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草鱼出血病病毒VP7蛋白基因的人工合成与原核表达被引量：3: 1; 作者韦先超杨泽晓 +4 位作者王印裴腊梅姚学萍汪开毓杨水仙《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期645-650,共6页; 根据GenBank已发表的GCRVVP7蛋白基因序列,设计合成2条特异性引物和19条搭桥引物,通过搭桥PCR人工合成带有3处变异碱基的GCRVVP7蛋白基因整个编码框,经过酶切、连接、PCR鉴定和测序鉴定克隆到原核表达载体pColdTF中,并转化大肠杆菌BL21(... 展开更多; 关键词草鱼出血病病毒 VP7 搭桥PCR 原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗草鱼出血病病毒转基因稀有鮈鲫的初步研究被引量：7: 2; 作者廖莎陈芸 +3 位作者杜富宽汪亚平廖兰杰朱作言《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期837-842,共6页; 研究采用草鱼H1基因启动子,以草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)外衣壳蛋白VP7基因为靶基因,以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,构建了3个小发卡RNA(shRNA)表达载体pH1siGCRV(x)-CMVeGFP。CIK细胞感染实验表明,pH1siGCRV2-C... 展开更多; 关键词 RNA干扰小发夹RNA 草鱼出血病病毒转基因鱼; 在线阅读下载PDF 职称材料

《草鱼出血病病毒敏感细胞系CIK的建立》技术鉴定会在沙市召开: 3; 作者李立银《淡水渔业》 1984年第5期35-35,共1页; 中国水产科学研究院长江水产研究所完成的《草鱼出血病病毒敏感细胞系CIK的建立》的科研成果,于1984年8月28—30日在湖北沙市进行了技术鉴定。这次会议是湖北省水产局受农牧渔业部水产局委托主持召开的。参加会议的有来自中国科学院武... 展开更多; 关键词草鱼出血病病毒细胞系沙市湖北 CIK; 在线阅读下载PDF 职称材料

“血停”对草鱼病毒性出血病的药效试验: 4; 作者周永兴石永伦 +1 位作者王建伟田树魁《科学养鱼》 2020年第11期53-54,共2页; 2019年4月,云南省水产技术推广站和开远市渔业管理站依托国家大宗淡水鱼产业技术体系昆明试验站平台,承担新药“血停”(复方茶多酚粉剂)在云南开展为期两个月的草鱼病毒性出血病的预防和治疗效用试验。“血停”为复合塑料袋包装,包装规... 展开更多; 关键词草鱼出血病病毒药效试验植物提取物产业技术体系塑料袋包装病毒性出血病包装规格开远市; 在线阅读下载PDF 职称材料

如何识别和防治草鱼出血病: 5; 作者张陆云《中国农村科技》 2000年第6期34-34,共1页; 草鱼出血病病毒是草鱼出血病的病原。草鱼青鱼和麦穗鱼对病毒最易感,以6～10厘米的当年鱼种最为普遍而严重,一周龄以上的草鱼也可发病。鳙、鲢、鲤、编等鱼对此病毒不敏感,均不会发病。; 关键词如何识别草鱼出血病病毒有效氯治草麦穗鱼当年鱼植物血凝素细胞疫苗漂粉精聚乙烯; 在线阅读下载PDF 职称材料

鱼类培养细胞抗病毒基因差减cDNA文库的构建被引量：28: 6; 作者张义兵石耀华桂建芳《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期113-118,共6页; 紫外线灭活的草鱼出血病病毒 (GCHV)能诱导鲫囊胚培养细胞 (CAB)产生高滴度的干扰素 ,从而诱导宿主细胞基因表达的改变并处于抗病毒状态。提取灭活病毒诱导未经病毒诱导的CAB细胞mRNA ,利用抑制性差减杂交技术 ,成功构建了鱼类培养细胞... 展开更多; 关键词鱼类草鱼出血病病毒抗病毒相关基因诱导抑制性差减杂交; 在线阅读下载PDF 职称材料

