烟草疫霉与茄科劳尔氏菌共存时烟草疫霉的生物学特性

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作者 王清 汤梅 +3 位作者 蔡刘体 周凤 汪汉成 章松柏 《植物医学》 2025年第2期36-44,共9页

烟草青枯病与烟草黑胫病为制约烟草生产的两种主要根茎类病害,本文旨在探究两病原菌共存时烟草疫霉的生物学特性及其病际微生物碳源代谢特征。通过“十字交叉”法、孢子计数法测定病原菌共存时烟草疫霉菌丝生长速率、孢子囊数量、游动... 烟草青枯病与烟草黑胫病为制约烟草生产的两种主要根茎类病害,本文旨在探究两病原菌共存时烟草疫霉的生物学特性及其病际微生物碳源代谢特征。通过“十字交叉”法、孢子计数法测定病原菌共存时烟草疫霉菌丝生长速率、孢子囊数量、游动孢子的形成与释放情况以及病原菌的致病性,测定病际微生物的碳源代谢功能,分析烟草疫霉的生物学特性。结果表明:(1)与茄科劳尔氏菌共培养时,烟草疫霉菌丝生长速率达13.71 mm/d;培养过程中菌丝鲜重增加,孢子囊数量增加且不影响烟草疫霉游动孢子的形成与释放;致病性增强、叶片黄化加快。(2)烟叶病际微生物可高效代谢β-甲基-D-葡萄糖苷、L-天冬酰胺酸、γ-羟基丁酸等14种碳源,共培养时病际微生物碳源代谢能力减弱,仅可高效代谢甘氨酰-L-谷氨酸、α-D-乳糖、D-苹果酸等13种碳源。茄科劳尔氏菌与烟草疫霉共存时会促进烟草疫霉菌丝生长和孢子囊形成,致病性增强,病际微生物碳源代谢能力减弱。 展开更多

关键词 烟草疫霉 茄科劳尔氏菌 生物量 孢子囊 碳源代谢功能

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茄科劳尔氏菌单克隆抗体的制备及其特性鉴定

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作者 马兰 曾海娟 +9 位作者 谢曼曼 胡谦 丁承超 王淑娟 翟绪昭 孙静娟 李杰 王艳 董庆利 刘箐 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期95-100,共6页

茄科劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum,RS)是番茄、茄子、辣椒、马铃薯等茄科蔬菜青枯病害的致病菌。为实现对RS的快速高效检测,以茄科劳尔氏菌株1.76免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后利用间接酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked Immunosorbent... 茄科劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum,RS)是番茄、茄子、辣椒、马铃薯等茄科蔬菜青枯病害的致病菌。为实现对RS的快速高效检测,以茄科劳尔氏菌株1.76免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后利用间接酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)筛选出3株能稳定分泌抗茄科劳尔氏菌株1.76的单克隆杂交瘤细胞株1C1、1B3和9D7。然后利用小鼠体内诱生腹水,1C1、1B3和9D7效价分别为1:1 024 000、1:64 000、1:256 000。采用饱和硫酸铵沉淀及Protein-G亲和层析法纯化腹水,经SDS-PAGE鉴定显示纯化后的单克隆抗体(Monoclonal Antibodies,mAb)纯度较高。纯化后单克隆抗体(2 mg/mL)效价分别为1:17 529、1:35 819、1:50 000,抗体亚型均为IgG1。对3株抗体进行特异性检测结果显示,1C1和9D7均不能与RS-5结合,1B3不能结合1.74和RS-5。此外,检测结果还表明3株单克隆抗体与桑肠杆菌JX-6、苏云金芽胞杆菌SYJ及实验室现有11株燕麦嗜酸菌卡特莱兰亚种、燕麦嗜酸菌西瓜亚种、玉米细菌性条斑菌、嗜酸菌魔芋亚种,梨火疫病菌QB0809、 XL-4,玉米细菌性枯萎病菌QB0241、QB0242,水稻细菌性谷枯病菌QB0017、QB0753、QB0755均无交叉情况。此次茄科劳尔氏菌抗体的制备,为后期青枯病菌的快速检测提供参考。 展开更多

关键词 茄科劳尔氏菌 ELISA 单克隆抗体

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番茄根际代谢物抵御茄科劳尔氏菌入侵机制研究 被引量：3

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作者 刘婷 文涛 +4 位作者 赵梦丽 张媛 张超 袁军 沈其荣 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期460-467,共8页

