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源于Halomonas sp.抗草甘膦EPSPS的克隆、鉴定及应用
1
作者
丁宁
何云浩
+2 位作者
吴琳绯
李婵娟
吴高兵
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第3期158-166,共9页
为培育高抗草甘膦作物以应对草甘膦杂草进化,从海洋细菌中筛选到1株高抗草甘膦的盐单胞菌属菌株(Halomonassp.),通过基因组测序及生物信息学分析,确定该菌株的EPSPS基因,在Escherichiacoli(DE3)中对fHoEPSPS、mfHoEPSPS(G384A位点突变)...
为培育高抗草甘膦作物以应对草甘膦杂草进化,从海洋细菌中筛选到1株高抗草甘膦的盐单胞菌属菌株(Halomonassp.),通过基因组测序及生物信息学分析,确定该菌株的EPSPS基因,在Escherichiacoli(DE3)中对fHoEPSPS、mfHoEPSPS(G384A位点突变)和mHoEPSPS(mfHoEPSPS N端缺失PDT)进行重组表达和纯化,并运用自切割肽LP4/2A介导的基因聚合策略,将抗草铵膦的酶(Repat)置于mHoEPSPS的N端,构建了双抗草甘/铵膦酶(RLH),将其编码基因导入烟草后赋予草甘/铵膦复合抗性。结果显示,该菌株的EPSPS基因(fHoEPSPS)可编码一个N段融合了预苯酸脱水酶(PDT)的双功能酶。草甘膦抗性分析显示mfHoEPSPS的抗性比fHoEPSPS提高了19倍,将mHoEPSPS基因导入烟草后可赋予烟草3倍推荐剂量的草甘膦耐受性,转RLH基因的烟草能够耐受3~5倍推荐剂量的草甘/铵膦复合除草剂。结果表明,源于Halomonas sp.的抗草甘膦EPSPS是一种新型草甘膦耐受酶,通过G384A的位点突变可提高酶活;利用自切割肽介导的基因堆叠策略获得的转RLH基因烟草表现出较高草甘/铵膦复合抗性。
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关键词
抗除
草
剂作物
抗
草
甘
膦
5-烯醇式莽
草
酸-3-磷酸合成
酶
草铵膦乙酰转移酶
双抗除
草
剂作物
基因聚合
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职称材料
题名
源于Halomonas sp.抗草甘膦EPSPS的克隆、鉴定及应用
1
作者
丁宁
何云浩
吴琳绯
李婵娟
吴高兵
机构
华中农业大学植物科学技术学院
武汉设计工程学院食品与生物科技学院
华中农业大学生命科学技术学院
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第3期158-166,共9页
基金
国家自然科学基金项目(31971383)
文摘
为培育高抗草甘膦作物以应对草甘膦杂草进化,从海洋细菌中筛选到1株高抗草甘膦的盐单胞菌属菌株(Halomonassp.),通过基因组测序及生物信息学分析,确定该菌株的EPSPS基因,在Escherichiacoli(DE3)中对fHoEPSPS、mfHoEPSPS(G384A位点突变)和mHoEPSPS(mfHoEPSPS N端缺失PDT)进行重组表达和纯化,并运用自切割肽LP4/2A介导的基因聚合策略,将抗草铵膦的酶(Repat)置于mHoEPSPS的N端,构建了双抗草甘/铵膦酶(RLH),将其编码基因导入烟草后赋予草甘/铵膦复合抗性。结果显示,该菌株的EPSPS基因(fHoEPSPS)可编码一个N段融合了预苯酸脱水酶(PDT)的双功能酶。草甘膦抗性分析显示mfHoEPSPS的抗性比fHoEPSPS提高了19倍,将mHoEPSPS基因导入烟草后可赋予烟草3倍推荐剂量的草甘膦耐受性,转RLH基因的烟草能够耐受3~5倍推荐剂量的草甘/铵膦复合除草剂。结果表明,源于Halomonas sp.的抗草甘膦EPSPS是一种新型草甘膦耐受酶,通过G384A的位点突变可提高酶活;利用自切割肽介导的基因堆叠策略获得的转RLH基因烟草表现出较高草甘/铵膦复合抗性。
关键词
抗除
草
剂作物
抗
草
甘
膦
5-烯醇式莽
草
酸-3-磷酸合成
酶
草铵膦乙酰转移酶
双抗除
草
剂作物
基因聚合
Keywords
herbicide-resistant crops
glyphosate-resistant 5-enolshikimate-3-phosphate synthase
glufosinate acetyltransferase
dual herbicide-resistant crops
gene pyramiding
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
源于Halomonas sp.抗草甘膦EPSPS的克隆、鉴定及应用
丁宁
何云浩
吴琳绯
李婵娟
吴高兵
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
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