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油菜茎基溃疡病菌LAMP-HNB检测方法的建立
被引量:
4
1
作者
龙阳
马新华
+4 位作者
袁俊杰
卢乃会
杨卓瑜
魏霜
王卫芳
《广东农业科学》
CAS
2017年第10期66-69,175,共5页
油菜茎基溃疡病菌是油菜上最严重的真菌病害之一,是我国重要的检疫性有害生物。因此为防范其危害我国油菜产业生产安全,建立油菜茎基溃疡病菌的快速筛查方法具有重要意义。基于环介导等温扩增法(LAMP),以ITS(内转录间隔区)为靶序列并结...
油菜茎基溃疡病菌是油菜上最严重的真菌病害之一,是我国重要的检疫性有害生物。因此为防范其危害我国油菜产业生产安全,建立油菜茎基溃疡病菌的快速筛查方法具有重要意义。基于环介导等温扩增法(LAMP),以ITS(内转录间隔区)为靶序列并结合指示剂羟基萘酚蓝(HNB)建立了一种基于颜色判定的简单、快速和灵敏的油菜茎基溃疡病菌的快速检测方法,并对其特异性、灵敏性进行评价以及实际样品进行检测。结果显示,该方法在62℃等温条件下仅需80 min即可通过肉眼直接目测试验结果。LAMP-HNB法与标准PCR检测方法对比显示其具有良好的特异性以及更高的灵敏度,利用该方法对10批油菜籽样品进行检测,共检出5批阳性样品,与标准中PCR检测方法结果一致。该方法的建立为油菜茎基溃疡病菌的检疫鉴定提供了新途径。
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关键词
油菜
茎基溃疡病菌
环介导等温扩增
羟
基
萘酚蓝
检疫
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职称材料
进境澳大利亚大麦夹杂油菜茎基溃疡病菌的检疫鉴定
被引量:
1
2
作者
张慧丽
李雪莲
+2 位作者
陈先锋
吕燕
段维军
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期52-58,共7页
采用常规平板分离法,从进境澳大利亚大麦中夹杂的油菜籽上获得1株疑似油菜茎基溃疡病菌的菌株01829。通过致病性测定、形态学观察、特异性引物扩增、ITS序列比对分析,对01829进行了种类鉴定。结果表明:菌株01829在PDA培养基上生长较慢,...
采用常规平板分离法,从进境澳大利亚大麦中夹杂的油菜籽上获得1株疑似油菜茎基溃疡病菌的菌株01829。通过致病性测定、形态学观察、特异性引物扩增、ITS序列比对分析,对01829进行了种类鉴定。结果表明:菌株01829在PDA培养基上生长较慢,菌落边缘不整齐,产生大量分生孢子器和分生孢子;采用特异性引物对LMR1-D和Lmb分别进行PCR检测,结果均有预期扩增片段产生;基于ITS序列构建的系统发育树中,菌株01829和GenBank中其他油菜茎基溃疡病菌相关序列聚在同一分支;菌株01829接种油菜子叶和茎基部,在子叶和茎基部接种部位分别引起叶斑和凹陷溃疡斑。根据上述试验结果,将菌株01829鉴定为油菜茎基溃疡病菌,这是我国口岸首次从进境澳大利亚大麦中截获油菜茎基溃疡病菌。
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关键词
油菜
茎基溃疡病菌
形态特征
系统发育分析
致病性测定
鉴定
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职称材料
重组酶介导的油菜茎基溃疡病菌荧光核酸扩增检测体系的建立
3
作者
陈吴健
张巧琦
+5 位作者
魏晓洁
朱青青
郭利川
应清界
梅高甫
曹栋栋
《浙江农业科学》
2023年第1期79-82,共4页
本文通过重组酶介导的核酸扩增技术(recombinase aided amplification,RAA)建立一种快速检测油菜茎基溃疡病菌的方法。根据油菜茎基溃疡病菌的特异基因LMR1-D保守序列设计引物和探针,分析建立的RAA方法的灵敏度和特异性。该方法在39℃下...
