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小鼠Cdc14A荧光表达载体的构建及鉴定: 1; 作者侯力孟峻《山西医科大学学报》 CAS 2021年第7期857-861,共5页; 目的构建含有小鼠Cdc14A基因的荧光表达载体pcDNA3.1-MYC-Cdc14A-mcherry,并观察和验证其在真核细胞中的表达。方法通过聚合酶链式反应将实验室保存的真核表达质粒pcDNA3.1-MYC-Cdc14A中目的基因Cdc14A与mcherry融合并扩增出来,然后定... 展开更多; 关键词 Cdc14A 荧光表达载体 HEK293细胞聚合酶链式反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠Cdc25B突变型S15A荧光表达载体的构建及鉴定: 2; 作者冯少青孟峻《山西医科大学学报》 CAS 2021年第6期695-699,共5页; 目的构建小鼠Cdc25B的突变型Cdc25B(S15A)的荧光表达载体pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B(S15A)-EGFP,并观察其在真核细胞中的表达以验证载体是否构建成功。方法利用PCR技术从质粒模板上扩增荧光表达的EGFP目的基因,将其与pcDNA3.1-3xflag-Cdc25... 展开更多; 关键词荧光表达载体 Cdc25B(S15A) HEK293细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

鹅垂体特异性转录因子荧光素酶报告基因重组体的构建和鉴定: 3; 作者赵荣雪段修军 +6 位作者赵文明董飚徐琪孙国波乔娜张海波陈国宏《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1032-1038,共7页; 为研究垂体特异性转录因子(Pituitary transcription factor 1,Pit1)启动子转录调控机制,将获得的Pit1基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,构建Pit1基因启动子调控的报告基因重组表达质粒。本研究利用染色体步移技术扩增鹅Pit1基... 展开更多; 关键词鹅 Pit1基因启动子荧光素酶基因表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

pEGFP-C3-hNIS重组质粒的构建及其在人胃癌BGC-823细胞的表达: 4; 作者徐华肖建英 +3 位作者刘超张秀梅高月王翠瑶《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第52期1-3,6,I0001,共5页; 目的构建人钠碘转运体(hNIS)基因真核绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C3-hNIS,并研究重组hNIS基因在人胃癌BGC-823细胞中的表达情况。方法采用Trizol一步法从甲状腺手术患者的甲状腺组织中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增得到hNIS的可编... 展开更多; 关键词胃肿瘤人钠碘转运体基因克隆真核绿色荧光蛋白表达载体转染; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪Prox1基因的染色体定位和亚细胞定位的研究被引量：5: 5; 作者袁继红龙欢 +1 位作者田明芳杨在清《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期351-357,共7页; 在克隆猪Prox1基因(sProx1)的基础上,对猪Prox1基因进行染色体定位分析,并通过EGFP融合蛋白对该基因产物进行亚细胞水平定位。本研究将人和鼠的Prox1基因编码区在猪的ESTs数据库中进行检索,然后根据EST进行序列拼接并设计引物对猪Prox1... 展开更多; 关键词猪 Prox1 染色体定位绿色荧光融合超表达载体亚细胞定位; 在线阅读下载PDF 职称材料

鹅PIT-1基因启动子区转录调控的研究: 6; 作者赵荣雪赵文明 +8 位作者徐琪段修军董飚孙国波毕瑜林李秀张扬黄正洋陈国宏《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期220-225,共6页; 为研究垂体特异性转录因子(Pituitary transcription factor 1,PIT-1)启动子的转录调控机制,寻找该基因转录调控的顺式作用元件、反式作用因子和基本转录单位。利用前期染色体步移技术扩增得到鹅PIT-1基因的启动子区序列,经PCR扩增,定... 展开更多; 关键词鹅 PIT-1基因启动子荧光素酶基因表达载体转录调控; 在线阅读下载PDF 职称材料