[目的]本文旨在研究茄科劳尔氏菌与番茄根际代谢物的互作关系,明确根际代谢物抵御茄科劳尔氏菌的入侵机制,为防控番茄青枯病和番茄绿色生产提供理论依据和关键技术。[方法]收集健康和发病番茄根际土壤样品,通过气相色谱-质谱(GC-MS)分... [目的]本文旨在研究茄科劳尔氏菌与番茄根际代谢物的互作关系,明确根际代谢物抵御茄科劳尔氏菌的入侵机制,为防控番茄青枯病和番茄绿色生产提供理论依据和关键技术。[方法]收集健康和发病番茄根际土壤样品,通过气相色谱-质谱(GC-MS)分析比较两者间根际代谢物的组分差异。分别在纯培养(作为辅助碳源和唯一基础碳源)和根际条件下,研究差异根际代谢物对茄科劳尔氏菌生长及定殖的影响。[结果]健康和发病番茄根际代谢物在组分和含量上存在显著差异。健康番茄根际显著富集的代谢物有果糖、蔗糖、肌醇半乳糖苷、蜜二糖、龙胆二糖;发病番茄根际显著富集的代谢物有皮质醇、四氢皮质醇、明串珠菌二糖、2,3-二甲基琥珀酸、角鲨烯、葡萄糖酸。纯培养试验发现:蔗糖、果糖和蜜二糖作为辅助碳源时不会直接抑制茄科劳尔氏菌生长,而作为唯一碳源时无法供茄科劳尔氏菌生长。根际添加试验发现,蔗糖、果糖和蜜二糖处理显著降低茄科劳尔氏菌在番茄根部定殖数量,并同时显著增加番茄根部总细菌的数量。[结论]番茄根际代谢物组分和含量与番茄健康状况有关。健康番茄根际富集的蔗糖、果糖和蜜二糖可能通过大量培育其他根际微生物的生长来抵御茄科劳尔氏菌的定殖。 展开更多

关键词 番茄 茄科劳尔氏菌 根际代谢物 气相色谱-质谱分析 抑病机制

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江西烟草青枯病菌的分子鉴定及系统发育分析 被引量：3

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作者 周泽科 张超群 +1 位作者 崔超宇 蒋军喜 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期84-86,共3页

从江西省信丰、广昌和峡江3县采集呈典型症状的烟草青枯病株进行病原菌分离,得到3个具有致病性的细菌分离株,分别命名为RSXF-1、RSGC-1和RSXJ-1。采用细菌16S rDNA基因通用引物对3个分离株的16S rDNA基因进行PCR扩增,对扩增产物进行克... 从江西省信丰、广昌和峡江3县采集呈典型症状的烟草青枯病株进行病原菌分离,得到3个具有致病性的细菌分离株,分别命名为RSXF-1、RSGC-1和RSXJ-1。采用细菌16S rDNA基因通用引物对3个分离株的16S rDNA基因进行PCR扩增,对扩增产物进行克隆和序列测定,各得到长为1 500 bp的核苷酸序列。经同源性分析,发现3个分离株均为茄科劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum),且三者间具有高度的序列同源性。将此3个分离株的16S rDNA核苷酸序列与GenBank中R.solanacearum代表性株系的对应序列进行同源性分析并构建系统发育树,结果表明RSXF-1、RSGC-1和RSXJ-1均与我国广东省和云南省的分离株具有最近的亲缘发育关系。 展开更多

关键词 烟草青枯病 茄科劳尔氏菌 16S RDNA 序列测定

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健康与感染青枯病烟株根际土壤与茎秆真菌群落结构与多样性 被引量：22

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作者 向立刚 郭华 +5 位作者 周浩 谢红炼 蔡刘体 汪汉成 丁伟 余知和 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期189-196,228,共9页

为研究感染青枯病后烟株根际土壤与茎秆真菌群落结构与多样性的变化,对健康和感染青枯病烟株的根际土壤、病株茎秆发病组织和健株茎秆健康组织等样品中真菌ITS区的rDNA进行了PCR扩增、用Illumina MiSeq测序技术对扩增DNA片段进行高通量... 为研究感染青枯病后烟株根际土壤与茎秆真菌群落结构与多样性的变化,对健康和感染青枯病烟株的根际土壤、病株茎秆发病组织和健株茎秆健康组织等样品中真菌ITS区的rDNA进行了PCR扩增、用Illumina MiSeq测序技术对扩增DNA片段进行高通量测序,并分析不同样品的真菌群落组成与多样性。结果表明,所有烟株根际土壤中优势门为子囊菌门Ascomycota和接合菌门Zygomycota;所有茎秆样品中优势门为担子菌门Basidiomycota和子囊菌门。在属水平,被孢霉属Mortierella、镰刀菌属Fusarium和隐球菌属Cryptococcus为所有土壤中的主要菌属,Boeremia主要存在于发病烟株根际土壤中,而木霉属Trichoderma主要存在于健康烟株根际土壤。发病茎秆病害组织中优势属为小画线壳属Monographella、隐球菌属、鬼伞属Coprinopsis和赤霉属Gibberella;发病茎秆病健交界处组织中优势属为隐球菌属、红酵母属Rhodotorula和小画线壳属。健康烟株茎秆组织中优势属为隐球菌属、链格孢属Alternaria和红酵母属;健康烟株中与发病茎秆病健交界处组织等高茎秆中优势属为镰刀菌属、隐球菌属、链格孢属和Gibellulopsis。青枯菌侵染烟株后根际土壤、发病茎秆病害组织和发病茎秆病健交界处组织的真菌群落中物种丰富度与多样性均显著提高,且发病茎秆病害组织与发病茎秆病健交界处组织真菌群落的变化大于根际土壤。研究结果为烟草青枯病的生物防治提供了参考。 展开更多

