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题名Calcein-AM荧光扫描测定细胞毒方法的建立
被引量：1
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作者
陶嫦立
丁哲纯
郭雯静
吴凤麟
邵红伟
黄树林
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机构
广东药学院生命科学与生物制药学院/广东省生物技术候选药物研究重点实验室
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出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期1364-1368,共5页
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基金
国家自然科学基金(31100664)
国家重大科技专项"重大新药发展"(2009ZX09103-708)项目资助
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文摘
目的：建立和优化基于钙黄绿素-AM（Calcein-AM）荧光扫描的细胞毒测定方法。方法：首先使用Calcein-AM染色靶细胞,扫描检测Calcein-AM荧光值,确定Calcein-AM最佳激发波长和发射波长;然后优化Calcein-AM染色的浓度和时间;最后以效靶比为30∶1～1∶1,共孵育时间为4 h,荧光扫描测定靶细胞裂解的百分率。结果：荧光染料Calcein-AM能有效标记靶细胞,最佳激发波长和发射波长为485 nm和515 nm;Calcein-AM对细胞毒性低,不影响细胞活性;4 h内的自发释放率低于15%;CIK（Cytokine induced killer）效应细胞与靶细胞共孵育4 h的细胞毒效应随效靶比增加而升高。结论：建立和优化了Calcein-AM荧光染料标记靶细胞检测细胞毒效应的方法,该方法可避免放射性试剂的应用,对细胞毒性低,准确性高。
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关键词
Calcein-AM
细胞毒
荧光释放测定
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Keywords
Calcein-AM
Cytotoxicity
Fluorescence measurement
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分类号
R392.33
[医药卫生—免疫学]
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