期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到143篇文章
< 1 2 … 8 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
三种ELISA方法与荧光抗体病毒中和试验检测狂犬病抗体的一致性分析 被引量：1
1
作者 洪伟彬 莫钻兰 +4 位作者 殷三鸿 叶毅飞 李敏 徐振娜 黄世品 《广东畜牧兽医科技》 2023年第2期70-73,共4页
为筛选合适狂犬病抗体检测的试剂盒,该研究以荧光抗体病毒中和试验(fluorescent antibody virus neutralization FAVN)方法为参照,与3个ELISA试剂盒方法进行比对,进行一致性分析,并计算了三种试剂盒的敏感性和特异性。结果显示:三种不... 为筛选合适狂犬病抗体检测的试剂盒,该研究以荧光抗体病毒中和试验(fluorescent antibody virus neutralization FAVN)方法为参照,与3个ELISA试剂盒方法进行比对,进行一致性分析,并计算了三种试剂盒的敏感性和特异性。结果显示:三种不同的试剂盒中,试剂盒A与FAVN一致性最好,Kappa值为0.605,有较高的一致性,符合率为86%;试剂盒B次之,Kappa值为0.485,为中度一致,符合率为80%;试剂盒C与FAVN的一致性最差,Kappa值为0.310,符合率也最低,为74%。在敏感性和特异性方面,试剂盒A的敏感性最高,为92.1%,试剂盒B的特异性最高,为72.7%。本研究为临床上科学的筛选试剂盒提供了依据。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 Kappa检验 荧光抗体病毒中和试验 敏感性 特异性
在线阅读 下载PDF
克里米亚-刚果出血热病毒抗体荧光素酶免疫吸附法检测方法的建立与应用
2
作者 陈绮 马晋哲 +3 位作者 徐丽泰 黎新月 方宇婷 万成松 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第3期290-296,共7页
目的 建立基于克里米亚-刚果出血热病毒(Crimean-Congo haemorrhagic fever virus, CCHFV)糖蛋白C (Glycoprotein C, Gc)特异性抗原的荧光素酶免疫吸附法(Luciferase immunosorbent assay, LISA),用于检测CCHFV IgG抗体。方法 基于CCHFV... 目的 建立基于克里米亚-刚果出血热病毒(Crimean-Congo haemorrhagic fever virus, CCHFV)糖蛋白C (Glycoprotein C, Gc)特异性抗原的荧光素酶免疫吸附法(Luciferase immunosorbent assay, LISA),用于检测CCHFV IgG抗体。方法 基于CCHFV Gc设计3个检测抗原片段,使用分子克隆的方法与纳米荧光素酶(NanoLuc luciferase, NLuc)表达载体pNLF1-N进行连接构建3个重组质粒,通过测序验证重组质粒序列的正确性。将重组质粒分别转染至真核细胞后获得含特异性抗原与荧光素酶的融合蛋白,Western Blot验证融合蛋白的表达,建立CCHFV-LISA检测技术。对其敏感性、特异性及稳定性进行评价,并与商用CCHFV IgG抗体检测试剂盒比较。结果 表达了CCHFV Gc 3个重组抗原片段NLuc-Gc-Full、NLuc-Gc-C1和NLuc-Gc-C2,分子质量分别为80.1 kDa、62.8 kDa和53.9 kDa;其中,NLuc-Gc-C2的检测效能最佳。CCHFV-LISA的检测灵敏度为90.9%,特异度为100%;与商用CCHFV酶联免疫吸附测定试剂盒具有高度一致性;重复性实验显示同批板间、板内检测值差异无统计学意义。结论 LISA检测CCHFV IgG抗体,具有特异性强、灵敏度高、操作便捷等特点,可用于疫源地CCHFV血清学诊断与流行病学调查,为克里米亚-刚果出血热的监测和预警提供技术支撑。 展开更多
关键词 克里米亚-刚果出血热病毒 Gc蛋白 荧光素酶免疫吸附试验 IGG抗体 检测
在线阅读 下载PDF
间接免疫荧光试验在西尼罗病毒抗体检测中的初步应用 被引量：6
3