小发夹RNA在稀有鮈鲫胚胎中的表达被引量：1: 7; 作者杨琳汪亚平 +1 位作者廖兰杰朱作言《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1031-1036,共6页; 由小的干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)介导的RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来快速发展的一种转录后基因沉默方法,已被广泛的应用于基因功能的研究,基因网络调控的探讨以及疾病的治疗等方面。多数的siRNA表达载体依赖RNA... 展开更多; 关键词 RNA干扰小干扰RNA 小发夹RNA Stem-loopRT-PCR 草鱼出血病病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名草鱼出血病病毒VP7蛋白基因的人工合成与原核表达被引量：3: 1; 作者韦先超杨泽晓王印裴腊梅姚学萍汪开毓杨水仙; 机构四川农业大学动物医学院四川省水产学校动物疫病与人类健康四川省重点实验室; 出处《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期645-650,共6页; 基金教育部<长江学者和创新团队发展计划>创新团队项目 IRT0848号 +1 种基金四川农业大学双支计划 00270401号; 文摘根据GenBank已发表的GCRVVP7蛋白基因序列,设计合成2条特异性引物和19条搭桥引物,通过搭桥PCR人工合成带有3处变异碱基的GCRVVP7蛋白基因整个编码框,经过酶切、连接、PCR鉴定和测序鉴定克隆到原核表达载体pColdTF中,并转化大肠杆菌BL21(DE3),进行IPTG诱导表达和表达产物的SDS-PAGE、Western-blotting分析、纯化以及反应原性的iELISA检测。结果表明,成功人工合成了长831bp的GCRV VP7蛋白基因编码框和构建了VP7蛋白基因的重组质粒pCold TF-VP7,pColdTF-VP7转化菌经IPTG(1mmol/L)诱导3—4h即可获得特异性蛋白VP7重组蛋白的高效表达,VP7重组蛋白相对分子量大小约为73.9ku,与预期大小相符,且与鼠抗GCRV血清有良好反应原性。; 关键词草鱼出血病病毒 VP7 搭桥PCR 原核表达; Keywords Grass Carp Hemorrhage Virus VP7 Overlap extension PCR Prokaryotic expression; 分类号 S917 [农业科学—水产科学] Q753 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗草鱼出血病病毒转基因稀有鮈鲫的初步研究被引量：7: 2; 作者廖莎陈芸杜富宽汪亚平廖兰杰朱作言; 机构中国科学院水生生物研究所中国科学院研究生院; 出处《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期837-842,共6页; 基金国家863项目(2007AA10Z186)资助; 文摘研究采用草鱼H1基因启动子,以草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)外衣壳蛋白VP7基因为靶基因,以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,构建了3个小发卡RNA(shRNA)表达载体pH1siGCRV(x)-CMVeGFP。CIK细胞感染实验表明,pH1siGCRV2-CMVeGFP具有较高的病毒抑制作用。通过显微注射将pH1siGCRV2-CMVeGFP导入稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)受精卵,获得转基因稀有鮈鲫P0代群体。转基因稀有鮈鲫攻毒实验显示,转基因稀有鮈鲫死亡率为30%,抗草鱼出血病能力显著提高。进一步的实时荧光定量PCR检测证实,转基因稀有鮈鲫脾脏、后肠和肝脏中GCRV的含量显著低于对照鱼,并随着时间的延续逐渐减少,转基因稀有鮈鲫体内GCRV的复制受到有效抑制。研究为抗草鱼出血病转基因鱼育种奠定重要基础。; 关键词 RNA干扰小发夹RNA 草鱼出血病病毒转基因鱼; Keywords RNA interference small hairpin RNA（shRNA） grass carp reovirus（GCRV） transgenic fish; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名《草鱼出血病病毒敏感细胞系CIK的建立》技术鉴定会在沙市召开: 3; 作者李立银; 出处《淡水渔业》 1984年第5期35-35,共1页; 文摘中国水产科学研究院长江水产研究所完成的《草鱼出血病病毒敏感细胞系CIK的建立》的科研成果,于1984年8月28—30日在湖北沙市进行了技术鉴定。这次会议是湖北省水产局受农牧渔业部水产局委托主持召开的。参加会议的有来自中国科学院武汉病毒研究所、中国科学院水生生物研究所、武汉大学病毒系及湖北医学院等21个单位的代表共35人。代表们一致认为,草鱼肾脏组织细胞系CIK是继浙江淡水所的草鱼吻端组织二倍体细胞株ZC—7901之后又一新的草鱼细胞系,为国内首次建立。该细胞系生长稳定、繁殖旺盛、适应性强。; 关键词草鱼出血病病毒细胞系沙市湖北 CIK; 分类号 S [农业科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名“血停”对草鱼病毒性出血病的药效试验: 4; 作者周永兴石永伦王建伟田树魁; 机构开远市渔业管理站云南省水产技术推广站; 出处《科学养鱼》 2020年第11期53-54,共2页; 文摘 2019年4月,云南省水产技术推广站和开远市渔业管理站依托国家大宗淡水鱼产业技术体系昆明试验站平台,承担新药“血停”(复方茶多酚粉剂)在云南开展为期两个月的草鱼病毒性出血病的预防和治疗效用试验。“血停”为复合塑料袋包装,包装规格为200克/包,主要成分为天然绿茶植物提取物,能渗透入鱼体细胞,有效阻断草鱼出血病病毒入侵鱼体,具有抑制病毒复制的能力。现将试验情况报告如下。; 关键词草鱼出血病病毒药效试验植物提取物产业技术体系塑料袋包装病毒性出血病包装规格开远市; 分类号 S943 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名如何识别和防治草鱼出血病: 5; 作者张陆云; 机构云南农业大学; 出处《中国农村科技》 2000年第6期34-34,共1页; 文摘草鱼出血病病毒是草鱼出血病的病原。