美国《化学文摘》收录2005年《眼科新进展》论文目录(三): 7; 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第4期389-389,共1页; 38 张自峰，捌健，惠延年，张健，刘燕，刘新平，等．人MRG15基因荧光真核表达载体的构建及其在培养人晶状体上皮细胞的表达[J]．眼科新进展，2005，25（3）：212—215.; 关键词《眼科新进展》《化学文摘》人晶状体上皮细胞荧光真核表达载体目录论文美国; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠Cdc14A荧光表达载体的构建及鉴定: 1; 作者侯力孟峻; 机构内蒙古医科大学附属医院临床检验诊断学教研室内蒙古医科大学附属医院检验科; 出处《山西医科大学学报》 CAS 2021年第7期857-861,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(81360109,81660267)。; 文摘目的构建含有小鼠Cdc14A基因的荧光表达载体pcDNA3.1-MYC-Cdc14A-mcherry,并观察和验证其在真核细胞中的表达。方法通过聚合酶链式反应将实验室保存的真核表达质粒pcDNA3.1-MYC-Cdc14A中目的基因Cdc14A与mcherry融合并扩增出来,然后定向克隆至pcDNA3.1-MYC-C质粒中,经限制性内切酶消化和测序证实后,通过脂质体法转染HEK293细胞,Western blotting法检测目的基因的蛋白表达情况。结果测序结果和之前预期结果相符,证实pcDNA3.1-MYC-Cdc14A-mcherry荧光表达载体构建成功,Western blotting检测转染pcDNA3.1-MYC-Cdc14A-mcherry的细胞出现清晰的阳性反应条带,说明目的片段成功表达。结论pcDNA3.1-MYC-Cdc14A-mcherry荧光表达载体构建成功。; 关键词 Cdc14A 荧光表达载体 HEK293细胞聚合酶链式反应; Keywords cell division cycle 14A fluorescent expression vector HEK293 cells polymerase chain reaction; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠Cdc25B突变型S15A荧光表达载体的构建及鉴定: 2; 作者冯少青孟峻; 机构内蒙古医科大学附属医院临床检验诊断学教研室内蒙古医科大学附属医院检验科; 出处《山西医科大学学报》 CAS 2021年第6期695-699,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(81360109,81660267)。; 文摘目的构建小鼠Cdc25B的突变型Cdc25B(S15A)的荧光表达载体pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B(S15A)-EGFP,并观察其在真核细胞中的表达以验证载体是否构建成功。方法利用PCR技术从质粒模板上扩增荧光表达的EGFP目的基因,将其与pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B(S15A)载体连接,利用限制性内切酶XbaⅠ和Bam HⅠ进行双酶切电泳后做测序鉴定,构建pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B(S15A)-EGFP荧光表达载体,利用脂质体法使其转染HEK293感受态细胞,通过Western blot法检测细胞内荧光质粒的表达。结果荧光表达载体pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B(S15A)-EGFP构建成功,将其转染至HEK293感受态细胞,于48 h后提取细胞蛋白,利用Western blot法检测到细胞内荧光表达载体pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B(S15A)-EGFP成功表达,并且测序结果与预期一致。结论成功构建了荧光表达载体pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B(S15A)-EGFP。; 关键词荧光表达载体 Cdc25B(S15A) HEK293细胞; Keywords fluorescent expression vector Cdc25B(S15A) HEK293 cells; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鹅垂体特异性转录因子荧光素酶报告基因重组体的构建和鉴定: 3; 作者赵荣雪段修军赵文明董飚徐琪孙国波乔娜张海波陈国宏; 机构扬州大学动物科学与技术学院国家级水禽基因库; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1032-1038,共7页; 基金现代农业产业技术体系建设专项资金(nycytx-45-04) 优质高产水禽新品种选育国家科技部支撑计划重大专项资金(2006BDA01A09) +1 种基金江苏省属高校自然科学基础研究面上项目(07KJB230138); 文摘为研究垂体特异性转录因子(Pituitary transcription factor 1,Pit1)启动子转录调控机制,将获得的Pit1基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,构建Pit1基因启动子调控的报告基因重组表达质粒。