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G-蛋白偶联受体的功能测定和高通量药物筛选 被引量:12
1
作者 许治良 高虹 +3 位作者 欧阳克清 郑旭煦 蔡昭皙 胡应和 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1330-1365,共36页
G 蛋白偶联受体家族是药物开发中最大的一类药物靶点 ,高通量药物筛选是开发药物早期阶段的最重要工具之一。根据G 蛋白偶联受体与配体结合及激发的信号通路 ,人们设计了各种可行的功能测试方法 ,用于G 蛋白偶联受体为药靶的高通量药物... G 蛋白偶联受体家族是药物开发中最大的一类药物靶点 ,高通量药物筛选是开发药物早期阶段的最重要工具之一。根据G 蛋白偶联受体与配体结合及激发的信号通路 ,人们设计了各种可行的功能测试方法 ,用于G 蛋白偶联受体为药靶的高通量药物筛选 ,如 :微体积荧光数字图像测定技术 (Fluorometicmicrovolumeassaytechnology ,FMAT)、荧光偏振 (Fluoresencepolarization ,FP)、竞争性ELISA (Com petitiveenzyme linkedimmunosorbent)、闪烁邻近测定法(Scintillation proximityassay ,SPA)、载黑色素细胞测定法(Melanophoreassay)、报告基因测定法 (Reportergeneassay)和钙离子测定法等测定方法。在这些方法中 ,报告基因测定法和钙离子测定法占了主导地位。非放射性、无需底物和辅助剂的报告基因测定方法和荧光钙离子指示剂的钙离子测定方法可能是将来G 展开更多
关键词 高通量药物筛选 G-蛋白偶联受体 功能测定
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高通量药物筛选中的荧光微球 被引量:6
2
作者 胡杰 刘白玲 汪地强 《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期59-62,共4页
简要介绍了邻近闪烁分析技术及由其发展而来的Alphascreen分析技术 ,对其中使用的荧光微球的要求、特点作了介绍 ,并按荧光物质在微球中所处的位置对荧光微球的制备方法作了较为详细的讨论。
关键词 高通量药物筛选 荧光微球 邻近闪烁分析 制备
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星形胶质细胞形态学观察在高通量药物筛选水通道蛋白4抑制剂中的应用 被引量:5
3
作者 关方霞 关玉霞 +1 位作者 杨波 奚彪 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第5期870-872,共3页
目的:探讨星形胶质细胞形态学观察在高通量药物筛选水通道蛋白4(AQP4)抑制剂中的应用,为脑水肿和其他水转运障碍疾病的治疗提供理论依据。方法:应用药物库和原代培养的人星形胶质细胞,以AQP4 siRNA转染细胞后的形态学改变和阻抑... 目的:探讨星形胶质细胞形态学观察在高通量药物筛选水通道蛋白4(AQP4)抑制剂中的应用,为脑水肿和其他水转运障碍疾病的治疗提供理论依据。方法:应用药物库和原代培养的人星形胶质细胞,以AQP4 siRNA转染细胞后的形态学改变和阻抑蛋白表达作参照,观察药物对星形胶质细胞形态学改变的影响,Western blot方法检测能明显改变细胞形态的靶药物对AQP4蛋白表达的影响,并测定靶药物作用剂量下细胞ATP活性。结果:洛伐他汀、胍那苄和米安色林在12~24h内能明显改变人星形胶质细胞形态,减低AQP4蛋白表达,与AQP4的siRNA转染细胞4d后的形态改变和蛋白阻滞效果类似,靶药物作用剂量下对细胞ATP活性无影响。结论:星形胶质细胞的形态学观察可作为大规模药物筛选的初步指标,本研究筛选出的靶药物可能是潜在的AQP4抑制剂。 展开更多
关键词 水通道蛋白4 RNA干扰 星形胶质细胞 高通量药物筛选
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高通量药物筛选中靶分子固定化数学物理模型的建立 被引量:1
4
作者 李松军 刘白玲 《中国科学院研究生院学报》 CAS CSCD 2005年第2期179-186,共8页
通过对高能量药物筛选基本过程的分析 ,探索了靶分子固定化可能对筛选质量构成的影响 .从分子相互作用看 ,实际的过程远较理想的情况复杂 .分子间存在的静电力、疏水作用力及氢键力能对固定化的机理构成较大影响 ,甚至可能诱发多层吸附... 通过对高能量药物筛选基本过程的分析 ,探索了靶分子固定化可能对筛选质量构成的影响 .从分子相互作用看 ,实际的过程远较理想的情况复杂 .分子间存在的静电力、疏水作用力及氢键力能对固定化的机理构成较大影响 ,甚至可能诱发多层吸附的固定化模式 .基于固定化过程中可能存在的靶分子与靶分子、靶分子与微球、体相与表面相之间的相互作用 ,构筑了相应的数学物理模型 ,为实际的筛选工作提供了可参考的理论依据 . 展开更多
