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别藻蓝蛋白标记抗鸡IgG荧光抗抗体的高效制备与鉴定 被引量:1
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作者 朱丽萍 颜世敢 +1 位作者 李雁冰 张玉忠 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第1期110-115,共6页
将别藻蓝蛋白(Allophycocyanin,APC)与抗鸡IgG抗体交联制备荧光抗抗体,用于鸡疫病的间接荧光检测。首先采用羟基磷灰石层析和阴离子交换层析法高效制备APC,然后利用蛋白质交联技术高效制备荧光抗抗体。分别用摩尔比50∶1、100∶1的交联... 将别藻蓝蛋白(Allophycocyanin,APC)与抗鸡IgG抗体交联制备荧光抗抗体,用于鸡疫病的间接荧光检测。首先采用羟基磷灰石层析和阴离子交换层析法高效制备APC,然后利用蛋白质交联技术高效制备荧光抗抗体。分别用摩尔比50∶1、100∶1的交联剂3-(2-吡啶二巯基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(SPDP)将APC、抗鸡IgG抗体衍生,衍生物以摩尔比1∶1液相交联,经高压液相色谱(HPLC)纯化制备出APC标记的抗鸡IgG荧光抗抗体,最后对制备的荧光抗抗体从荧光特性、吸收光谱特性、抗体活性、稳定性及纯度等方面进行鉴定。结果表明,APC标记的抗鸡IgG荧光抗抗体交联效率达95%以上,纯度达电泳纯,红色荧光明亮,抗体活性高,4℃保存90 d荧光亮度和抗体活性稳定。研制的APC标记的抗鸡IgG荧光抗抗体可作为通用荧光抗抗体用于鸡传染性疾病的间接免疫荧光检测。 展开更多
关键词 别藻蓝蛋白 蛋白质标记 荧光抗抗体
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藻红蛋白标记抗鸡IgG荧光抗体的高效制备 被引量:6
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作者 颜世敢 朱丽萍 +2 位作者 张玉忠 周百成 张秀美 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期127-131,共5页
藻红蛋白的斯托克位移大,荧光量子产率高,荧光明亮,是一种应用前景广阔的荧光染料。制约藻红蛋白应用的主要因素是分离纯化困难及其成品售价昂贵。通过我们已经建立的藻红蛋白低成本高效制备平台,使其应用于预防兽医学检测成为可能。首... 藻红蛋白的斯托克位移大,荧光量子产率高,荧光明亮,是一种应用前景广阔的荧光染料。制约藻红蛋白应用的主要因素是分离纯化困难及其成品售价昂贵。通过我们已经建立的藻红蛋白低成本高效制备平台,使其应用于预防兽医学检测成为可能。首次采用适宜摩尔浓度的交联剂SPDP将藻红蛋白与抗鸡IgG抗抗体以摩尔比1∶1高效交联,经高效液相色谱法纯化制备出藻红蛋白标记的抗鸡IgG荧光抗抗体。本研究对制备的荧光抗抗体从荧光特性、吸收光谱特性、抗体活性、纯度及稳定性等方面进行了鉴定。结果表明,藻红蛋白标记的抗鸡IgG荧光抗体为电泳纯,荧光明亮,抗体活性高,性质稳定,可用于鸡传染病的间接免疫荧光检测。 展开更多
关键词 藻红蛋白 荧光标记 荧光抗抗体
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用链球菌自制荧光抗体检测猪链球菌的研究 被引量:7
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作者 于新和 陶海静 +1 位作者 杜桂欣 刘景超 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期462-464,共3页
为达到利用荧光抗体建立一种诊断猪链球菌病的有效方法的目的。先提取兔抗猪链球菌IgG ,用FITC标记并进一步用G5 0过滤 ,制备出兔抗猪链球菌荧光抗体。同时利用吸收试验、特异性抑制试验对自制的荧光抗体进行了检验。结果表明利用自制... 为达到利用荧光抗体建立一种诊断猪链球菌病的有效方法的目的。先提取兔抗猪链球菌IgG ,用FITC标记并进一步用G5 0过滤 ,制备出兔抗猪链球菌荧光抗体。同时利用吸收试验、特异性抑制试验对自制的荧光抗体进行了检验。结果表明利用自制荧光抗体进行链球菌病的诊断可在 2~ 3h内对链球菌作出诊断 ,比直接镜检更具有特异性和敏感性。试验中发现人工感染小白鼠 2 0h后 ,小鼠荧光抗体染色均呈阳性 ,其中以血液及肺脏中荧光强度最强 ;链球菌荧光抗体染色与葡萄球菌有一定的交叉 。 展开更多
关键词 猪链球菌病 荧光标记兔猪链球菌抗体 诊断
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抗PML抗体免疫荧光法快速诊断急性早幼粒细胞白血病
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作者 秦亚溱 喻新建 +1 位作者 刘艳荣 陈珊珊 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期76-78,共3页
对35例白血病病人骨髓标本进行抗PML抗体免疫荧光测定。19例急性早幼粒细胞白血病(APL)标本中,11例未治、3例服ATRA4天以内,以及3例复发病人均为典型APL荧光表现,2例ATRA诱导完全缓解APL病人荧光表现为非APL型。16例未治的非APL病人均... 对35例白血病病人骨髓标本进行抗PML抗体免疫荧光测定。19例急性早幼粒细胞白血病(APL)标本中,11例未治、3例服ATRA4天以内,以及3例复发病人均为典型APL荧光表现,2例ATRA诱导完全缓解APL病人荧光表现为非APL型。16例未治的非APL病人均为典型非APL表现。研究结果表明,抗PML抗体免疫荧光法简便、快速、特异,适于诊断未治和复发的APL病人。 展开更多
关键词 PML抗体免疫荧光 急性早幼粒细胞白血病 PML蛋白 PML/RARa融合蛋白
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