本研究利用染色体步移技术扩增鹅Pit1基因的启动子,定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic中,构建含有正确目的基因的报告基因重组体pGL3-Pit1,并通过限性内切酶酶切、PCR及测序进行鉴定。通过酶切鉴定及基因测序证明,所克隆的基因产物与预期结果一致,序列无碱基突变。结果,成功构建了含有Pit1启动子基因序列的荧光素酶报告基因真核表达载体,为下一步分析该启动子活性及转录调控机理奠定基础。; 关键词鹅 Pit1基因启动子荧光素酶基因表达载体; Keywords goose Pit1 gene promoter luciferase reporter vector; 分类号 S835 [农业科学—畜牧学] S831.2 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名pEGFP-C3-hNIS重组质粒的构建及其在人胃癌BGC-823细胞的表达: 4; 作者徐华肖建英刘超张秀梅高月王翠瑶; 机构辽宁医学院; 出处《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第52期1-3,6,I0001,共5页; 基金辽宁省教育厅重点实验室项目(LS2010101); 文摘目的构建人钠碘转运体(hNIS)基因真核绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C3-hNIS,并研究重组hNIS基因在人胃癌BGC-823细胞中的表达情况。方法采用Trizol一步法从甲状腺手术患者的甲状腺组织中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增得到hNIS的可编码区基因,并克隆到T载体上,测序后亚克隆到真核绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C3的多克隆位点,获得重组真核表达载体pEGFP-C3-hNIS。分别将pEGFP-C3-hNIS重组质粒(实验组)和pEGFP-C3(对照组)瞬时转染至人胃癌BGC-823细胞中,转染48 h后,于荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达情况,并通过Western blot方法检测hNIS基因的蛋白表达水平。结果序列分析证实克隆片段与GenBank公布的hNIS基因序列(序列号:NM-000453)相似性达99.90%。转染48 h后,实验组与对照组细胞均可观察到较强绿色荧光信号,用hNIS基因特异性抗体检测表明实验组hNIS表达水平明显高于对照组。结论成功构建hNIS真核绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C3-hNIS,并能在人胃癌BGC-823细胞中高表达。; 关键词胃肿瘤人钠碘转运体基因克隆真核绿色荧光蛋白表达载体转染; Keywords gastric carcinoma human sodium iodide symporter gene cloning eukaryotic expression vector with green fluorescent protein transfection; 分类号 R730.5 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪Prox1基因的染色体定位和亚细胞定位的研究被引量：5: 5; 作者袁继红龙欢田明芳杨在清; 机构华中农业大学生命科学技术学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期351-357,共7页; 基金国家自然科学基金项目"SIRT1对猪骨髓间充质干细胞成脂分化的调控机制"(30771585); 文摘在克隆猪Prox1基因(sProx1)的基础上,对猪Prox1基因进行染色体定位分析,并通过EGFP融合蛋白对该基因产物进行亚细胞水平定位。本研究将人和鼠的Prox1基因编码区在猪的ESTs数据库中进行检索,然后根据EST进行序列拼接并设计引物对猪Prox1基因编码区进行克隆。通过比对人、鼠及其他物种Prox1基因第二个内含子序列,设计引物扩增猪Prox1基因部分内含子,根据克隆得到的部分内含子序列设计引物,利用猪-仓鼠体细胞辐射杂种板(IMpRH)对猪Prox1基因进行染色体定位。根据已获得的猪Prox1基因编码区序列,构建猪Prox1基因的融合绿色荧光超表达载体EGFP-Prox1,并转染猪肾PK15细胞,12h后倒置荧光显微镜观察Prox1蛋白在亚细胞内的定位。结果表明:Prox1基因定位于猪第9号染色体长臂的26区,与标记SW1651紧密连锁;构建猪Prox1基因的真核表达载体pEGFP-N1-Prox1,融合蛋白EGFP-Prox1定位于PK15细胞的细胞核中。