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甘精胰岛素生物学活性定量免疫荧光测定法和胰岛素生物测定法的等效性研究 被引量:1
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作者 高益敏 张红梅 +3 位作者 何开勇 尹登科 孙备 许雷鸣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2193-2199,共7页
目的建立甘精胰岛素基于转基因细胞CHO-INSRB 1284的定量免疫荧光生物学活性测定法(In-Cell Western,ICW),并将其与《中国药典》胰岛素生物测定法进行等效性研究。方法CHO-INSRB 1284细胞以1.5×10^(8) L^(-1)细胞密度铺板,1500μmo... 目的建立甘精胰岛素基于转基因细胞CHO-INSRB 1284的定量免疫荧光生物学活性测定法(In-Cell Western,ICW),并将其与《中国药典》胰岛素生物测定法进行等效性研究。方法CHO-INSRB 1284细胞以1.5×10^(8) L^(-1)细胞密度铺板,1500μmol·L^(-1)甘精胰岛素稀释25倍后再进行3倍系列梯度稀释,在微孔板刺激细胞20 min,经固定、透化及抗体孵育步骤,利用odyssey双色红外荧光成像系统,进行定量免疫荧光生物学活性检测。结果ICW中甘精胰岛素的浓度与相对效价具有良好的量效关系;方法专属性好,相对准确度、中间精密度及线性均符合要求;7批甘精胰岛素样品采用两种方法测定的生物学活性结果相对偏差低于10%,用SPSS软件和SAS软件分析,表明方法具有相关性及等效性。结论建立的甘精胰岛素生物学活性定量免疫荧光测定法,方法专属性好,准确度及精密度高,与体内胰岛素生物测定法具有相关性和等效性,可用于甘精胰岛素的体外药效评价和质量控制。 展开更多
关键词 生物学活性 甘精胰岛素 定量免疫荧光测定法 转基因细胞 学验证 等效性评价
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血浆中游离还原型及氧化型谷胱甘肽的荧光测定法 被引量:12
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作者 王秋林 王浩毅 +4 位作者 丁怡 乔小蓉 彭克军 林霞 王树人 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1834-1838,共5页
文章建立了快速、可同时检测血浆中游离的还原型和氧化型谷胱甘肽(即GSH和GSSG)的方法,并评价了血浆中GSH/GSSG的氧化还原状态。利用二硫苏糖醇将GSSG还原成两分子的GSH,使GSH在pH8.0时与邻苯二甲醛(OPA)结合生成荧光产物GSH-OPA,用荧... 文章建立了快速、可同时检测血浆中游离的还原型和氧化型谷胱甘肽(即GSH和GSSG)的方法,并评价了血浆中GSH/GSSG的氧化还原状态。利用二硫苏糖醇将GSSG还原成两分子的GSH,使GSH在pH8.0时与邻苯二甲醛(OPA)结合生成荧光产物GSH-OPA,用荧光分光光度仪测定其荧光值,从而对GSH和GSSG进行定量分析。并运用此方法测量青年健康志愿者静脉血中的游离GSH和GSSG。该法最低可检测出测定管中11.4 pmol.L-1GSH以及5.7 pmol.L-1GSSG。测量GSH批内和批间变异系数分别4.6%和3.9%,GSSG批内和批间变异系数分别为3.5%和4.1%,GSH,GSSG加标准品后的回收率分别为(99.77±5.70)%和(99.28±4.73)%。测定健康青年志愿者血浆中游离GSH,GSSG的含量分别为(16.5±2.4)nmol.mL-1和(1.7±0.35)nmol.mL-1。 展开更多
关键词 血浆 GSH GSSG 荧光测定法
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肾上腺素和去甲肾上腺素的一种荧光测定法 被引量:3
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作者 张铭 张昌杰 +4 位作者 严定友 夏俊南 代璞 陈钢 张晓 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第2期199-202,共4页
用荧光测定法测定肾上腺素和去甲肾上腺素的含量,研究结果表明:在缓冲液pH5时,肾上腺素和去甲肾上腺素均被氧化,其荧光强度与肾上腺素和去甲肾上腺素的浓度正相关.肾上腺素和去甲肾上腺素的混合液在pH3时,其荧光强度与浓度... 用荧光测定法测定肾上腺素和去甲肾上腺素的含量,研究结果表明:在缓冲液pH5时,肾上腺素和去甲肾上腺素均被氧化,其荧光强度与肾上腺素和去甲肾上腺素的浓度正相关.肾上腺素和去甲肾上腺素的混合液在pH3时,其荧光强度与浓度正相关;pH5时,也为正相关.结论:1.在缓冲液为pH3时,仅肾上腺素被氧化,去甲肾上腺素不被氧化;2.在缓冲液为pH5时,肾上腺素和去甲肾上腺素均被氧化,但相同浓度时去甲肾上腺素的荧光强度远小于肾上腺素的. 展开更多