作者 张久松 张泮河 +3 位作者 詹琳 徐伟才 司炳银 曹务春 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第6期476-478,共3页
目的了解人群血清西尼罗病毒(WNV)抗体存在的本底,探讨WNV与乙型脑炎病毒(JEV)的免疫交叉反应。方法以新兵入伍健康体检时收集的男性血清347份为检测标本,应用建立的间接免疫荧光试验(IFA)对WNV与JEV的IgG抗体进行检测。结果血清WNV和JE... 目的了解人群血清西尼罗病毒(WNV)抗体存在的本底,探讨WNV与乙型脑炎病毒(JEV)的免疫交叉反应。方法以新兵入伍健康体检时收集的男性血清347份为检测标本,应用建立的间接免疫荧光试验(IFA)对WNV与JEV的IgG抗体进行检测。结果血清WNV和JEV的抗体阳性率分别为3.2%(11/347)和5.7%(14/244);在同时检测了两种病毒抗体的244份标本中,有3份两者均为阳性,分别占WNV和JEV抗体阳性数的60%(3/5)和21%(3/14)。结论人群对WNV缺乏免疫力,JEV抗体对WNV的交叉免疫作用有一定的局限性。 展开更多
关键词 西尼罗病毒 乙型脑炎病毒 血清抗体 间接免疫荧光试验
在线阅读 下载PDF
阻断ELISA与病毒中和试验检测PPR抗体的比较分析 被引量：7
4
作者 汪萍 尹传振 +4 位作者 柏庆 鲁立柱 曹辉 王延 黄炯 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期658-660,共3页
为选择一种简便、快速、敏感性高、特异性好的小反刍兽疫(PPR)血清学检测方法,本实验收集了506份山羊和绵羊血清样品,采用ELISA和病毒中和试验(VNT)两种方法对PPR病毒(PPRV)抗体进行检测。结果显示ELISA和VNT检出的阳性率分别为44.9%和4... 为选择一种简便、快速、敏感性高、特异性好的小反刍兽疫(PPR)血清学检测方法,本实验收集了506份山羊和绵羊血清样品,采用ELISA和病毒中和试验(VNT)两种方法对PPR病毒(PPRV)抗体进行检测。结果显示ELISA和VNT检出的阳性率分别为44.9%和48.6%。两种方法的符合率Kappa值为0.925,表明这两种方法具有较高的一致性,但ELISA更简便、快速、敏感,更便于基层单位使用。本研究为PPR血清流行病学调查及疫苗免疫效果评价方法的选择提供相关的技术参数。 展开更多
关键词 小反刍兽疫抗体 ELISA 病毒中和试验 比较
在线阅读 下载PDF
RT-PCR和免疫荧光抗体试验检测猪瘟病毒的比较研究 被引量：3
5
作者 俞伏松 车勇良 +4 位作者 江斌 吴胜会 林琳 陈少莺 林天龙 《福建农业学报》 CAS 2007年第3期231-234,共4页
根据已发表的CSFV序列合成1对引物，以猪瘟病毒（CSFV）兔化弱毒株为模板，建立并优化了检测CSFV的RT—PCR方法，并与直接荧光抗体试验（DFA）进行比较，检测了15份临床疑似病料。结果如下：应用RT—PCR对CSFV兔化弱毒株RNA进行扩增，... 根据已发表的CSFV序列合成1对引物，以猪瘟病毒（CSFV）兔化弱毒株为模板，建立并优化了检测CSFV的RT—PCR方法，并与直接荧光抗体试验（DFA）进行比较，检测了15份临床疑似病料。结果如下：应用RT—PCR对CSFV兔化弱毒株RNA进行扩增，获得与预期大小相符长为509bp的特异性目的片段，敏感性达到10Pg的CSFV—RNA，对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病毒（PRV）和猪2型圆环病毒（PCV2）进行同条件扩增均为阴性，RT—PCR产物测序结果与文献报道的CSFV不同毒株的核苷酸序列同源性达到95％～99％；15份临床疑似病料应用RT—PCR的检出率为66．7％，而应用免疫荧光试验的检出率为60．0％，二者的总符合率为80％。表明RT—PCR方法比DFA更敏感，两种方法均可用于猪瘟的快速诊断。 展开更多
关键词 RT—PCR 直接荧光抗体试验 检测 猪瘟病毒
在线阅读 下载PDF
中国流行性出血热病毒的抗原性研究——不同毒株间交叉免疫荧光和交叉中和试验 被引量：2
6
作者 何浩 李永珍 +2 位作者 倪大石 周宁 董朝阳 《安徽医科大学学报》 CAS 1990年第4期245-248,共4页