关键词 Illumina高通量测序 真菌多样性 群落结构 烟草青枯病 茄科劳尔氏菌

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五种药剂对烟草青枯病菌的抑制活性及碳代谢的影响 被引量：5

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作者 罗飞 穆青 +5 位作者 余知和 孙美丽 郭涛 李文红 汪汉成 蔡刘体 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期870-877,共8页

由茄科劳尔氏菌Ralstonia solanacearum引起的烟草青枯病是烟叶生产上的重要病害之一,严重影响烟叶的产量和品质。为筛选高效防治烟草青枯病的药剂,本研究采用平板菌落计数法测定了中生菌素、土霉素、噻霉酮、春雷霉素和氯溴异氰尿酸对... 由茄科劳尔氏菌Ralstonia solanacearum引起的烟草青枯病是烟叶生产上的重要病害之一,严重影响烟叶的产量和品质。为筛选高效防治烟草青枯病的药剂,本研究采用平板菌落计数法测定了中生菌素、土霉素、噻霉酮、春雷霉素和氯溴异氰尿酸对茄科劳尔氏菌的抑制活性,并通过Biolog GENⅢ微平板法分析了上述5种药剂胁迫下茄科劳尔氏菌的碳代谢情况和对化学物质的敏感性差异。结果表明:5种药剂均能抑制茄科劳尔氏菌的生长,抑制活性从强到弱依次为中生菌素>土霉素>噻霉酮>春雷霉素>氯溴异氰尿酸,对应的EC_(50)值分别为0.24、0.74、2.84、7.95和273.99 mg/L。Biolog GENⅢ碳代谢测定结果显示:茄科劳尔氏菌能利用Biolog GENⅢ微平板中糖类及氨基酸类等71种碳源,但在药剂胁迫下,该菌对碳源的代谢受到了不同程度的抑制,其中抑制程度最显著的是氨基酸、己糖酸、羧酸、酯和脂肪酸类碳水化合物;随着5种药剂质量浓度增加,在6 mg/L中生菌素、8 mg/L土霉素、30 mg/L春雷霉素和5738 mg/L氯溴异氰尿酸胁迫下,茄科劳尔氏菌对Biolog GENⅢ微平板中65、18、60和7种碳源的代谢强度分别降低,同时对6、53、10和60种碳源的代谢强度增强;在8 mg/L噻霉酮胁迫下,茄科劳尔氏菌对Biolog GENⅢ微平板中71种碳源的代谢强度均降低。此外,在不同浓度的5种药剂胁迫和无药剂处理时,茄科劳尔氏菌对Biolog GENⅢ微平板中23种化学物质的敏感性不同,其对低浓度NaCl敏感性较低,而对低pH值更敏感。本研究结果可为烟草青枯病化学防控药剂的选择及其高效利用提供参考。 展开更多

关键词 抗生素 茄科劳尔氏菌 烟草青枯病 细菌代谢 碳代谢 抑菌活性 Biolog GENⅢ

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防控温郁金细菌性枯萎病的生物有机肥研制与应用 被引量：1

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作者 冯林 周铨 +1 位作者 陈卫良 毛碧增 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第3期630-638,共9页

茄科劳尔氏菌(Ralstonia solanaceraum)引起的温郁金(Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling)细菌性枯萎病是目前温郁金种植中的毁灭性病害。本文利用2株高效拮抗菌Paenibacillus jamila ZJU-C612-3和Bacillus amyloliquefaciens ZJU-C61... 茄科劳尔氏菌(Ralstonia solanaceraum)引起的温郁金(Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling)细菌性枯萎病是目前温郁金种植中的毁灭性病害。本文利用2株高效拮抗菌Paenibacillus jamila ZJU-C612-3和Bacillus amyloliquefaciens ZJU-C612-4研制生物有机肥,并进行田间防治效果试验。温室盆栽试验结果显示,施生物有机肥的温郁金发病率下降了60百分点;田间试验显示,每667 m 2施200 kg生物有机肥作为基肥的田块中,健康根茎的发病率降低17.66百分点,且植株生长健壮。此外,施生物有机肥能缓解温郁金的连作障碍,在5 a连作田块施该肥后,在病害高发期的7月和8月,连作根茎的发病率分别下降9.43百分点和19.75百分点。研究结果可为今后防治温郁金细菌性枯萎病的专用生物有机肥的产业化开发提供依据。 展开更多