关键词 肾上腺素 去甲肾上腺素 荧光测定法
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牛奶中大肠杆菌(Escherichia coli)生长的荧光测定法 被引量:1
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作者 方维焕 施明华 《浙江农业大学学报》 CSCD 1992年第4期59-62,共4页
大肠杆菌(Escherichia coli)产生的β-葡糖苷酸酶可以分解4-甲基伞形酮酰β-D-葡糖醛酸苷(4-MUG),形成产生荧光的终产物:4-甲基伞形酮,本试验将4-MUG加入牛奶中并应用荧光扫描仪检测酶解终产物的荧光强度以判断大肠杆菌在牛奶中的生长状... 大肠杆菌(Escherichia coli)产生的β-葡糖苷酸酶可以分解4-甲基伞形酮酰β-D-葡糖醛酸苷(4-MUG),形成产生荧光的终产物:4-甲基伞形酮,本试验将4-MUG加入牛奶中并应用荧光扫描仪检测酶解终产物的荧光强度以判断大肠杆菌在牛奶中的生长状况.试验结果表明,荧光强度自第4小时起开始上升,滞后于活菌数的增加,但荧光度增强与活菌数增加具有较好的一致性,而且方法快速,简便,应用荧光分析法初步证明乳酸菌对大肠杆菌的生长未见有抑制作用. 展开更多
关键词 牛奶 大肠杆菌 荧光测定法
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荧光测定法在药敏试验中的应用
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作者 施明华 方维焕 +1 位作者 李央群 蒋成东 《浙江农业学报》 CSCD 1995年第6期477-482,共6页
本试验采用荧光测定法比较了几种常用抗菌素对牛奶和肉汤中金黄色葡萄球菌的抗菌作用。结果表明:红霉素、链霉素、卡那霉素、庆大霉素对该菌的抗菌作用较理想;氨苄青霉素、青霉素G的作用较弱;相同浓度(6mg/L)的抗菌素在肉汤... 本试验采用荧光测定法比较了几种常用抗菌素对牛奶和肉汤中金黄色葡萄球菌的抗菌作用。结果表明:红霉素、链霉素、卡那霉素、庆大霉素对该菌的抗菌作用较理想;氨苄青霉素、青霉素G的作用较弱;相同浓度(6mg/L)的抗菌素在肉汤中的抗菌效果比在牛奶中强;在正常牛奶中,不同浓度抗菌素(6、12、24、48mg/L)的抗菌作用有一定差异。本试验提示应用荧光测定法进行药敏试验具有快速、简便的特点,同时又克服了琼脂扩散法和试管比浊法不能用牛奶进行试验之不足。试验结果对于奶牛乳房炎治疗的临床选药具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 荧光测定法 抗菌素 金黄色葡萄球菌
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血浆维生素E的荧光测定法
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作者 邵丽丽 陶濬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期206-207,共2页
维生素E含量的测定,常用的分析方法有分光光度法、荧光光度法、各种色谱法等。由于VE含量少,分光光度法干扰因素较多,灵敏度与准确性较差。而色谱法步骤繁琐,仪器设备昂贵,一般实验室不具备。
关键词 血浆 维生素E 荧光测定法
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停流-荧光动力学分析法测定痕量钛的研究 被引量:4
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作者 黄厚评 蔡汝秀 +1 位作者 高登云 曾云鹗 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1992年第12期1513-1516,共4页
利用自行组装的停流-荧光动力学分析仪,采用停流法汇合流体动力注入技术,研究了钛与3.5-二溴水杨基荧光酮的荧光增强动力学反应性质,讨论了流速、进样时间对方法灵敏度和精密度的影响,提出了一个快速、简便、精确测定钛的分析方法,并用... 利用自行组装的停流-荧光动力学分析仪,采用停流法汇合流体动力注入技术,研究了钛与3.5-二溴水杨基荧光酮的荧光增强动力学反应性质,讨论了流速、进样时间对方法灵敏度和精密度的影响,提出了一个快速、简便、精确测定钛的分析方法,并用于稀土样品及合成样品中痕量钛的测定.方法检测限为8×10^(-3)ppm,大多数元素的干扰均可用动力学方法消除. 展开更多