关键词 高通量药物筛选 靶分子固定化 相互作用 数学物理模型
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高通量药物筛选技术进展及新药开发策略 被引量:2
5
作者 吴慧 于建荣 《生物产业技术》 2010年第1期89-94,共6页
新药研发过程中.通过筛选而获得具有生物活性的先导化合物.是创新药物研究的关键.目前药物筛选模型已经从传统的整体动物、器官和组织水平发展到细胞和分子水平。创新药物的发现都离不开采用适当的药物作用靶点对大量化合物样品进行... 新药研发过程中.通过筛选而获得具有生物活性的先导化合物.是创新药物研究的关键.目前药物筛选模型已经从传统的整体动物、器官和组织水平发展到细胞和分子水平。创新药物的发现都离不开采用适当的药物作用靶点对大量化合物样品进行筛选.而且筛选规模越大,发现新药的机会就越多。随着计算机技术、生物芯片、蛋白质组学、组合化学等的发展.高通量药物筛选技术应运而生。高通量筛选体系在创新药物筛选中的应用是新药开发研究的一个重要领域。 展开更多
关键词 高通量药物筛选 新药开发 技术进展 先导化合物 药物筛选模型 分子水平 计算机技术 蛋白质组学
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药物高通量亲合色谱筛选中定性定量模型的建立
6
作者 刘白玲 李松军 《中国科学院研究生院学报》 CAS CSCD 2006年第1期31-38,共8页
通过对AC高通量筛选过程的分析,建立了AC技术筛选药物的定性及定量模型,为高通量药物筛选提供了必要的理论指导.
关键词 高通量药物筛选 亲合色谱筛选 筛选原理与过程 定性定量模型
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基于流感病毒PA_N蛋白的高通量药物筛选 被引量:4
7
作者 张国防 李真真 +2 位作者 姚伟利 王丽君 朱显明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期181-186,共6页
流感病毒的PA N蛋白高度保守,并且具有核酸内切酶活性,是抗流感药物研发的潜在靶点。通过高通量药物筛选体系,从372种化合物中筛选出3种对流感病毒H5N1的PA N蛋白抑制作用较好的化合物。将这3种化合物分别与PA N蛋白进行分子对接模拟,... 流感病毒的PA N蛋白高度保守,并且具有核酸内切酶活性,是抗流感药物研发的潜在靶点。通过高通量药物筛选体系,从372种化合物中筛选出3种对流感病毒H5N1的PA N蛋白抑制作用较好的化合物。将这3种化合物分别与PA N蛋白进行分子对接模拟,结果显示它们均可以与PA N蛋白活性位点的二价金属离子和氨基酸残基相互作用,从而为抗流感病毒药物的发现提供了先导化合物。 展开更多
关键词 流感病毒 PAN蛋白 高通量药物筛选 分子对接 化合物
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高通量筛选研究茯砖茶对FXR模型的作用 被引量:33
8
作者 傅冬和 刘仲华 +3 位作者 黄建安 陈金华 蔡正安 赵淑娟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期331-334,共4页
将茯砖茶水提液分别用三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取,制得三氯甲烷层、乙酸乙酯层、正丁醇层及水层样品,茶渣用95%的乙醇提取,制得乙醇提取物,通过高通量药物筛选测定各样品对法尼酯衍生物X受体(FXR)模型的激活和抑制作用,研究茯砖茶... 将茯砖茶水提液分别用三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取,制得三氯甲烷层、乙酸乙酯层、正丁醇层及水层样品,茶渣用95%的乙醇提取,制得乙醇提取物,通过高通量药物筛选测定各样品对法尼酯衍生物X受体(FXR)模型的激活和抑制作用,研究茯砖茶的降脂减肥功效,结果显示茯砖茶各部份对FXR都有抑制作用,乙酸乙酯层样品激活作用较明显,从中分离制得儿茶素EGCG及ECG单体对FXR模型有很好的激活作用,证明茯砖茶有较强的降脂功能,有望开发成天然的降脂药物。茯砖茶中其他活性成分的分离有待进一步进行。 展开更多
关键词 茯砖茶 法尼酯衍生物x受体(FXR) 高通量药物筛选
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毒蕈胆碱M_1受体激动剂的高通量筛选模型 被引量:11
