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甘薯草甘膦抗性基因EPSPS克隆和序列分析
被引量：
4
1
作者
陈颖芳
周安琪
朱宏波
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期35-42,共8页
EPSPS基因编码5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶,该酶是芳香族氨基酸合成的关键酶,该基因在细菌、真菌、藻类和植物中被广泛克隆和研究。EPSPS酶是草甘膦除草剂的靶点酶,过量表达EPSPS基因可以提高作物的草甘膦抗性。该研究根据甘薯...
EPSPS基因编码5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶,该酶是芳香族氨基酸合成的关键酶,该基因在细菌、真菌、藻类和植物中被广泛克隆和研究。EPSPS酶是草甘膦除草剂的靶点酶,过量表达EPSPS基因可以提高作物的草甘膦抗性。该研究根据甘薯基因组数据库设计引物,以‘广薯87’为材料提取RNA,通过RT-PCR方法扩增甘薯IbEPSPS基因,测序后进行生物信息学分析和表达分析。结果表明:(1)成功克隆获得甘薯IbEPSPS基因,该基因全长CDS为1569 bp,编码522个氨基酸,其中在第98~113、173~183位氨基酸序列具有2个EPSPS的保守结构域。(2)系统进化树分析结果表明,甘薯IbEPSPS基因与三裂叶薯(Ipomoea triloba)、打碗花(Calystegia hederacea)、田旋花(Convolvulus arvensis)和牵牛(Ipomoea nil)聚在一类,其中与三裂叶薯的亲缘关系最近。(3)实时荧光定量PCR分析结果表明,甘薯IbEPSPS基因在茎、叶和茎尖表达量较高,同时受到草甘膦胁迫后IbEPSPS基因表达量提高。该研究结果为进一步探讨甘薯IbEPSPS基因的功能及甘薯对草甘膦的耐药性机制奠定了基础。
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关键词
甘
薯
草甘膦抗性基因
基因
克隆
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职称材料
草甘膦为筛选标记的水稻高效遗传转化体系的建立
被引量：
2
2
作者
袁冰
丁筠
+2 位作者
曹含章
吕尊富
李飞飞
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期559-565,共7页
【目的】建立以日本晴愈伤组织为受体、草甘膦抗性基因CP4为选择标记基因的高效水稻遗传转化体系。【方法】以粳稻日本晴的成熟胚为试验材料,通过农杆菌介导法,将含有草甘膦抗性基因CP4的P1300载体转化日本晴的愈伤组织,分别用质量浓度...
【目的】建立以日本晴愈伤组织为受体、草甘膦抗性基因CP4为选择标记基因的高效水稻遗传转化体系。【方法】以粳稻日本晴的成熟胚为试验材料,通过农杆菌介导法,将含有草甘膦抗性基因CP4的P1300载体转化日本晴的愈伤组织,分别用质量浓度为10、20和40 mg/L的草甘膦进行3轮抗性筛选,诱导分化和再生成苗;利用1000 mg/L草甘膦对移栽成活的阳性苗进行抗性鉴定。【结果】获得145株转基因幼苗,PCR检测阳性株为128株,阳性率达88.27%;经过3轮抗性筛选后,转基因幼苗的阳性率提高;移栽成活的99株阳性苗中,65株表现为抗性,抗性率为65.66%。【结论】成功建立了以草甘膦为筛选标记的水稻转基因体系,该体系为水稻育种提供了材料,并对以抗草甘膦基因作为筛选标记的水稻转基因和一些基因功能验证提供了技术支持。
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关键词
日本晴愈伤组织
草甘膦抗性基因
CP4
农杆菌介导法
高效遗传转化体系
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职称材料
题名
甘薯草甘膦抗性基因EPSPS克隆和序列分析
被引量：
4
1
作者
陈颖芳
周安琪
朱宏波
机构
广东海洋大学农学院
出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期35-42,共8页
基金
NSFC-广东联合基金(U1701234)。
文摘
EPSPS基因编码5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶,该酶是芳香族氨基酸合成的关键酶,该基因在细菌、真菌、藻类和植物中被广泛克隆和研究。EPSPS酶是草甘膦除草剂的靶点酶,过量表达EPSPS基因可以提高作物的草甘膦抗性。该研究根据甘薯基因组数据库设计引物,以‘广薯87’为材料提取RNA,通过RT-PCR方法扩增甘薯IbEPSPS基因,测序后进行生物信息学分析和表达分析。结果表明:(1)成功克隆获得甘薯IbEPSPS基因,该基因全长CDS为1569 bp,编码522个氨基酸,其中在第98~113、173~183位氨基酸序列具有2个EPSPS的保守结构域。(2)系统进化树分析结果表明,甘薯IbEPSPS基因与三裂叶薯(Ipomoea triloba)、打碗花(Calystegia hederacea)、田旋花(Convolvulus arvensis)和牵牛(Ipomoea nil)聚在一类,其中与三裂叶薯的亲缘关系最近。(3)实时荧光定量PCR分析结果表明,甘薯IbEPSPS基因在茎、叶和茎尖表达量较高,同时受到草甘膦胁迫后IbEPSPS基因表达量提高。该研究结果为进一步探讨甘薯IbEPSPS基因的功能及甘薯对草甘膦的耐药性机制奠定了基础。
关键词
甘
薯
草甘膦抗性基因
基因
克隆
Keywords
sweet potato
glyphosate resistance gene
gene cloning
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
草甘膦为筛选标记的水稻高效遗传转化体系的建立
被引量：
2
2
作者
袁冰
丁筠
曹含章
吕尊富
李飞飞
机构
浙江农林大学农业与食品科学学院
出处
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期559-565,共7页
基金
国家自然科学基金青年基金项目(31401461)
2019年浙江农林大学学生科研训练项目(113-2013200134)
2018年浙江农林大学学生科研训练项目(KX20180017)。
文摘
【目的】建立以日本晴愈伤组织为受体、草甘膦抗性基因CP4为选择标记基因的高效水稻遗传转化体系。【方法】以粳稻日本晴的成熟胚为试验材料,通过农杆菌介导法,将含有草甘膦抗性基因CP4的P1300载体转化日本晴的愈伤组织,分别用质量浓度为10、20和40 mg/L的草甘膦进行3轮抗性筛选,诱导分化和再生成苗;利用1000 mg/L草甘膦对移栽成活的阳性苗进行抗性鉴定。【结果】获得145株转基因幼苗,PCR检测阳性株为128株,阳性率达88.27%;经过3轮抗性筛选后,转基因幼苗的阳性率提高;移栽成活的99株阳性苗中,65株表现为抗性,抗性率为65.66%。【结论】成功建立了以草甘膦为筛选标记的水稻转基因体系,该体系为水稻育种提供了材料,并对以抗草甘膦基因作为筛选标记的水稻转基因和一些基因功能验证提供了技术支持。
关键词
日本晴愈伤组织
草甘膦抗性基因
CP4
农杆菌介导法
高效遗传转化体系
Keywords
callus of Nipponbare
glyphosate resistance gene CP4
Agrobacterium-mediated trans-formation
efficient genetic transformation system
分类号
S511 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甘薯草甘膦抗性基因EPSPS克隆和序列分析
陈颖芳
周安琪
朱宏波
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
草甘膦为筛选标记的水稻高效遗传转化体系的建立
袁冰
丁筠
曹含章
吕尊富
李飞飞
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
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职称材料
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