关键词 停流技术 荧光测定法
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流动注射催化动力学荧光光度法测定痕量钌 被引量:4
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作者 王克太 陈兴国 胡之德 《贵金属》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第3期40-42,共3页
作者发现Ru(Ⅲ)对KBrO3氧化罗丹明6G使其荧光强度降低的反应具有显著的催化作用,并将这一新的指示反应和流动注射分析技术相结合,建立了测定Ru的催化动力学流动注射荧光光度分析新方法。其检测限为08μg/L,线性... 作者发现Ru(Ⅲ)对KBrO3氧化罗丹明6G使其荧光强度降低的反应具有显著的催化作用,并将这一新的指示反应和流动注射分析技术相结合,建立了测定Ru的催化动力学流动注射荧光光度分析新方法。其检测限为08μg/L,线性范围为20~600μg/L,进样频率为65次/h。该方法已用于人工合成样品中痕量Ru的测定,结果满意。 展开更多
关键词 荧光测定法 流动注射 催化动力学
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血浆还原型谷胱甘肽荧光测定改良法 被引量:33
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作者 唐爱国 杨锡兰 《湖南医科大学学报》 CSCD 1990年第3期293-295,共3页
本法系在Cohn和Lyle的荧光分光光度法的基础上,以10%三氯醋酸代替25%HPO_3在常温(18~30℃)下去蛋白,并以pH8.3磷酸盐缓冲液代替pH8.0的该液。本法的重复性试验和回收试验结果满意,最低检出限为25ng/ml,标准曲线至少在2.5μg/ml内呈... 本法系在Cohn和Lyle的荧光分光光度法的基础上,以10%三氯醋酸代替25%HPO_3在常温(18~30℃)下去蛋白,并以pH8.3磷酸盐缓冲液代替pH8.0的该液。本法的重复性试验和回收试验结果满意,最低检出限为25ng/ml,标准曲线至少在2.5μg/ml内呈线性。用本法测定39例健康献血员,血浆GSH值为15.125±3.383μmol/L,男女性别无明显差异。本法灵敏、准确可靠、操作简单、标本用量少。 展开更多
关键词 谷胱甘肽 血浆 荧光测定法
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丙酮和乙醇双水相萃取、荧光法测定痕量维生素B_2 被引量:16
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作者 龙文清 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期2098-2101,共4页
诸如乙醇、丙酮和乙腈等水溶性小分子有机溶剂在盐的作用下能够形成双水相体系用于目标物质的萃取。正是基于此,提出了丙酮-盐-水和乙醇-盐-水体系双水相萃取、荧光测定痕量维生素B2的新方法。研究了盐和有机溶剂种类及用量、萃取时间... 诸如乙醇、丙酮和乙腈等水溶性小分子有机溶剂在盐的作用下能够形成双水相体系用于目标物质的萃取。正是基于此,提出了丙酮-盐-水和乙醇-盐-水体系双水相萃取、荧光测定痕量维生素B2的新方法。研究了盐和有机溶剂种类及用量、萃取时间、共存物和酸度等的影响。发现,丙酮-(NH4)2SO4-H2O和乙醇-(NH4)2SO4-H2O体系对维生素B2的一次性萃取率分别为97.6%~98.4%和94.2%~95.5%;在最适条件下,两种体系测定维生素B2的线性范围分别为1.5×10-7~3.5×10-6mol.L-1和2.0×10-7~1.5×10-6mol.L-1,检出限分别为0.031和0.041μg。该方法已成功用于片剂和注射液中维生素B2的测定,相对标准偏差1.5%~2.2%,与中国药典方法对照,相对误差-1.8%~1.1%。与传统的液-液萃取和固相萃取比较,本方法具有操作简便、萃取率高、干扰小、低毒等显著特点。 展开更多
关键词 双水相萃取 维生素B2 荧光测定法 丙酮 乙醇 硫酸铵
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催化荧光法测定人发中痕量锰 被引量:4
11
作者 王占玲 李建中 +1 位作者 文美乐 章竹君 《陕西师大学报(自然科学版)》 CSCD 1993年第1期40-42,共3页
研究了 pH 为4.8的 HAc—NaAc 缓冲体系中高碘酸钾氧化罗丹明6G、锰(Ⅱ)催化、氨三乙酸活化的催化反应,建立了一个催化荧光法测定痕量锰的新方法.线性范围为3.3~25ng/25mL.检出限为3.3ng/25mL,用于发样中痕量锰的测定,结果满意.