; 关键词猪 Prox1 染色体定位绿色荧光融合超表达载体亚细胞定位; Keywords pig Proxl chromosomal localization pProxl- EGFP subcellular localization; 分类号 S828 [农业科学—畜牧学] S813.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鹅PIT-1基因启动子区转录调控的研究: 6; 作者赵荣雪赵文明徐琪段修军董飚孙国波毕瑜林李秀张扬黄正洋陈国宏; 机构扬州大学动物科学与技术学院国家级水禽基因库; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期220-225,共6页; 基金现代农业产业技术体系建设专项资金(nycytx-45-04) 优质高产水禽新品种选育国家科技部支撑计划重大专项资金(2006BDA01A09) +1 种基金江苏省属高校自然科学基础研究面上项目(07KJB230138); 文摘为研究垂体特异性转录因子(Pituitary transcription factor 1,PIT-1)启动子的转录调控机制,寻找该基因转录调控的顺式作用元件、反式作用因子和基本转录单位。利用前期染色体步移技术扩增得到鹅PIT-1基因的启动子区序列,经PCR扩增,定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic中,把目的片段连接到荧光素酶报告基因载体(pGL-Basic),制备了一系列启动子缺失体(-1 485/-1bp、-1 293/-1bp、-1 014/-1bp、-775/-1bp、-561/-1bp、-353/-1bp和-206/-1bp),并通过限性内切酶酶切、PCR及测序进行鉴定,构建了含有正确目的基因的报告基因重组体,然后瞬时转染GH3细胞,利用荧光素酶报告基因检测试剂盒检测。本试验所克隆的PIT-1基因启动子区具有明显的启动子活性,其中-561/-1bp的启动活性最强,该区域存在有PIT-1、POU3F2、myogenin和GR等多个转录因子结合位点。利用系列缺失法成功构建了荧光素酶报告基因真核表达载体,并且验证了克隆的启动子具有启动活性,找到了正负调控区域及核心启动子区,为进一步研究其转录调控机制奠定了基础。; 关键词鹅 PIT-1基因启动子荧光素酶基因表达载体转录调控; Keywords goose PIT-1 gene promoter luciferase reporter vector transcriptional regulation; 分类号 S835 [农业科学—畜牧学] S831.2 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名美国《化学文摘》收录2005年《眼科新进展》论文目录(三): 7; 出处《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第4期389-389,共1页; 文摘 38 张自峰，捌健，惠延年，张健，刘燕，刘新平，等．人MRG15基因荧光真核表达载体的构建及其在培养人晶状体上皮细胞的表达[J]．眼科新进展，2005，25（3）：212—215.; 关键词《眼科新进展》《化学文摘》人晶状体上皮细胞荧光真核表达载体目录论文美国; 分类号 R77-55 [医药卫生—眼科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	小鼠Cdc14A荧光表达载体的构建及鉴定	侯力孟峻	《山西医科大学学报》 CAS	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	小鼠Cdc25B突变型S15A荧光表达载体的构建及鉴定	冯少青孟峻	《山西医科大学学报》 CAS	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	鹅垂体特异性转录因子荧光素酶报告基因重组体的构建和鉴定	赵荣雪段修军赵文明董飚徐琪孙国波乔娜张海波陈国宏	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	pEGFP-C3-hNIS重组质粒的构建及其在人胃癌BGC-823细胞的表达	徐华肖建英刘超张秀梅高月王翠瑶	《山东医药》 CAS 北大核心	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	猪Prox1基因的染色体定位和亚细胞定位的研究	袁继红龙欢田明芳杨在清	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	5	在线阅读下载PDF 职称材料
6	鹅PIT-1基因启动子区转录调控的研究	赵荣雪赵文明徐琪段修军董飚孙国波毕瑜林李秀张扬黄正洋陈国宏	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	美国《化学文摘》收录2005年《眼科新进展》论文目录(三)		《眼科新进展》 CAS 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料