草鱼青鱼和麦穗鱼对病毒最易感,以6～10厘米的当年鱼种最为普遍而严重,一周龄以上的草鱼也可发病。鳙、鲢、鲤、编等鱼对此病毒不敏感,均不会发病。; 关键词如何识别草鱼出血病病毒有效氯治草麦穗鱼当年鱼植物血凝素细胞疫苗漂粉精聚乙烯; 分类号 S943 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鱼类培养细胞抗病毒基因差减cDNA文库的构建被引量：28: 6; 作者张义兵石耀华桂建芳; 机构中国科学院水生生物研究所; 出处《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期113-118,共6页; 基金国家自然科学基金 ( 30 2 0 0 2 0 7) 武汉青年科技晨光计划 ( 2 0 0 15 0 0 5 0 5 5 )资助; 文摘紫外线灭活的草鱼出血病病毒 (GCHV)能诱导鲫囊胚培养细胞 (CAB)产生高滴度的干扰素 ,从而诱导宿主细胞基因表达的改变并处于抗病毒状态。提取灭活病毒诱导未经病毒诱导的CAB细胞mRNA ,利用抑制性差减杂交技术 ,成功构建了鱼类培养细胞抗病毒基因差减cDNA文库。以鲫管家基因α tubulin和 β actin作为差减指标 ,检测差减cDNA文库的差减效率分别高达 2 15和 2 7倍 ,表明经过病毒诱导后的细胞中 ,某些差异表达基因的富集效率也接近 2 15倍。鱼类抗病毒基因差减cDNA文库的建立对快速分离、克隆鱼类抗病毒相关基因和认识鱼类细胞抗病毒免疫的分子机理有重要意义。; 关键词鱼类草鱼出血病病毒抗病毒相关基因诱导抑制性差减杂交; Keywords Fish Grass carp hemorrhage virus Antiviral related gene Induction SSH; 分类号 S941.41 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小发夹RNA在稀有鮈鲫胚胎中的表达被引量：1: 7; 作者杨琳汪亚平廖兰杰朱作言; 机构中国科学院水生生物研究所中国科学院研究生院; 出处《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1031-1036,共6页; 基金国家863项目(2007AA10Z186)资助; 文摘由小的干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)介导的RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来快速发展的一种转录后基因沉默方法,已被广泛的应用于基因功能的研究,基因网络调控的探讨以及疾病的治疗等方面。多数的siRNA表达载体依赖RNA聚合酶Ⅲ启动子中的一种,操纵一段短发夹结构RNA(Small hairpin RNA,shRNA)在细胞或体内表达。这一类启动子主要包括人源和鼠源的U6启动子和人H1启动子等。为了探明鱼类自身的RNA聚合酶Ⅲ启动子是否能有效驱动shRNA在鱼体内表达,从而更好地利用RNAi进行鱼类基因功能和抗病毒研究,研究利用斑马鱼的H1和U6启动子以及草鱼的H1启动子,以草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)外衣壳蛋白VP7基因为靶基因,以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,分别构建了三个shRNA表达载体:pZH1siGCRV-CMVeGFP、pZU6siGCRV-CMVeGFP和pCH1siGCRV-CMVeGFP。通过显微注射将三种表达载体分别导入稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)受精卵中。由于siRNA片段很短,其表达检测非常困难,研究采用stem-loop RT-PCR方法,对稀有鮈鲫胚胎发育不同时期的shRNA表达进行了检测。研究结果表明,采用的三种鱼类自身的RNA聚合酶Ⅲ启动子均能有效驱动GCRVsiRNA的表达;在取样的各个胚胎发育时期均能检测到GCRV siRNA的表达;stem-loop RT-PCR方法可以便捷检测siRNA的表达。研究构建的鱼类胚胎siRNA有效持续表达载体,建立的简易快捷siRNA检测方法,为进一步的抗GCRV转基因鱼研制以及siRNA的病毒复制干扰机制研究奠定了重要基础并提供有力的技术支撑。; 关键词 RNA干扰小干扰RNA 小发夹RNA Stem-loopRT-PCR 草鱼出血病病毒; Keywords RNA interference （RNAi） Small interfering RNA （siRNA） Small hairpin RNA （shRNA） Stem-loop RT-PCR Grass carp reovirus （GCRV）; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	草鱼出血病病毒VP7蛋白基因的人工合成与原核表达	韦先超杨泽晓王印裴腊梅姚学萍汪开毓杨水仙	《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	抗草鱼出血病病毒转基因稀有鮈鲫的初步研究	廖莎陈芸杜富宽汪亚平廖兰杰朱作言	《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	7	在线阅读下载PDF 职称材料
3	《草鱼出血病病毒敏感细胞系CIK的建立》技术鉴定会在沙市召开	李立银	《淡水渔业》	1984		在线阅读下载PDF 职称材料
4	“血停”对草鱼病毒性出血病的药效试验	周永兴石永伦王建伟田树魁	《科学养鱼》	2020	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	如何识别和防治草鱼出血病	张陆云	《中国农村科技》	2000	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	鱼类培养细胞抗病毒基因差减cDNA文库的构建	张义兵石耀华桂建芳	《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2003	28	在线阅读下载PDF 职称材料
7	小发夹RNA在稀有鮈鲫胚胎中的表达	杨琳汪亚平廖兰杰朱作言	《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料