9
作者 高虹 欧阳克清 +3 位作者 郑旭煦 许治良 胡应和 蔡绍皙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期776-779,共4页
目的 建立毒蕈碱样胆碱M1 受体激动剂的高通量筛选模型 ,以此模型进行M1 受体激动剂筛选。方法 将M1 受体基因质粒 (M1 /pCDNA3 1 )与报告基因质粒 (3×CRE/ 3×MRE/SRE LUC)按 1∶5的比例共转染HEK2 93 ,建立了一个稳定的M1... 目的 建立毒蕈碱样胆碱M1 受体激动剂的高通量筛选模型 ,以此模型进行M1 受体激动剂筛选。方法 将M1 受体基因质粒 (M1 /pCDNA3 1 )与报告基因质粒 (3×CRE/ 3×MRE/SRE LUC)按 1∶5的比例共转染HEK2 93 ,建立了一个稳定的M1 受体激动剂报告基因筛选细胞株。配体与细胞表面M1 受体结合后 ,激活相应的信号通路 ,调节报告基因的表达 ,通过测定荧光酶素报告基因表达水平的变化 ,评估配体激活M1 受体的生物活性。结果 通过对筛选条件 ,如细胞数目、荧光素酶表达时间、底物浓度的优化 ,建立了可靠的筛选方法 ,并对多种抗衰老中药水提物进行了筛选 ,找到 3种对M1 受体有活性的中药。结论 该系统能准确、稳定、有效地应用于M1 展开更多
关键词 M1受体 报告基因 激动剂 高通量药物筛选
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蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制剂高通量筛选模型建立和应用 被引量:10
10
作者 罗弟祥 何耀 +1 位作者 高小平 张义正 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2005年第5期606-609,共4页
本文以蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase,PTP1B)作为靶点,采用分子克隆GST融合蛋白的方法,重组表达获得PTP1B,结合自动化操作技术和比色分析,建立了一种PTP1B抑制剂的高通量筛选模型。经在96孔板优化各种反应条件并对17... 本文以蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase,PTP1B)作为靶点,采用分子克隆GST融合蛋白的方法,重组表达获得PTP1B,结合自动化操作技术和比色分析,建立了一种PTP1B抑制剂的高通量筛选模型。经在96孔板优化各种反应条件并对17940个样品的筛选结果表明,靶向PTP1B建立的高通量筛选模型具有微量、快速、特异、灵敏等特点,平均日筛选量可达15000样次以上,为寻找新的抗糖尿病药物和先导化合物提供了一种先进的手段。 展开更多
关键词 蛋白酪氨酸磷酸酶 GST融合蛋白 高通量药物筛选 植物提取物
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高通量筛选技术中数学模型的建立 被引量:1
11
作者 李松军 刘白玲 胡杰 《中国科学院研究生院学报》 CAS CSCD 2004年第3期333-339,共7页
在高通量药物筛选中 ,数学模型被认为是实现对样品库大规模筛选及筛选过程自动化的基础 .从热力学及动力学的角度对药物筛选的原理与方法进行了分析研究 ;同时也对药物与靶点的 3种可能的作用体系进行了研究 。
关键词 高通量药物筛选 数学模型 定性定量
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中草药中胰高血糖素受体拮抗剂的高通量细胞筛选 被引量:4
12
作者 万娟 许治良 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期112-118,共7页
为筛选胰高血糖素受体拮抗剂,建立了一种高通量筛选胰高血糖素受体拮抗剂的细胞模型.利用PCR方法扩增得到人的胰高血糖素受体cDNA,并连接到哺乳动物细胞表达载体pCDNA3.1上,构成质粒h glucagons-R/pCDNA3.1,将这种质粒与报告基因质粒(3&... 为筛选胰高血糖素受体拮抗剂,建立了一种高通量筛选胰高血糖素受体拮抗剂的细胞模型.利用PCR方法扩增得到人的胰高血糖素受体cDNA,并连接到哺乳动物细胞表达载体pCDNA3.1上,构成质粒h glucagons-R/pCDNA3.1,将这种质粒与报告基因质粒(3×CRE/3×MRE/SRE-LUC)共转染到HEK293细胞,通过G418筛选,建立稳定的人胰高血糖素受体拮抗剂筛选细胞株.利用胰高血糖素受体内源激动剂探索和优化了筛选条件,筛选方法合理,Z′因子大于0.6,系统稳定,符合胰高血糖素受体拮抗剂的高通量筛选的要求. 展开更多