关键词 催化 荧光测定法 毛发
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茴香酸荧光分析法测定血清中黄芪甲甙 被引量:5
12
作者 杜鸣 刘养清 +1 位作者 严志 徐秉玖 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期274-276,共3页
目的 :建立血清中黄芪甲甙含量的荧光分析法。方法 :利用茴香酸在硫酸介质中与黄芪甲甙反应产生强烈荧光的特性 ,测定血清中的黄芪甲甙。结果 :黄芪甲甙与茴香酸的反应产物的最大激发波长为Ex =32 0nm ,最大发射波长为Em =387nm。黄芪... 目的 :建立血清中黄芪甲甙含量的荧光分析法。方法 :利用茴香酸在硫酸介质中与黄芪甲甙反应产生强烈荧光的特性 ,测定血清中的黄芪甲甙。结果 :黄芪甲甙与茴香酸的反应产物的最大激发波长为Ex =32 0nm ,最大发射波长为Em =387nm。黄芪甲甙在 0 .2~ 40 .0mg·L-1范围内呈线性关系。最低检出限为 0 .0 2mg·L-1。测定样品的回收率为 98.8%~ 10 2 .4%。结论 :本文所叙述的荧光分析法具有灵敏度高、选择性好、检出限低、无干扰等优点 。 展开更多
关键词 贡人芪甙 茴香酸 荧光光度测定 黄芪甲甙 黄芪
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测定细胞培养上清液中亚硝酸盐的荧光分光光度法 被引量:5
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作者 方步武 靳珠华 +1 位作者 林秀珍 吴咸中 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1437-1440,共4页
目的 :建立检测细胞培养上清液中亚硝酸盐的方法。方法 :以 2 ,3 -二氨基萘与亚硝酸盐反应生成荧光产物 2 ,3 -二氨基萘三唑或 1-[H] -萘三唑 ,用荧光分光光度法测定。结果 :2 ,3 -二氨基萘浓度为 0 63mmol·L- 1,反应液和终止反应... 目的 :建立检测细胞培养上清液中亚硝酸盐的方法。方法 :以 2 ,3 -二氨基萘与亚硝酸盐反应生成荧光产物 2 ,3 -二氨基萘三唑或 1-[H] -萘三唑 ,用荧光分光光度法测定。结果 :2 ,3 -二氨基萘浓度为 0 63mmol·L- 1,反应液和终止反应后pH值各为 2 0 0和 12 10 ,2 0℃水浴 15min是较适测定条件。本法的检出限为 61 3 4nmol·L- 1,日内和日间变异系数分别小于 3 %和 5% ,加入NaNO2 0 3 6、1 45、2 54nmol的回收率各为 99 12 %±4 64%、10 3 2 8%± 2 68%、10 5 14 %± 4 3 6%。测定大鼠腹腔巨噬细胞、大鼠胎鼠大脑半球神经细胞培养上清液亚硝酸盐含量分别为 ( 10 9 95± 4 57) μmol·L- 1和 ( 6 52± 1 57) μmol·L- 1,后者的 95%分布范围为 3 44-9 60 μmol·L- 1。核磁共振氢谱显示标准品化学位移δ7 3 3 0 2 7ppm和细胞培养上清液化学位移δ7 3 3 0 2 3ppm。结论 :本法特异、敏感、快速、简便 。 展开更多
关键词 细胞培养上清液 亚硝酸盐类 荧光光度测定 一氧化氮 PH值
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香草醛-磷酸体系荧光分光光度法测定黄芪甲甙 被引量:10
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作者 杜鸣 刘养清 +1 位作者 刘明杰 徐秉玖 《北京医科大学学报》 CSCD 2000年第3期248-250,共3页
