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GFP标记溶磷草木樨中华根瘤菌CHW10B及其定殖
被引量：
16
1
作者
任嘉红
刘辉
+3 位作者
姜楠
魏玉宏
张冰
王莹
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期74-79,I0001,共7页
【目的】为有效利用草木樨中华根瘤菌CHW10B菌株,对绿色荧光蛋白（GFP）标记的菌株在南方红豆杉根际及其根部的定殖进行研究。【方法】采用修改的反复冻融转化方法,将穿梭载体p GFP4412质粒转化进入草木樨中华根瘤菌CHW10B细胞,对该菌...
【目的】为有效利用草木樨中华根瘤菌CHW10B菌株,对绿色荧光蛋白（GFP）标记的菌株在南方红豆杉根际及其根部的定殖进行研究。【方法】采用修改的反复冻融转化方法,将穿梭载体p GFP4412质粒转化进入草木樨中华根瘤菌CHW10B细胞,对该菌株进行GFP标记,筛选荧光表达强烈且稳定遗传的转化子,对转化子的细胞及菌落形态特征进行观察,并采用钼锑抗比色法对其溶磷能力进行测定。在此基础上,以GFP基因标记和抗性标记作为示踪手段,将GFP标记的CHW10B菌株接种到南方红豆杉1年生盆栽实生苗根表面,借助荧光显微镜及稀释涂布技术,对根际土壤中GFP标记菌株进行定期回收检测。【结果】成功获得CHW10B菌株荧光表达强烈且稳定遗传的GFP转化子,该转化子及野生菌株均为革兰氏阴性（G-）,短杆菌,但二者在LB固体平板上的菌落形态有一定差别。野生菌株菌落呈圆形、边缘整齐,表面湿润黏稠,为乳白色;而标记菌株CHW10B-GFP2菌落表面为浅棕色,其他一致;标记菌株溶磷能力与野生菌株接近,发酵液上清液中可溶性磷含量分别为639.12和656.57 mg·L-1。GFP标记菌株在南方红豆杉根际的数量变化幅度较大,接种1天根际土壤中CHW10B转化子菌数为6.08×107cfu·g-1,随后细菌数量迅速减少,15天后标记细菌数量开始增多,25~40天菌体数量升高并呈平稳趋势。用荧光显微镜对接种40天后南方红豆杉的根部进行观察,发现在根系表面及其内部有大量发绿色荧光的GFP标记细胞存在。【结论】GFP基因标记的CHW10B菌株在南方红豆杉幼苗根际土壤中具有持久性定殖的能力;另外,该标记菌株能在根表面和内部定殖,具有内生性。
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关键词
南方红豆杉
草木樨中华根瘤菌
定殖
绿色荧光蛋白基因
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职称材料
草木樨中华根瘤菌CHW10B溶磷特性及其对南方红豆杉的促生作用
被引量：
6
2
作者
李云玲
侯沁文
+2 位作者
刘瑞祥
任嘉红
张易
《林业科学研究》
CSCD
北大核心
2017年第5期751-758,共8页
[目的]探讨南方红豆杉根际微生物草木樨中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)CHW10B的溶磷特性及促生作用。[方法]利用液体发酵试验比较不同时间、碳源、氮源、碳氮比、培养温度等条件下CHW10B菌株的溶磷量,采用温室盆栽法研究该菌株对...
[目的]探讨南方红豆杉根际微生物草木樨中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)CHW10B的溶磷特性及促生作用。[方法]利用液体发酵试验比较不同时间、碳源、氮源、碳氮比、培养温度等条件下CHW10B菌株的溶磷量,采用温室盆栽法研究该菌株对南方红豆杉生长的影响,并分析该菌株产嗜铁素、精氨酸脱羧酶、ACC脱氨酶及有机酸等成分的能力。[结果]该菌株分别在培养时间4 d、磷酸钙5.00 g·L^(-1)、初始p H值7.0、装液量1/2、NaCl为0.0 g·L^(-1)、温度30℃、碳源为葡萄糖、氮源为硫酸铵、碳氮比100∶1时溶磷能力最强。将该菌株接种于1年生南方红豆杉实生苗360 d后,苗木的地径、苗高、生物量比对照分别增长了19.53%、20.14%、25.39%。该菌株能够产嗜铁素、精氨酸脱羧酶、ACC脱氨酶(0.922 U·mg^(-1))和IAA(8.908 mg·m L^(-1)),并可分泌大量有机酸—葡萄糖酸(5 704.92μg·L^(-1))。[结论]草木樨中华根瘤菌CHW10B溶磷能力强,对南方红豆杉促生作用显著,适用于多种不同酸碱性土壤,可高效应用于南方红豆杉的人工栽培,具有被开发为生物肥料的潜力。
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关键词
草木樨中华根瘤菌
南方红豆杉
溶磷
促生作用
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职称材料
高效解钾菌的分离筛选鉴定及其对山区黄瓜的促生效果
被引量：
12
3
作者
宋聪
宋水山
贾振华
《江苏农业科学》
2020年第17期266-270,共5页
我国耕地土壤钾元素严重匮乏,亟须解决我国北方山区土壤缺钾的现状,寻求钾肥替代技术。从各地土壤中筛选得到1株高效解钾菌32-2,在含钾矿石的复筛培养基中发酵15 d,发酵液中可溶性钾含量达到37.77 mg/L,是对照的16.22倍,经鉴定为草木樨...