用不同来源EHF病毒毒株免疫家兔制备相应的抗血清,对各株病毒进行交叉免疫荧光测定和交叉中和试验,结果显示交叉免疫荧光法难以对我国不同来源病毒抗原性差异作出型别判断。交叉中和试验,根据同株与异株中和抗体滴度相差4倍的判断标准,... 用不同来源EHF病毒毒株免疫家兔制备相应的抗血清,对各株病毒进行交叉免疫荧光测定和交叉中和试验,结果显示交叉免疫荧光法难以对我国不同来源病毒抗原性差异作出型别判断。交叉中和试验,根据同株与异株中和抗体滴度相差4倍的判断标准,可将病毒分为三个不同的类型:Ⅰ型(野鼠型):Chen、A_(96)、A_3及汉坦76-118;Ⅱ型(家鼠型):R_(22);Ⅲ型(中间型):H_(8205)、L_(99)。Ⅰ型抗体对Ⅱ型(R_(22))病毒与Ⅰ型病毒有相同的中和效力。反之,R_(22)(Ⅱ型)抗体对Ⅰ型病毒的中和滴度则低于同型的4倍;Ⅲ型L_(99)株兼有部份Ⅰ型及Ⅱ型病毒相同水平的中和抗体滴度,而H_(8205)株又缺乏Ⅱ型及Ⅰ型中另一些毒株有效中和能力。 展开更多
关键词 出血热病毒 中和试验 荧光抗体技术
在线阅读 下载PDF
狂犬病毒中和抗体检测试验中病毒回归试验的重要性
7
作者 陈先国 支海兵 +2 位作者 滕颖 吴华伟 刘金玲 《中国兽药杂志》 2004年第4期22-24,共3页
　狂犬病毒中和试验的病毒回归试验表明,病毒攻毒液的实际剂量与理论剂量不完全一致。建议在新版《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》中增加对病毒攻毒实际剂量范围的规定,以使结果的判定更为合理。
关键词 狂犬病毒 中和抗体 回归试验 理论剂量 实际剂量 兽用生物制品
在线阅读 下载PDF
新冠病毒疫苗与单克隆中和抗体各期临床试验设计及评价概述 被引量：1
8
作者 李珊珊 顾静文 +4 位作者 张菁 杨海静 刘薇 喻一奇 张文宏 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2022年第2期190-197,共8页
2019冠状病毒病(COVID-19)仍在全球蔓延,给公共卫生和全球经济带来了巨大负担。疫苗在控制病毒传播和降低死亡率方面发挥着重要作用。此外,单克隆病毒中和抗体亦可降低病毒载量,改善症状,防止病情加重导致住院。目前约有数百项有关COVID... 2019冠状病毒病(COVID-19)仍在全球蔓延,给公共卫生和全球经济带来了巨大负担。疫苗在控制病毒传播和降低死亡率方面发挥着重要作用。此外,单克隆病毒中和抗体亦可降低病毒载量,改善症状,防止病情加重导致住院。目前约有数百项有关COVID-19疫苗及单克隆中和抗体的临床试验正在进行中,疫苗侧重于疾病的预防,而中和抗体侧重于疾病的治疗。两者临床试验的开展遵循不同的技术指导原则进行,在研究目的、试验设计、试验实施、观察要点及结果评价中存在着较大差异,本文概述两者异同点,为新药研发及临床研究人员参考。 展开更多
关键词 疫苗 单克隆中和抗体 临床试验 2019冠状病毒病(COVID-19)
在线阅读 下载PDF
改良血清中和试验检测猪血清中的生殖—呼吸道综合征病毒抗体
9
作者 Yoon,IY 孟令伟 《国外兽医学（畜禽传染病）》 1995年第1期37-39,共3页
关键词 猪病 SRRS 病毒 抗体 血清 中和试验
在线阅读 下载PDF
检测抗人疱疹病毒6型IgG的间接免疫荧光试验的建立及其应用 被引量：12
10
作者 刘军连 徐志凯 +4 位作者 王红英 王德堂 张芳琳 杨乔欣 姚堃 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期181-182,共2页
目的 :建立检测血清中人疱疹病毒 6型 (HHV 6 )IgG的间接免疫荧光试验 (IFA)。方法 :用HHV 6国内分离株感染人脐带血单个核细胞制备抗原片 ,建立检测HHV 6IgG的IFA方法 ,并用于育龄期妇女血清流行病学调查。结果 :建立的IFA具有特异性。... 目的 :建立检测血清中人疱疹病毒 6型 (HHV 6 )IgG的间接免疫荧光试验 (IFA)。方法 :用HHV 6国内分离株感染人脐带血单个核细胞制备抗原片 ,建立检测HHV 6IgG的IFA方法 ,并用于育龄期妇女血清流行病学调查。结果 :建立的IFA具有特异性。对 116份育龄期妇女血清标本检测表明 ,HHV 6IgG的阳性率为 72 .4 % ,几何平均滴度 (GMT)为 1∶6 1;在孕妇和正常未孕妇女之间 ,以及不同孕期的孕妇之间 ,HHV 6IgG的阳性率和GMT均无差异 (P >0 .0 5 )。结论 :建立了具有特异性的IFA法 ,可用于对育龄妇女HHV 展开更多