建立香草醛 磷酸体系荧光分光光度法测定黄芪甲甙的方法。方法 :利用在磷酸条件下香草醛与黄芪甲甙的荧光反应测定黄芪甲甙。结果 :黄芪甲甙与香草醛的反应产物的最大激发波长Ex =36 5nm ,最大发射波长Em =430nm。黄芪甲甙在 0 .0~ 2 ... 建立香草醛 磷酸体系荧光分光光度法测定黄芪甲甙的方法。方法 :利用在磷酸条件下香草醛与黄芪甲甙的荧光反应测定黄芪甲甙。结果 :黄芪甲甙与香草醛的反应产物的最大激发波长Ex =36 5nm ,最大发射波长Em =430nm。黄芪甲甙在 0 .0~ 2 0 .0mg·L-1范围呈良好的线性关系 ,最低检测限为 0 .10 6mg·L-1,测定样品的回收率为 95 .97%~ 10 2 .1%。结论 :本方法具有灵敏度高、检测限低、直接测定无干扰等优点。测定黄芪口服液、中药复方补阳还五汤及含药猪血清等多种类型样品中的黄芪甲甙含量 ,结果满意。 展开更多
关键词 黄芪甙 黄芪口服液 补阳还五汤 荧光光度测定
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快速荧光素测定法在抗肿瘤药物筛选中的应用 被引量:4
15
作者 陈军 战洪生 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1996年第7期495-497,共3页
快速荧光素测定法是一种近几年发展起来的、应用非常广泛的体外药物敏感性测定方法。本实验通过其在抗肿瘤药物筛选中的应用,对此方法进行了探讨和改进,使其更简便易行。实验结果表明,荧光素测定法具有线性好,测定范围宽的优点。此... 快速荧光素测定法是一种近几年发展起来的、应用非常广泛的体外药物敏感性测定方法。本实验通过其在抗肿瘤药物筛选中的应用,对此方法进行了探讨和改进,使其更简便易行。实验结果表明,荧光素测定法具有线性好,测定范围宽的优点。此外,还具有快速、灵敏和重现性好的特点。适用于大量抗肿瘤药物的普筛和临床抗肿瘤药物的预试。 展开更多
关键词 荧光测定 抗肿瘤药 药物敏感性
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时间决定性荧光免疫测定法用于水溶性血型物质定量的研究 被引量:4
16
作者 王保捷 贾静涛 李春梅 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1996年第3期247-250,共4页
将时间决定性荧光免疫测定法(TR-FIA)用于水溶性血型物质的检测,并以人工合成的血型物质作为参照,对一个体的部分体液、分泌液中的血型物质进行了定量分析。结果表明,TR-FIA法敏感度高,重复性好,对唾液、鼻汁、精浆... 将时间决定性荧光免疫测定法(TR-FIA)用于水溶性血型物质的检测,并以人工合成的血型物质作为参照,对一个体的部分体液、分泌液中的血型物质进行了定量分析。结果表明,TR-FIA法敏感度高,重复性好,对唾液、鼻汁、精浆、粪便、尿液、汗液及泪液中的血型物质均能进行定量检测。 展开更多
关键词 血型物质 时间决定性荧光免疫测定 定量测定
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高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中的单胺类神经递质 被引量:1
17
作者 金忠秀 许媛媛 +1 位作者 李平 储成顶 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第6期772-774,共3页