我国耕地土壤钾元素严重匮乏,亟须解决我国北方山区土壤缺钾的现状,寻求钾肥替代技术。从各地土壤中筛选得到1株高效解钾菌32-2,在含钾矿石的复筛培养基中发酵15 d,发酵液中可溶性钾含量达到37.77 mg/L,是对照的16.22倍,经鉴定为草木樨中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)。通过盆栽试验结果表明,与对照相比,32-2对黄瓜种子、幼苗有显著的促生效果,其中发芽率提高13.33百分点,发芽势提高8.08百分点,株高、地下鲜质量、地上干质量、壮苗指数、干重根冠比、根系活力分别提高15.83%、13.95%、7.45%、5.19%、9.46%、38.52%;同时,可显著提高黄瓜产量和品质,黄瓜产量增加8.50%,可溶性固形物、可溶性糖、维生素C、可溶性蛋白含量分别提高6.82%、2.78%、43.21%、20.90%。今后32-2可用于微生物肥料的开发。
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关键词
土壤解钾菌
筛选
鉴定
草木樨中华根瘤菌
黄瓜
促生效果
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职称材料
题名
GFP标记溶磷草木樨中华根瘤菌CHW10B及其定殖
被引量：
16
1
作者
任嘉红
刘辉
姜楠
魏玉宏
张冰
王莹
机构
长治学院生物科学与技术系
安徽师范大学环境科学与工程学院
出处
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期74-79,I0001,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31100471)
山西省高校重点学科建设专项资金项目(20111051
+1 种基金
20131008)
山西省大学生创新项目(2013365)
文摘
【目的】为有效利用草木樨中华根瘤菌CHW10B菌株,对绿色荧光蛋白（GFP）标记的菌株在南方红豆杉根际及其根部的定殖进行研究。【方法】采用修改的反复冻融转化方法,将穿梭载体p GFP4412质粒转化进入草木樨中华根瘤菌CHW10B细胞,对该菌株进行GFP标记,筛选荧光表达强烈且稳定遗传的转化子,对转化子的细胞及菌落形态特征进行观察,并采用钼锑抗比色法对其溶磷能力进行测定。在此基础上,以GFP基因标记和抗性标记作为示踪手段,将GFP标记的CHW10B菌株接种到南方红豆杉1年生盆栽实生苗根表面,借助荧光显微镜及稀释涂布技术,对根际土壤中GFP标记菌株进行定期回收检测。【结果】成功获得CHW10B菌株荧光表达强烈且稳定遗传的GFP转化子,该转化子及野生菌株均为革兰氏阴性（G-）,短杆菌,但二者在LB固体平板上的菌落形态有一定差别。野生菌株菌落呈圆形、边缘整齐,表面湿润黏稠,为乳白色;而标记菌株CHW10B-GFP2菌落表面为浅棕色,其他一致;标记菌株溶磷能力与野生菌株接近,发酵液上清液中可溶性磷含量分别为639.12和656.57 mg·L-1。GFP标记菌株在南方红豆杉根际的数量变化幅度较大,接种1天根际土壤中CHW10B转化子菌数为6.08×107cfu·g-1,随后细菌数量迅速减少,15天后标记细菌数量开始增多,25~40天菌体数量升高并呈平稳趋势。用荧光显微镜对接种40天后南方红豆杉的根部进行观察,发现在根系表面及其内部有大量发绿色荧光的GFP标记细胞存在。【结论】GFP基因标记的CHW10B菌株在南方红豆杉幼苗根际土壤中具有持久性定殖的能力;另外,该标记菌株能在根表面和内部定殖,具有内生性。
关键词
南方红豆杉
草木樨中华根瘤菌
定殖
绿色荧光蛋白基因
Keywords
Taxus chinensis var.mairei
Sinorhizobium meliloti
colonization
GFP
分类号
Q939.99 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
草木樨中华根瘤菌CHW10B溶磷特性及其对南方红豆杉的促生作用
被引量：
6
2
作者
李云玲
侯沁文
刘瑞祥
任嘉红
张易
机构
长治学院生物科学与技术系
太行山生态与环境研究所
出处
《林业科学研究》
CSCD
北大核心
2017年第5期751-758,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31100471)
山西省重点学科建设经费资助
文摘