关键词 人疱疹病毒6型 间接免疫荧光试验 IGG抗体 育龄期妇女 血清流行病学调查
在线阅读 下载PDF
狂犬病疫苗接种人群中狂犬病病毒中和抗体水平分析 被引量：4
11
作者 张磊 张玲 +6 位作者 张天喜 苏克文 谈思维 邵吉 叶海朋 曹承建 黄春萍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期898-902,共5页
目的通过分析狂犬病疫苗接种人群中狂犬病病毒RABV中和抗体特征,为狂犬病防控提供依据。方法收集2019-2020年杭州市职业病防治院犬伤后暴露预防接种门诊抗体检测者信息,经筛选后确定157例RABV中和抗体检测者作为研究对象,采用快速荧光... 目的通过分析狂犬病疫苗接种人群中狂犬病病毒RABV中和抗体特征,为狂犬病防控提供依据。方法收集2019-2020年杭州市职业病防治院犬伤后暴露预防接种门诊抗体检测者信息,经筛选后确定157例RABV中和抗体检测者作为研究对象,采用快速荧光灶抑制试验检测狂犬病毒中和抗体,利用横断面研究方法对狂犬病毒中和抗体水平进行人群特征分析。结果研究对象中,初种者98人,复种者59人,复种者中2-1-1程序比5针法产生的抗体水平更高,其余特征均无统计学差异(P>0.05)。除1例初种者中和抗体效价低于0.5 IU/mL,其余检测者中和抗体效价均高于0.5 IU/mL。狂犬病毒中和抗体水平时间趋势分析显示,狂犬病毒中和抗体水平与时间呈负相关,回归方程为(F=4.974,P=0.031),标准化回归系数为-0.322(t=-2.230,P=0.031)。结论复种者狂犬病毒中和抗体水平与免疫程序有关,2-1-1程序对人体再次免疫应答的效果优于5针法。接种疫苗2年后部分个体出现失保护状态,再次暴露有必要全程接种狂犬病疫苗。 展开更多
关键词 狂犬病 中和抗体 快速荧光灶抑制试验 人群特征
在线阅读 下载PDF
表达绿色荧光蛋白重组狂犬病病毒Flury—LEP的构建及其用于中和抗体检测的研究
12
《今日畜牧兽医》 2010年第9期68-68,共1页
为确定狂犬病病毒（RV）Flury—LEP株外源基因的插入住点及其中和抗体快速检测方法，本研究在建立了RvFlury—LEP株反向遗传操作系统的基础上，构建了表达增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的重组LEP基因组cDNA克隆PcI—LEP—EGFP。并成功拯... 为确定狂犬病病毒（RV）Flury—LEP株外源基因的插入住点及其中和抗体快速检测方法，本研究在建立了RvFlury—LEP株反向遗传操作系统的基础上，构建了表达增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的重组LEP基因组cDNA克隆PcI—LEP—EGFP。并成功拯救出重组病毒（rLEP—EGFP）。 展开更多
关键词 增强型绿色荧光蛋白 狂犬病病毒 重组病毒 中和抗体 LEP 抗体检测 快速检测方法 CDNA克隆
在线阅读 下载PDF
用间接免荧光试验检测猪圆环病毒抗体
13
作者 朱丽清 《畜牧兽医科技信息》 2002年第4期39-40,共2页
关键词 检测技术 间接免荧光试验 猪 圆环病毒抗体
在线阅读 下载PDF
1型登革病毒初次感染患者血清中和抗体的动态反应分析 被引量：2
14
作者 胡冬梅 李洁 +5 位作者 王大虎 狄飚 丘立文 王压娣 丁细霞 车小燕 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1773-1776,1791,共5页
