺(RAC)进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的RAC-戊二酸酐半醛化合物(RAC-SA);采用混合酸酐法(MA)将RAC-SA与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成人工免疫原BSA-RAC和包被抗原OVA-RAC,用红外(IR)、紫外(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,推算分子结合比;用BSA-RAC免疫新西兰白兔,间接ELISA测定多克隆抗体(pAb)效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,琼脂双扩散试验、WestGold膜杂交试验和交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明,BSA-RAC偶联成功,分子结合比为24.5∶1;获得了高价、敏感、特异的RAC pAb,为RAC残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 莱克多巴 半抗原 人工免疫原 抗体 特性
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化学发光免疫分析法检测猪尿中莱克多巴胺残留 被引量:10
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作者 高彬文 张素霞 +1 位作者 梁永红 邢保松 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第8期27-30,共4页
本试验运用化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)检测猪尿中莱克多巴胺(Ractopamine,RAC)的残留。检测限为0.01 ng/mL,检测范围为0.036~32.2 ng/mL。添加浓度分别为0.1、1、10 ng/mL,平均回收率为73.2%,批内平... 本试验运用化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)检测猪尿中莱克多巴胺(Ractopamine,RAC)的残留。检测限为0.01 ng/mL,检测范围为0.036~32.2 ng/mL。添加浓度分别为0.1、1、10 ng/mL,平均回收率为73.2%,批内平均变异系数为9.7%,批间平均变异系数为11.3%。而本研究所建立的化学发光免疫检测方法(CLISA)可以达到检测RAC残留的要求。 展开更多
关键词 化学发光 免疫分析 莱克多巴 猪尿
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抗莱克多巴胺单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定 被引量:6
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作者 张海棠 王自良 +2 位作者 邓瑞广 钟华 范国英 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期175-179,共5页
莱克多巴胺(RAC)经化学修饰引入功能基团羧基,合成半抗原RAC-戊二酸酐半醛化合物(RAC-SA),用混合酸酐法(MA)将RAC-SA偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成人工抗原BSA-RAC,用红外(IR)、紫外(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)对其进行鉴定;用BSA-RAC免疫... 莱克多巴胺(RAC)经化学修饰引入功能基团羧基,合成半抗原RAC-戊二酸酐半醛化合物(RAC-SA),用混合酸酐法(MA)将RAC-SA偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成人工抗原BSA-RAC,用红外(IR)、紫外(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)对其进行鉴定;用BSA-RAC免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗RAC的单克隆抗体(RAC mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备RAC mAb,并鉴定其免疫学特性。结果表明,BSA-RAC偶联成功,偶联率为24.5:1;筛选出3F10、3H12、4D8共3株杂交瘤细胞,其中最好的4D8株间接ELISA效价细胞培养上清为1:1.28×103,腹水为1:6.4×105,同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为1.65×1010L/mol,对RAC的半数抑制浓度(IC50)为5.7ng/ml,与多巴酚丁胺的交叉反应率(CR)为22.3%,与其他化合物无CR。 展开更多
关键词 莱克多巴 半抗原 人工抗原 单克隆抗体 免疫学特性
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