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Taqman MGB探针快速定量检测VHSV方法的研究
被引量:
6
1
作者
许建明
张念之
+2 位作者
蒋一男
张利峰
夏春
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期208-213,共6页
为建立准确实时地定量检测病毒性出血性败血症病毒(VHSV),在VHSV-N基因保守区设计了Taqman MGB探针与引物对,随后,采用体外转录技术获得了VHSV-N基因RNA,并以此为绝对定量标准品,建立了绝对定量(AQ)检测VHSV的实时荧光RT-PCR法(AQ-RT-PC...
为建立准确实时地定量检测病毒性出血性败血症病毒(VHSV),在VHSV-N基因保守区设计了Taqman MGB探针与引物对,随后,采用体外转录技术获得了VHSV-N基因RNA,并以此为绝对定量标准品,建立了绝对定量(AQ)检测VHSV的实时荧光RT-PCR法(AQ-RT-PCR方法),并与世界动物卫生组织(OIE)推荐的普通RT-PCR法进行了比较。此荧光RT-PCR法特异性好,与其他鱼类弹状病毒无交叉反应。检测线性范围为10^(10)~10~2拷贝/反应,灵法度达10~2拷贝/反应。此检测灵敏度比OIE推举的RT-PCR法高出5个数量级,比嵌套RT-PCR高出1个数量级。此法是出入境检疫VHSV的有效方法。
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关键词
病毒性出血性败血症病毒(VHSV)
TAQMAN
MGB探针
荧光rt—pcr法
定量检测
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职称材料
题名
Taqman MGB探针快速定量检测VHSV方法的研究
被引量:
6
1
作者
许建明
张念之
蒋一男
张利峰
夏春
机构
中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点实验室
北京出入境检验检疫局
出处
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期208-213,共6页
基金
国家质检总局(2007IK031)资助项目
文摘
为建立准确实时地定量检测病毒性出血性败血症病毒(VHSV),在VHSV-N基因保守区设计了Taqman MGB探针与引物对,随后,采用体外转录技术获得了VHSV-N基因RNA,并以此为绝对定量标准品,建立了绝对定量(AQ)检测VHSV的实时荧光RT-PCR法(AQ-RT-PCR方法),并与世界动物卫生组织(OIE)推荐的普通RT-PCR法进行了比较。此荧光RT-PCR法特异性好,与其他鱼类弹状病毒无交叉反应。检测线性范围为10^(10)~10~2拷贝/反应,灵法度达10~2拷贝/反应。此检测灵敏度比OIE推举的RT-PCR法高出5个数量级,比嵌套RT-PCR高出1个数量级。此法是出入境检疫VHSV的有效方法。
关键词
病毒性出血性败血症病毒(VHSV)
TAQMAN
MGB探针
荧光rt—pcr法
定量检测
Keywords
viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV), Taqman MGB probe, real-time
rt
-
pcr
, quantitative detection
分类号
S941 [农业科学—水产养殖]
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作者
出处
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被引量
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1
Taqman MGB探针快速定量检测VHSV方法的研究
许建明
张念之
蒋一男
张利峰
夏春
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010
6
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