目的研究感染登革病毒(DENV)后,机体DENV中和抗体产生的特点及其动态变化规律。方法采集2006年DENV-1初次感染患者在发病2周之内的,以及同一组患者在2010年随诊期间的血清标本,用本实验室建立的以群特异性DENV NS1抗原捕获ELISA为基础的... 目的研究感染登革病毒(DENV)后,机体DENV中和抗体产生的特点及其动态变化规律。方法采集2006年DENV-1初次感染患者在发病2周之内的,以及同一组患者在2010年随诊期间的血清标本,用本实验室建立的以群特异性DENV NS1抗原捕获ELISA为基础的,可同时测定4型DENV中和抗体的微中和试验(ELISA-MNT),对这两组血清中的DENV中和抗体滴度进行检测。这两组血清标本均检测了全部抗4型DENV的中和抗体。此外,2010年的血清标本还检测了抗3种不同毒株的DENV-1(其中包括1株标准株和2株临床分离株)的中和抗体。结果 2006年和2010年这两组不同时间段的血清标本对全部4型DENV均可显示出一定程度的交叉中和抗体反应,其中,2006年的血清标本交叉中和抗体反应更为明显,表现为其最高的中和抗体针对的甚至是DENV-2,而不是预计中的DENV-1;2010年的血清标本中最高的中和抗体滴度针对的是同型的DENV-1。Mann-whitney U检验显示:对于同型的抗DENV-1中和抗体滴度,2010年的血清要明显高于2006年的血清(U=86.500,P=0.000),但异型中和抗体滴度在两组血清标本中无明显改变。Friedman检验显示,尽管同属DENV-1,但2010年的血清标本对3种不同毒株的DENV-1的中和抗体滴度之间还是存在显著差异(χ2=12.123,P=0.002)。结论 4型交叉中和抗体反应是DENV感染后,尤其是在感染早期中和抗体的产生特点,但只有同型DENV中和抗体滴度可随时间的推移而发生明显的上升;然而即使是同属于一种血清型,不同毒株之间的中和抗体也可能存在差异。 展开更多
关键词 登革病毒 非结构蛋白1 中和抗体 微中和试验
在线阅读 下载PDF
检测新城疫病毒中和抗体的间接ELISA和竞争ELISA方法的初步建立 被引量：4
15
作者 丁炜东 曹丽萍 +3 位作者 张体银 刘秀梵 张如宽 吴艳涛 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2005年第3期13-16,共4页
关键词 间接ELISA 鸡新城疫病毒 NDV F基因 HI试验 SPF鸡 禽病 中和抗体 ELISA方法 保护效力
在线阅读 下载PDF
人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体的生物学鉴定及其小鼠体内中和活性测定 被引量：3
16
作者 闭兰 朱蓉 +4 位作者 张爱华 孙可芳 赵亚杰 王志友 余模松 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第5期397-399,共3页
目的对从噬菌体抗体库中筛选的人源抗狂犬病毒单链抗体A12进行生物学活性鉴定及小鼠体内中和活性检测。方法用免疫荧光法检测其结合感染狂犬病毒CVS的鼠脑组织的能力,用小鼠中和实验测定A12表达产物的体内中和活性。结果免疫荧光试验显... 目的对从噬菌体抗体库中筛选的人源抗狂犬病毒单链抗体A12进行生物学活性鉴定及小鼠体内中和活性检测。方法用免疫荧光法检测其结合感染狂犬病毒CVS的鼠脑组织的能力,用小鼠中和实验测定A12表达产物的体内中和活性。结果免疫荧光试验显示A12表达产物与感染CVS的鼠脑细胞有强的荧光反应。小鼠中和试验结果表明,A12ScFv样品组小鼠有9只存活,而对照组小鼠全部死亡。A12在729倍稀释时能100%保护小鼠抵抗致死量狂犬病毒的脑内攻击。结论A12对狂犬病毒具有一定的中和活性,有可能被用于暴露后狂犬病的预防。 展开更多
关键词 单链抗体 狂犬病毒G蛋白 免疫荧光反应 小鼠体内中和实验
在线阅读 下载PDF
鸡新城疫病毒中和单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：2
17
作者 李青梅 王丽 +9 位作者 冯丽丽 张雨杭 赵东 杨艳艳 邢广旭 柴书军 李赛赛 张丽萍 郭军庆 张改平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第1期127-131,共5页
