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连续荧光监测法测定蛋白酶体活性及其在筛选蛋白酶体抑制剂中的应用
被引量：
4
1
作者
周永列
吕亚萍
+1 位作者
许武林
胡惟孝
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2008年第10期1127-1133,共7页
目的:建立用连续荧光监测法测定蛋白酶体活性的方法,研究其在筛选蛋白酶体抑制剂中的应用价值。方法:用特异性荧光多肽底物Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC(Suc-LLVT-AMC)、Z-Val-Val-Arg-AMC(ZVVA-AMC)、Z-Leu-Leu-Glu-βNA(ZLLG-βNA),分别...
目的:建立用连续荧光监测法测定蛋白酶体活性的方法,研究其在筛选蛋白酶体抑制剂中的应用价值。方法:用特异性荧光多肽底物Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC(Suc-LLVT-AMC)、Z-Val-Val-Arg-AMC(ZVVA-AMC)、Z-Leu-Leu-Glu-βNA(ZLLG-βNA),分别测定蛋白酶体的糜凝乳蛋白酶样(chy-motrypsin-like,CT-L)、胰蛋白酶样(trypsin-like,T-L)和肽基谷氨酰肽水解酶样(PGPH-like,PGPH-L)活性,对测定条件优化,并进行方法学评价。用该法测定了硼替佐米(PS-341)和四嗪二甲酰胺(ZG-DHu-1)对纯20S蛋白酶体和B16、Namalwa细胞蛋白酶体提取物抑制作用。结果:连续荧光监测法测定蛋白酶体活性的最适pH为8.2;0.3g/LSDS仅对CT-L活性有激活作用;CT-L、T-L、PGPH-L的Km分别为3.55、4.12、4.88μmol/L;酶反应进程曲线的线性期达20min;线性范围为测定纯20S蛋白酶体时,其蛋白浓度分别达100、120、100μg/L,测定B16细胞蛋白酶体提取物时,其蛋白浓度均达200mg/L;精密度的批内CV为(2.25～5.78),批间CV在(3.75～8.42)。用该法测定了PS-341对20S蛋白酶体CT-L、T-L、PGPH-L的抑制活性,其IC50分别为12.36、12.42、24.40nmol/L;测定ZGDHu-1对20S蛋白酶体抑制活性,IC50分别为2.24、0.92、0.51μmol/L。结论:连续荧光监测法测定蛋白酶体活性为快速、有效、大规模筛选蛋白体抑制剂类药物提供了一个技术平台,也为临床上应用蛋白酶体抑制剂治疗提供了一个有用的检测指标。
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关键词
连续
荧光监测法
蛋白酶体
抑制剂
硼替佐米
四嗪二甲酰胺
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职称材料
餐饮业油烟气中醛类化合物的荧光法测定
被引量：
9
2
作者
刘光明
王凯雄
+1 位作者
臧荣春
古贺实
《环境污染与防治》
CAS
CSSCI
CSCD
北大核心
1998年第4期38-41,共4页
提出了餐饮业油烟气中醛类化合物的荧光测定方法。通过试验选择丙醇作为油烟气中醛类化合物的吸收剂。研究了Hantzsch反应在测定油烟气中醛类化合物时的反应条件。样品与荧光试剂等体积混合,在pH 6.0的体系中,57℃下反应15min。在λex=4...