[目的]探讨南方红豆杉根际微生物草木樨中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)CHW10B的溶磷特性及促生作用。[方法]利用液体发酵试验比较不同时间、碳源、氮源、碳氮比、培养温度等条件下CHW10B菌株的溶磷量,采用温室盆栽法研究该菌株对南方红豆杉生长的影响,并分析该菌株产嗜铁素、精氨酸脱羧酶、ACC脱氨酶及有机酸等成分的能力。[结果]该菌株分别在培养时间4 d、磷酸钙5.00 g·L^(-1)、初始p H值7.0、装液量1/2、NaCl为0.0 g·L^(-1)、温度30℃、碳源为葡萄糖、氮源为硫酸铵、碳氮比100∶1时溶磷能力最强。将该菌株接种于1年生南方红豆杉实生苗360 d后,苗木的地径、苗高、生物量比对照分别增长了19.53%、20.14%、25.39%。该菌株能够产嗜铁素、精氨酸脱羧酶、ACC脱氨酶(0.922 U·mg^(-1))和IAA(8.908 mg·m L^(-1)),并可分泌大量有机酸—葡萄糖酸(5 704.92μg·L^(-1))。[结论]草木樨中华根瘤菌CHW10B溶磷能力强,对南方红豆杉促生作用显著,适用于多种不同酸碱性土壤,可高效应用于南方红豆杉的人工栽培,具有被开发为生物肥料的潜力。
关键词
草木樨中华根瘤菌
南方红豆杉
溶磷
促生作用
Keywords
Sinorhizobium meliloti
Taxus chinensis var. mairei
phosphate-solubilization
growth-promoting effect
分类号
S718.8 [农业科学—林学]
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职称材料
题名
高效解钾菌的分离筛选鉴定及其对山区黄瓜的促生效果
被引量：
12
3
作者
宋聪
宋水山
贾振华
机构
河北省科学院生物研究所/河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心
出处
《江苏农业科学》
2020年第17期266-270,共5页
基金
河北省科技计划(编号:16227505D)
河北省科学院科技计划(编号:17311)。
文摘
我国耕地土壤钾元素严重匮乏,亟须解决我国北方山区土壤缺钾的现状,寻求钾肥替代技术。从各地土壤中筛选得到1株高效解钾菌32-2,在含钾矿石的复筛培养基中发酵15 d,发酵液中可溶性钾含量达到37.77 mg/L,是对照的16.22倍,经鉴定为草木樨中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)。通过盆栽试验结果表明,与对照相比,32-2对黄瓜种子、幼苗有显著的促生效果,其中发芽率提高13.33百分点,发芽势提高8.08百分点,株高、地下鲜质量、地上干质量、壮苗指数、干重根冠比、根系活力分别提高15.83%、13.95%、7.45%、5.19%、9.46%、38.52%;同时,可显著提高黄瓜产量和品质,黄瓜产量增加8.50%,可溶性固形物、可溶性糖、维生素C、可溶性蛋白含量分别提高6.82%、2.78%、43.21%、20.90%。今后32-2可用于微生物肥料的开发。
关键词
土壤解钾菌
筛选
鉴定
草木樨中华根瘤菌
黄瓜
促生效果
分类号
S182 [农业科学—农业基础科学]
S642.206 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
GFP标记溶磷草木樨中华根瘤菌CHW10B及其定殖
任嘉红
刘辉
姜楠
魏玉宏
张冰
王莹
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015
16
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
草木樨中华根瘤菌CHW10B溶磷特性及其对南方红豆杉的促生作用
李云玲
侯沁文
刘瑞祥
任嘉红
张易
《林业科学研究》
CSCD
北大核心
2017
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
高效解钾菌的分离筛选鉴定及其对山区黄瓜的促生效果
宋聪
宋水山
贾振华
《江苏农业科学》
2020
12
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职称材料
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