采用差速离心法纯化鸡新城疫病毒(NDV)标准毒株F48E8,免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤细胞技术制备抗NDV单克隆抗体,旨在为NDV中和抗原表位分析奠定基础。将NDV感染BHK-21细胞,建立异源免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)的单克隆抗体检测方法... 采用差速离心法纯化鸡新城疫病毒(NDV)标准毒株F48E8,免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤细胞技术制备抗NDV单克隆抗体,旨在为NDV中和抗原表位分析奠定基础。将NDV感染BHK-21细胞,建立异源免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)的单克隆抗体检测方法,筛选获得14株分泌抗NDV单克隆抗体杂交瘤细胞株,其单克隆抗体腹水IPMA效价均在0.50×10-2~2.56×10-5(F48E8株和La Sota株)。血凝抑制试验(HI)结果表明,单克隆抗体1G6、2C1、4D2、5F2和13A5具有血凝抑制活性,其HI效价在(6~12)log2(F48E8株)和(9~11)log2(La Sota株)。病毒中和试验结果表明,单克隆抗体5F2和13A5对F48E8株和La Sota株均有明显的病毒中和活性,中和效价分别为1∶400~1∶800和1∶25。夹心ELISA结果表明,单克隆抗体5F2识别NDV HN蛋白,13A5识别F蛋白。综上,成功制备了具有中和活性的NDV单克隆抗体(5F2和13A5)。 展开更多
关键词 鸡新城疫病毒 单克隆抗体 免疫过氧化物酶单层细胞试验 血凝抑制试验 中和试验 中和活性
在线阅读 下载PDF
猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
18
作者 王瑞宁 王勋 +4 位作者 李鸽 李青梅 李存法 杨苏珍 郭军庆 《河南农业科学》 北大核心 2024年第12期167-173,共7页
为了开发检测猪伪狂犬病病毒(PRV)的免疫诊断试剂,使用HEK293F细胞表达的gE重组蛋白免疫BALB/c小鼠。将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)方法筛选阳性杂交瘤细胞株,以... 为了开发检测猪伪狂犬病病毒(PRV)的免疫诊断试剂,使用HEK293F细胞表达的gE重组蛋白免疫BALB/c小鼠。将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)方法筛选阳性杂交瘤细胞株,以期获得对PRV反应性良好的抗gE重组蛋白单克隆抗体。结果显示,获得2株(2B5和8F7)稳定分泌抗PRV gE蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其腹水单克隆抗体的ELISA效价均为1∶1 000000;单克隆抗体亚型鉴定结果表明,2株单克隆抗体的重链均为IgG1亚型,轻链均为Kappa链。单克隆抗体特异性测定结果显示,2株单克隆抗体仅与PRV反应,不与其他常见病毒发生反应;SDS-PAGE结果显示,纯化后的单克隆抗体均在约50 ku和25 ku处有纯度较高的特异性条带;间接免疫荧光试验(IFA)结果表明,制备的2株单克隆抗体与转染gE质粒的293T细胞发生特异性反应。根据Western blot结果,筛选获得的2株单克隆抗体均在120 ku附近出现特异条带,表明这2株单克隆抗体均能特异性识别PRV。综上,成功制备了2株特异性强、效价高的抗gE蛋白单克隆抗体,为后期PRV诊断试剂盒的制备提供重要的生物材料。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 gE蛋白 单克隆抗体 间接免疫荧光试验
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：2
19
作者 刘运超 杨苏珍 +6 位作者 陈玉梅 王聚财 尚延丽 魏蔷 陈维聪 冯华 张改平 《河南农业科学》 北大核心 2021年第12期155-162,共8页