提出了餐饮业油烟气中醛类化合物的荧光测定方法。通过试验选择丙醇作为油烟气中醛类化合物的吸收剂。研究了Hantzsch反应在测定油烟气中醛类化合物时的反应条件。样品与荧光试剂等体积混合,在pH 6.0的体系中,57℃下反应15min。在λex=436nm、λem=504nm处测反应产物的荧光强度,从而确定油烟空气中的醛类化合物含量(以甲醛计)。吸收液的检出限为9.3×10^(-4)μg/mL测定范围为0.005～1.000μg/mL。
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关键词
油烟气
醛类化合物
荧光监测法
餐饮业
大气
监测
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职称材料
题名
连续荧光监测法测定蛋白酶体活性及其在筛选蛋白酶体抑制剂中的应用
被引量：
4
1
作者
周永列
吕亚萍
许武林
胡惟孝
机构
浙江省人民医院中心实验室
浙江工业大学药学院
出处
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2008年第10期1127-1133,共7页
基金
浙江省医学重点学科建设资助项目(07-010)
浙江省医药卫生资助项目(2007A008)
文摘
目的:建立用连续荧光监测法测定蛋白酶体活性的方法,研究其在筛选蛋白酶体抑制剂中的应用价值。方法:用特异性荧光多肽底物Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC(Suc-LLVT-AMC)、Z-Val-Val-Arg-AMC(ZVVA-AMC)、Z-Leu-Leu-Glu-βNA(ZLLG-βNA),分别测定蛋白酶体的糜凝乳蛋白酶样(chy-motrypsin-like,CT-L)、胰蛋白酶样(trypsin-like,T-L)和肽基谷氨酰肽水解酶样(PGPH-like,PGPH-L)活性,对测定条件优化,并进行方法学评价。用该法测定了硼替佐米(PS-341)和四嗪二甲酰胺(ZG-DHu-1)对纯20S蛋白酶体和B16、Namalwa细胞蛋白酶体提取物抑制作用。结果:连续荧光监测法测定蛋白酶体活性的最适pH为8.2;0.3g/LSDS仅对CT-L活性有激活作用;CT-L、T-L、PGPH-L的Km分别为3.55、4.12、4.88μmol/L;酶反应进程曲线的线性期达20min;线性范围为测定纯20S蛋白酶体时,其蛋白浓度分别达100、120、100μg/L,测定B16细胞蛋白酶体提取物时,其蛋白浓度均达200mg/L;精密度的批内CV为(2.25～5.78),批间CV在(3.75～8.42)。用该法测定了PS-341对20S蛋白酶体CT-L、T-L、PGPH-L的抑制活性,其IC50分别为12.36、12.42、24.40nmol/L;测定ZGDHu-1对20S蛋白酶体抑制活性,IC50分别为2.24、0.92、0.51μmol/L。结论:连续荧光监测法测定蛋白酶体活性为快速、有效、大规模筛选蛋白体抑制剂类药物提供了一个技术平台,也为临床上应用蛋白酶体抑制剂治疗提供了一个有用的检测指标。
关键词
连续
荧光监测法
蛋白酶体
抑制剂
硼替佐米
四嗪二甲酰胺
Keywords
fluorescence kinetic assays
proteasome
inhibitor
Bortezomib
N
N -di-（m-methylphenyi）-3
6-dimethyl-1
4-dihydro-1
2
4
5-tetrazine-1
4-dicarboamide
分类号
R965.1 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
餐饮业油烟气中醛类化合物的荧光法测定
被引量：
9
2
作者
刘光明
王凯雄
臧荣春
古贺实
机构
浙江农业大学环保系
日本产业医科大学仪器分析室
出处
《环境污染与防治》
CAS
CSSCI
CSCD
北大核心
1998年第4期38-41,共4页
基金
杭州环保局科研项目
文摘
提出了餐饮业油烟气中醛类化合物的荧光测定方法。通过试验选择丙醇作为油烟气中醛类化合物的吸收剂。研究了Hantzsch反应在测定油烟气中醛类化合物时的反应条件。样品与荧光试剂等体积混合,在pH 6.0的体系中,57℃下反应15min。在λex=436nm、λem=504nm处测反应产物的荧光强度,从而确定油烟空气中的醛类化合物含量(以甲醛计)。吸收液的检出限为9.3×10^(-4)μg/mL测定范围为0.005～1.000μg/mL。
关键词
油烟气
醛类化合物
荧光监测法
餐饮业
大气
监测
Keywords
Fluorometric determination Restaurants' oil smoke Aldehydes
分类号
X831 [环境科学与工程—环境工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
连续荧光监测法测定蛋白酶体活性及其在筛选蛋白酶体抑制剂中的应用
周永列
吕亚萍
许武林
胡惟孝
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2008
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
餐饮业油烟气中醛类化合物的荧光法测定
刘光明
王凯雄
臧荣春
古贺实
《环境污染与防治》
CAS
CSSCI
CSCD
北大核心
1998
9
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职称材料
已选择
0
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