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微载体规模化培养草鱼鳔细胞以增殖Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒的工艺研究
被引量：
2
1
作者
杨玉茹
王英英
+3 位作者
王庆
周文礼
尹纪元
石存斌
《海洋渔业》
CSCD
北大核心
2022年第5期577-588,共12页
为优化草鱼(Ctenopharyngodon idella)鳔细胞(CiSB)细胞悬浮培养工艺,以提高基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)含量,利用Cytodex 1微载体悬浮培养系统规模化培养CiSB和Ⅱ型GCRV,对CiSB细胞初始接种密度、搅拌转速和微...
为优化草鱼(Ctenopharyngodon idella)鳔细胞(CiSB)细胞悬浮培养工艺,以提高基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)含量,利用Cytodex 1微载体悬浮培养系统规模化培养CiSB和Ⅱ型GCRV,对CiSB细胞初始接种密度、搅拌转速和微载体浓度等工艺参数进行摸索和优化。结果显示,在CiSB细胞贴壁期,以转速30 r·min^(-1)、每静置30 min搅拌2 min的间歇搅拌方式培养最佳,4 h后细胞贴附率可达96%以上;在微载体密度2 g·L^(-1)、细胞初始接种密度2×10^(5)个·mL^(-1)、搅拌速度30 r·min^(-1)的条件下,初始培养血清浓度设定为10%,培养3 d后更换50%的培养基并使血清浓度达到5%,可获得最佳的细胞生长效能。CiSB经消化转移放大至1 L,微载体上细胞贴附均匀、生长良好。接种Ⅱ型GCRV至规模化培养的CiSB细胞,拷贝数最高达6.2×10^(5)拷贝数·μL^(-1)。研究结果可为草鱼出血病疫苗的规模化生产工艺研究提供依据。
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关键词
草
鱼鳔
细胞
(
cisb
)
Ⅱ型
草
鱼呼肠孤病毒
微载体培养
工艺优化
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职称材料
题名
微载体规模化培养草鱼鳔细胞以增殖Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒的工艺研究
被引量：
2
1
作者
杨玉茹
王英英
王庆
周文礼
尹纪元
石存斌
机构
天津农学院水产学院
中国水产科学研究院珠江水产研究所
出处
《海洋渔业》
CSCD
北大核心
2022年第5期577-588,共12页
基金
国家重点研发计划(2019YFD0900103)
中国水产科学研究院中央公益性科研院所基本科研业务费专项(2020XT0403)
+2 种基金
广东省基础与应用基础研究基金(2020A1515010327)
国家大宗淡水鱼产业技术体系(CARS-45)
广东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金(2022KJ150,2022KJ119)。
文摘
为优化草鱼(Ctenopharyngodon idella)鳔细胞(CiSB)细胞悬浮培养工艺,以提高基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)含量,利用Cytodex 1微载体悬浮培养系统规模化培养CiSB和Ⅱ型GCRV,对CiSB细胞初始接种密度、搅拌转速和微载体浓度等工艺参数进行摸索和优化。结果显示,在CiSB细胞贴壁期,以转速30 r·min^(-1)、每静置30 min搅拌2 min的间歇搅拌方式培养最佳,4 h后细胞贴附率可达96%以上;在微载体密度2 g·L^(-1)、细胞初始接种密度2×10^(5)个·mL^(-1)、搅拌速度30 r·min^(-1)的条件下,初始培养血清浓度设定为10%,培养3 d后更换50%的培养基并使血清浓度达到5%,可获得最佳的细胞生长效能。CiSB经消化转移放大至1 L,微载体上细胞贴附均匀、生长良好。接种Ⅱ型GCRV至规模化培养的CiSB细胞,拷贝数最高达6.2×10^(5)拷贝数·μL^(-1)。研究结果可为草鱼出血病疫苗的规模化生产工艺研究提供依据。
关键词
草
鱼鳔
细胞
(
cisb
)
Ⅱ型
草
鱼呼肠孤病毒
微载体培养
工艺优化
Keywords
grass carp swim bladder cells(
cisb
)
genotype Ⅱ grass carp reovirus
microcarrier culture
technology optimization
分类号
S942.5 [农业科学—水产养殖]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
微载体规模化培养草鱼鳔细胞以增殖Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒的工艺研究
杨玉茹
王英英
王庆
周文礼
尹纪元
石存斌
《海洋渔业》
CSCD
北大核心
2022
2
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