为了制备具有中和活性的抗猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)单克隆抗体,采用血凝试验(HA)鉴定纯化的重组PPV VP2蛋白的活性,将重组VP2蛋白与弗氏佐剂混合后免疫BALB/c小鼠。免疫3次后,小鼠血清的血凝抑制(HI)效价可达1∶2^(16),取免... 为了制备具有中和活性的抗猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)单克隆抗体,采用血凝试验(HA)鉴定纯化的重组PPV VP2蛋白的活性,将重组VP2蛋白与弗氏佐剂混合后免疫BALB/c小鼠。免疫3次后,小鼠血清的血凝抑制(HI)效价可达1∶2^(16),取免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合制备杂交瘤细胞,采用有限稀释法进行多轮亚克隆,经免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛选,成功获得杂交瘤细胞株5F7和11B3,能够稳定分泌中和性单克隆抗体。单克隆抗体5F7和11B3的轻链型均为Kappa,重链型分别为IgG2a和IgG2b。经ELISA和IPMA检测,单克隆抗体5F7和11B3均能与重组PPV VP2蛋白和PPV病毒粒子发生特异反应,而与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)无交叉反应。5F7和11B3腹水针对PPV病毒反应的ELSIA效价分别为1∶10 240和1∶20 480;针对PPV感染PK15细胞的中和效价分别为1∶2^(11)和1∶2^(10)。Western blot鉴定结果显示,单克隆抗体5F7和11B3均不与变性的VP2蛋白发生反应,说明2株单克隆抗体均识别重组PPV VP2蛋白的构象型表位。综上,成功制备了2株具有中和活性的抗PPV单克隆抗体。 展开更多
关键词 猪细小病毒 VP2蛋白 中和性单克隆抗体 免疫过氧化物酶单层细胞试验 杂交瘤细胞株
在线阅读 下载PDF
间接免疫荧光法筛选抗呼吸道合胞病毒单克隆抗体及其性质的初步鉴定
20
作者 张梅 何金生 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第11期1277-1277,共1页
目的利用活体骨髓瘤细胞与杂交瘤技术,采用间接免疫荧光分析法(IFA)筛选出更多可识别人呼吸道合胞病毒(RSV)的单克隆抗体,并对其体外性质进行鉴定,以期为RSV的被动免疫治疗以及临床诊断奠定基础。方法以RSV通过滴鼻途径免疫小鼠,同时采... 目的利用活体骨髓瘤细胞与杂交瘤技术,采用间接免疫荧光分析法(IFA)筛选出更多可识别人呼吸道合胞病毒(RSV)的单克隆抗体,并对其体外性质进行鉴定,以期为RSV的被动免疫治疗以及临床诊断奠定基础。方法以RSV通过滴鼻途径免疫小鼠,同时采用实体瘤技术体内制备骨髓瘤细胞。取免疫后小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合,利用IFA方法筛选经有限稀释法亚克隆获得的可稳定分泌抗RSV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。通过间接ELISA和Western blot等方法初步分析McAb对RSV蛋白的特异性结合能力,通过免疫酶法(IE)蚀斑减少中和实验和融合抑制实验分析McAb体外保护作用。结果获得4株稳定分泌抗RSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别为2A7、3E10、1F10及3G4,经间接ELISA以及Westernblot初步鉴定,获得的4株单克隆抗体可特异性识别RSV蛋白,McAbs 2A7和3E10可分别识别融合糖蛋白(F)蛋白二聚体和单体,McAbs 1F10和3G4可识别黏附糖蛋白(G)蛋白。其中McAbs 2A7与1F10可以在体外抑制RSV对HEp-2细胞的感染,具有中和活性,同时具有融合抑制活性。结论利用IFA法成功筛选了能特异性识别RSV的4种单克隆抗体,初步鉴定显示两种单抗可分别识别F蛋白二聚体和单体,另两种单抗可识别G蛋白。IE法蚀斑减少实验显示两种单抗在体外具有中和活性和融合抑制活性,表明获得的单抗对RSV感染具有一定的预防作用。 展开更多
关键词 人呼吸道合胞病毒 间接免疫荧光 活体骨髓瘤细胞 单克隆抗体 中和活性 融合抑制活性
在线阅读 下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 8 下一页 到第 页
关于我们 | 版权声明 | 联系我们 | 帮助中心| 意见反馈
主办单位：上海市教育委员会
技术支持：重庆维普资讯有限公司
渝公网安备 50019002500403号
使用帮助 返回顶部