目的建立同时检测小鼠脑内的去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)3种神经递质的高效液相色谱方法。方法采用的色谱条件为:C18柱分离,梯度洗脱。结果方法的检测限(以3倍信噪比计算)2.5μg/L以下,回收率均在87.8%~105.7%之间,... 目的建立同时检测小鼠脑内的去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)3种神经递质的高效液相色谱方法。方法采用的色谱条件为:C18柱分离,梯度洗脱。结果方法的检测限(以3倍信噪比计算)2.5μg/L以下,回收率均在87.8%~105.7%之间,样品日内测定峰面积的相对标准偏差在3.4%以下。结论该方法具有检测灵敏度高、样品制备简便等优点,对小鼠脑内的3种单胺类递质的检测具有实用价值。 展开更多
关键词 生物源单胺类 色谱 高效液相 荧光光度测定
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高效液相色谱—荧光检测法测定血清色氨酸 被引量:2
18
作者 唐爱国 王清平 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期569-571,共3页
目的 :建立快速、直接测定色氨酸的方法。方法 :血清标本以高氯酸去蛋白后 ,取上清液进样 ,高效液相色谱荧光检测法测定 ,用 2 0 %乙腈水溶液作流动相 ,激发波长 2 5 4nm ,发射波长 313nm。结果 :色氨酸的线性范围为 1.2 2~ 4 0 0 μmo... 目的 :建立快速、直接测定色氨酸的方法。方法 :血清标本以高氯酸去蛋白后 ,取上清液进样 ,高效液相色谱荧光检测法测定 ,用 2 0 %乙腈水溶液作流动相 ,激发波长 2 5 4nm ,发射波长 313nm。结果 :色氨酸的线性范围为 1.2 2~ 4 0 0 μmol·L- 1 ,最低检测限为 0 .1μmol·L- 1 ,批内变异系数 (CV)为 2 .5 7% ,批间CV为 3.6 6 % ,平均回收率为 97.13%。进样后 5min可完成检测。苯丙氨酸、酪氨酸、5 羟色胺、5 羟吲哚乙酸等物质不干扰实验。结论 :本方法灵敏度好、特异性高、方法简便快速 。 展开更多
关键词 血清 高效液相色谱 荧光光度测定 色氨酸
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植物样品中维生素B_1的简化荧光法测定
19
作者 陈竹君 《陕西农业科学》 北大核心 1993年第6期37-38,共2页
本文简化了荧光法测定维生素B_1的方法,将吸附于人造沸石上的维生素B_1直接进行氧化,然后直接提取于丁醇中进行测定.分析结果表明,该法回收率高,重现性好,快速省时,简便.
关键词 植物 维生素B1 荧光测定法
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QD-Infinity免疫荧光定量测定法快速筛查牛乳中铅的含量
20
作者 赵义良 刘松雁 +2 位作者 何立宁 崔荣飞 张梦雪 《今日畜牧兽医》 2019年第8期3-3,2,共2页
目的:利用QD-Infinity免疫荧光测定法快速测定牛乳中铅的含量,为牛乳中铅现场筛查提供快速、有效的检测/监测手段。方法:通过测定牛乳质控样品以及生鲜牛乳样品,结合与原子吸收石墨炉法比较测定,对QD-Infinity免疫荧光测定法的准确度与... 目的:利用QD-Infinity免疫荧光测定法快速测定牛乳中铅的含量,为牛乳中铅现场筛查提供快速、有效的检测/监测手段。方法:通过测定牛乳质控样品以及生鲜牛乳样品,结合与原子吸收石墨炉法比较测定,对QD-Infinity免疫荧光测定法的准确度与精密度进行全面评估。结果:牛乳质控样品铅含量测定值均在其理论值范围内;回收率结果为92.7%、92.0%和96.0%;与原子吸收石墨炉法比较测定20份牛乳,结果的相对偏差在0.56%~5.77%。结论:QD-Infinity免疫荧光测定法能用于牛乳中铅的定量检测,是一种有效的、实用的分析方法。 展开更多
关键词 QD-Infinity免疫荧光测定法 牛乳 定量检测
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