关键词 胰高血糖素受体 报告基因 拮抗剂 高通量药物筛选
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一种高通量筛选PAC_1受体激动剂的细胞模型的建立
13
作者 张素行 蔡绍皙 许治良 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第16期1644-1647,共4页
目的建立垂体腺苷酸环化酶激活肽Ⅰ型受体(pituitaryadenylatecyclaseactivatingpeptideⅠreceptor,PAC1-R)激动剂的高通量筛选模型,筛选PAC1-R受体的激动剂,开发用于治疗神经系统疾病和能量代谢疾病的药物。方法将人的PAC1-RcDNA克隆... 目的建立垂体腺苷酸环化酶激活肽Ⅰ型受体(pituitaryadenylatecyclaseactivatingpeptideⅠreceptor,PAC1-R)激动剂的高通量筛选模型,筛选PAC1-R受体的激动剂,开发用于治疗神经系统疾病和能量代谢疾病的药物。方法将人的PAC1-RcDNA克隆到哺乳动物细胞表达载体pCDNA3.1构成质粒hPAC1R/pCDNA3.1,将这种质粒与报告基因质粒(SRE/3×MRE/CRE/VIP/Luci)共转染到CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定细胞株,利用PAC1-R内源激动剂PACAP-27探索和优化了筛选条件。结果建立了稳定表达hPAC1-R的筛选细胞株和可靠的筛选方法,Z’因子大于0.7。结论该系统成功适合于PAC1-R激动剂的高通量筛选。 展开更多
关键词 PAC1-R 报告基因 激动剂 高通量药物筛选
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应用噬菌体展示技术筛选中药的药物靶点蛋白研究进展 被引量:5
14
作者 黄玉芳 金坚 +2 位作者 肖君华 戴建国 王丹芬 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 2008年第1期68-70,共3页
噬菌体展示技术是一种有效的药物靶点筛选工具,可用其筛选中药的药物靶点蛋白。其原理是将外源性蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达。药物靶点是药物在体内的作用结合位点,... 噬菌体展示技术是一种有效的药物靶点筛选工具,可用其筛选中药的药物靶点蛋白。其原理是将外源性蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达。药物靶点是药物在体内的作用结合位点,是药物筛选和新药研究的基础,良好的药物靶点也是发现性质优良药物的基础。利用现代生物技术为基础的高通量药物筛选技术,进行中药活性组分筛选是实现中药现代化的有效途径,并促进我国天然药物的开发和应用,为中药的研究提供一套完整的筛选和验证方案。 展开更多
关键词 噬菌体展示技术 高通量药物筛选技术 中药药物靶点
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本刊编委刘畅教授团队在Advanced Materials上发表神经胶质母细胞瘤治疗的最新研究成果
15
作者 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期216-216,共1页
近日,我校生命科学与技术学院刘畅教授团队在国际著名期刊Advanced Materials(IF=29.40)发表最新研究成果“Efficient Delivery of Lomitapide Using Hybrid Membrane-Coated Tetrahedral DNA Nanostructures for Glioblastoma Therapy... 近日,我校生命科学与技术学院刘畅教授团队在国际著名期刊Advanced Materials(IF=29.40)发表最新研究成果“Efficient Delivery of Lomitapide Using Hybrid Membrane-Coated Tetrahedral DNA Nanostructures for Glioblastoma Therapy”。宋明明博士后和2022级硕士研究生田嘉甍为并列第一作者,刘畅教授为通讯作者,中国药科大学为论文唯一通讯单位。该团队通过高通量药物筛选平台从1430个小分子化合物中筛选得到一种新型抗神经胶质母细胞瘤(GBM)药物洛美他派(LMP)。此外,他们构建了一种主动靶向GBM的仿生纳米给药系统(RFA-NP),该系统主要以负载LMP四面体DNA纳米笼(tFNA-NP)为核心、以叶酸修饰的红细胞-癌细胞-巨噬细胞杂化膜(FRUR)为外壳所组成。结果表明,LMP-RFA-NPs在荷瘤小鼠中表现出优越的抗GBM活性,减少脱靶效应,显著延长GBM模型小鼠的寿命,并且副作用可以忽略不计。该研究将高通量药物筛选与仿生纳米给药系统技术相结合,为GBM治疗的药物开发和临床治疗策略优化提供了理论和实践依据。 展开更多