本文通过重组酶介导的核酸扩增技术(recombinase aided amplification,RAA)建立一种快速检测油菜茎基溃疡病菌的方法。根据油菜茎基溃疡病菌的特异基因LMR1-D保守序列设计引物和探针,分析建立的RAA方法的灵敏度和特异性。该方法在39℃下,反应时间段(<20 min),检测下限可达10拷贝·mL^(-1),与油菜黑胫病菌等近似种无交叉反应,具有良好的特异性。本研究建立的RAA方法反应速度快、特异性强、灵敏度高,适用于油菜茎基溃疡病菌的快速检测。
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关键词
核酸扩增技术
油菜
茎基溃疡病菌
重组酶介导扩增
种传病害
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职称材料
题名
油菜茎基溃疡病菌LAMP-HNB检测方法的建立
被引量:
4
1
作者
龙阳
马新华
袁俊杰
卢乃会
杨卓瑜
魏霜
王卫芳
机构
湛江出入境检验检疫局
广东出入境检验检疫局
出处
《广东农业科学》
CAS
2017年第10期66-69,175,共5页
基金
广东出入境检验检疫局科技计划项目(2016GDK32)
文摘
油菜茎基溃疡病菌是油菜上最严重的真菌病害之一,是我国重要的检疫性有害生物。因此为防范其危害我国油菜产业生产安全,建立油菜茎基溃疡病菌的快速筛查方法具有重要意义。基于环介导等温扩增法(LAMP),以ITS(内转录间隔区)为靶序列并结合指示剂羟基萘酚蓝(HNB)建立了一种基于颜色判定的简单、快速和灵敏的油菜茎基溃疡病菌的快速检测方法,并对其特异性、灵敏性进行评价以及实际样品进行检测。结果显示,该方法在62℃等温条件下仅需80 min即可通过肉眼直接目测试验结果。LAMP-HNB法与标准PCR检测方法对比显示其具有良好的特异性以及更高的灵敏度,利用该方法对10批油菜籽样品进行检测,共检出5批阳性样品,与标准中PCR检测方法结果一致。该方法的建立为油菜茎基溃疡病菌的检疫鉴定提供了新途径。
关键词
油菜
茎基溃疡病菌
环介导等温扩增
羟
基
萘酚蓝
检疫
Keywords
rape
Leptosphaeria maculans
LAMP
HNB
quarantine
分类号
S41-30 [农业科学—植物保护]
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职称材料
题名
进境澳大利亚大麦夹杂油菜茎基溃疡病菌的检疫鉴定
被引量:
1
2
作者
张慧丽
李雪莲
陈先锋
吕燕
段维军
机构
宁波检验检疫科学技术研究院
宁波海关
出处
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期52-58,共7页
基金
国家重点研发计划(2016YFF0203201)
浙江省公益技术研究项目(LGF20C140001)
+1 种基金
海关总署科研项目(2020HK162)
中国检验检疫科学研究院基本科研业务费(2020JK048)。
文摘
采用常规平板分离法,从进境澳大利亚大麦中夹杂的油菜籽上获得1株疑似油菜茎基溃疡病菌的菌株01829。通过致病性测定、形态学观察、特异性引物扩增、ITS序列比对分析,对01829进行了种类鉴定。结果表明:菌株01829在PDA培养基上生长较慢,菌落边缘不整齐,产生大量分生孢子器和分生孢子;采用特异性引物对LMR1-D和Lmb分别进行PCR检测,结果均有预期扩增片段产生;基于ITS序列构建的系统发育树中,菌株01829和GenBank中其他油菜茎基溃疡病菌相关序列聚在同一分支;菌株01829接种油菜子叶和茎基部,在子叶和茎基部接种部位分别引起叶斑和凹陷溃疡斑。根据上述试验结果,将菌株01829鉴定为油菜茎基溃疡病菌,这是我国口岸首次从进境澳大利亚大麦中截获油菜茎基溃疡病菌。
关键词
油菜
茎基溃疡病菌
形态特征
系统发育分析
致病性测定
鉴定
Keywords
Leptosphaeria maculans
morphological characteristics
phylogenetic analysis
pathogenicity test
identification
分类号
S41-32 [农业科学—植物保护]
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职称材料
题名
重组酶介导的油菜茎基溃疡病菌荧光核酸扩增检测体系的建立
3
作者
陈吴健
张巧琦
魏晓洁
朱青青
郭利川
应清界
梅高甫
曹栋栋
机构
杭州海关技术中心
江苏奇天基因生物科技有限公司
浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所浙江省数字旱粮重点实验室
出处
《浙江农业科学》
2023年第1期79-82,共4页
文摘
本文通过重组酶介导的核酸扩增技术(recombinase aided amplification,RAA)建立一种快速检测油菜茎基溃疡病菌的方法。根据油菜茎基溃疡病菌的特异基因LMR1-D保守序列设计引物和探针,分析建立的RAA方法的灵敏度和特异性。该方法在39℃下,反应时间段(<20 min),检测下限可达10拷贝·mL^(-1),与油菜黑胫病菌等近似种无交叉反应,具有良好的特异性。本研究建立的RAA方法反应速度快、特异性强、灵敏度高,适用于油菜茎基溃疡病菌的快速检测。
关键词
核酸扩增技术
油菜
茎基溃疡病菌
重组酶介导扩增
种传病害
分类号
S432.44 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
油菜茎基溃疡病菌LAMP-HNB检测方法的建立
龙阳
马新华
袁俊杰
卢乃会
杨卓瑜
魏霜
王卫芳
《广东农业科学》
CAS
2017
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
进境澳大利亚大麦夹杂油菜茎基溃疡病菌的检疫鉴定
张慧丽
李雪莲
陈先锋
吕燕
段维军
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
重组酶介导的油菜茎基溃疡病菌荧光核酸扩增检测体系的建立
陈吴健
张巧琦
魏晓洁
朱青青
郭利川
应清界
梅高甫
曹栋栋
《浙江农业科学》
2023
0
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职称材料
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