关键词 纳米给药系统 中国药科大学 高通量药物筛选 最新研究成果 硕士研究生 主动靶向 模型小鼠 小分子化合物
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斑马鱼在肿瘤疾病中的应用 被引量:4
16
作者 张震 杨柱 +4 位作者 龙奉玺 罗莉 邓茜 王倩 唐东昕 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第10期2352-2354,共3页
作为一个整体的实验动物,斑马鱼具有许多生物功能,如更多的后代,体外受精,胚胎是透明的。而且斑马鱼是一种新兴的动物实验模型,可以很好地评价抗癌药物化合物的活性和对抗癌药物的高通量筛选。斑马鱼在肿瘤疾病中的应用值得深入研究。
关键词 斑马鱼 动物模型 肿瘤 肿瘤疾病 药物高通量筛选 肿瘤新生血管
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荧光微球的制备及应用 被引量:15
17
作者 汪地强 刘白玲 +2 位作者 胡杰 林晓琴 张敏 《高分子材料科学与工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第4期42-45,共4页
荧光微球是一类特殊的功能微球,在许多领域尤其是在生物医学领域方面有重要的应用。文中介绍了荧光微球的定义及分类,对其基本制备方法进行了综述,并对其在许多领域的应用进行了介绍,着重介绍了其在高通量药物筛选中的应用。最后,还对... 荧光微球是一类特殊的功能微球,在许多领域尤其是在生物医学领域方面有重要的应用。文中介绍了荧光微球的定义及分类,对其基本制备方法进行了综述,并对其在许多领域的应用进行了介绍,着重介绍了其在高通量药物筛选中的应用。最后,还对此领域的研究及应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 荧光微球 制备 应用 功能材料 生物医学领域 高通量药物筛选
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中药复方有效成分组学研究 被引量:105
18
作者 杜冠华 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期878-880,共3页
本文根据中药复方研究的现状和应用高通量药物筛选方法研究中药复方的体会 ,论述了中药复方有效成分组学概念、研究内容及意义 ,简要介绍了中药复方有效成分组学研究的方法。笔者认为 ,中药复方有效成分组是中药复方发挥临床治疗作用的... 本文根据中药复方研究的现状和应用高通量药物筛选方法研究中药复方的体会 ,论述了中药复方有效成分组学概念、研究内容及意义 ,简要介绍了中药复方有效成分组学研究的方法。笔者认为 ,中药复方有效成分组是中药复方发挥临床治疗作用的物质基础 ,是保证中药复方制剂临床疗效的基本条件 ,也是中药复方制剂 (中成药 )质量控制的基本对象。有效成分组不同于有效部位、有效组分或有效成分 ,也不同于中药复方中的生物活性成分 ,而是指中药复方中发挥治疗作用的全部有效物质。 展开更多
关键词 中药复方 有效成分组学 高通量药物筛选 中药现代化
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蛋白片段互补分析方法及其应用 被引量:2
19
作者 张洁 柳长柏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期67-71,共5页
蛋白片段互补分析技术是近年发展起来的一种分析蛋白质-蛋白质相互作用的新方法。典型的蛋白片段互补分析技术已经成功地利用二氢叶酸还原酶,β-内酰胺酶,绿色荧光蛋白以及荧光素酶片段互补进行胞内蛋白分子相互作用研究。这一技术不仅... 蛋白片段互补分析技术是近年发展起来的一种分析蛋白质-蛋白质相互作用的新方法。典型的蛋白片段互补分析技术已经成功地利用二氢叶酸还原酶,β-内酰胺酶,绿色荧光蛋白以及荧光素酶片段互补进行胞内蛋白分子相互作用研究。这一技术不仅可以动态、定位分析细胞内蛋白质分子相互作用、绘制细胞内信号传导、蛋白质生物化学网络,还可以应用到蛋白质文库、cDNA文库和高通量药物筛选等。综述了蛋白片段互补分析技术的原理、方法及其应用。 展开更多
关键词 蛋白相互作用 蛋白片段互补分析 高通量药物筛选
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