关键词 温郁金 茄科劳尔氏菌 生物有机肥 细菌性枯萎病 发病率

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江西和广东烟草青枯菌对噬菌体的敏感性及聚类分析 被引量：3

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作者 余成鹏 胡蓉花 +3 位作者 陈小强 苏颖 林培炯 刘琼光 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期699-707,共9页

为探索不同噬菌体对不同烟草青枯菌的侵染能力,选择从土壤中分离的6个青枯菌噬菌体,通过双层平板噬菌斑检测法,测定6个噬菌体P1521、P1553、P1556-1、P1556-2、P574-2和P7-1对江西和广东两省烟区75个烟草青枯菌的侵染和裂解情况,并基于... 为探索不同噬菌体对不同烟草青枯菌的侵染能力,选择从土壤中分离的6个青枯菌噬菌体,通过双层平板噬菌斑检测法,测定6个噬菌体P1521、P1553、P1556-1、P1556-2、P574-2和P7-1对江西和广东两省烟区75个烟草青枯菌的侵染和裂解情况,并基于青枯菌对3个噬菌体的敏感性差异,进一步对75个青枯菌进行聚类分析。结果表明:6个噬菌体分别可侵染65、63、61、57、57和24个烟草青枯菌菌株,噬菌体P1556-1和P1521寄主范围较广,噬菌体P1553寄主范围较窄;基于P1556-1、P574-2和P1553等3个噬菌体,对75个青枯菌进行聚类分析,将75个烟草青枯菌分为7个遗传组(Rs-I^Rs-VII),其中Rs-IV菌株数量较多,包括31个青枯菌,占供试菌株的41.33%,这些菌株对P1553噬菌体均表现不敏感,而对其它2个噬菌体敏感。 展开更多

关键词 烟草青枯病 茄科劳尔氏菌 噬菌体 寄主范围 遗传组

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广东省4种花卉青枯病的病原鉴定 被引量：6

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作者 刘琼光 曾伟达 +1 位作者 郑向华 陈泽鹏 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期277-280,共4页

采用传统和分子生物学方法,对广东省发生的美人蕉、姜花、黄穗和百日草4种花卉青枯病的病原进行了鉴定。通过病菌形态观察、染色试验、生理生化性状测定以及细菌16S rDNA序列分析,结果表明4种花卉青枯病病原为茄科劳尔氏菌Ralstonia sol... 采用传统和分子生物学方法,对广东省发生的美人蕉、姜花、黄穗和百日草4种花卉青枯病的病原进行了鉴定。通过病菌形态观察、染色试验、生理生化性状测定以及细菌16S rDNA序列分析,结果表明4种花卉青枯病病原为茄科劳尔氏菌Ralstonia solanacearum。这4种花卉的青枯病均为国内首次报道,且这4种花卉均为茄科劳尔氏菌R.solanacearum的新寄主。 展开更多

关键词 美人蕉 姜花 黄穗 百日草 茄科劳尔氏菌

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富贵菜青枯病的初步诊断 被引量：1

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作者 梁萍 周晓舟 +2 位作者 黄艳花 陈丹 覃连红 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第1期87-90,共4页

2005年,在广西现代农业技术展示中心首先发现富贵菜感染一种萎蔫性病害,此病对富贵菜产量影响极大,有的地方已暴发成灾。为了解病害发生情况,以便生产上有效控制其危害,作者通过田间调查、病原菌分离、纯化、致病性与寄主范围测定,证实... 2005年,在广西现代农业技术展示中心首先发现富贵菜感染一种萎蔫性病害,此病对富贵菜产量影响极大,有的地方已暴发成灾。为了解病害发生情况,以便生产上有效控制其危害,作者通过田间调查、病原菌分离、纯化、致病性与寄主范围测定,证实了该病是一种维管束细菌性病害——青枯病,同时记录了该病的症状及其危害情况。该病原菌与茄科劳尔氏菌[Ralstonia so-lanacearum(Smith)Yabuuchi等]至少有10种相同的寄主,其中富贵菜(Gynura divaricata)、少花龙葵(Solannum photeinocarpum)、当归菜(Angelica keiskei)、珍珠菜(Artemisia lactiflor)、紫背天葵(Gynura bicolor)、菊花脑(Chrysanthemum indicum)6种植物是茄科劳尔氏菌的新记录寄主。 展开更多

关键词 富贵菜 青枯病 茄科劳尔氏菌

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紫背天葵青枯病的初步研究

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作者 梁萍 陈丹 +1 位作者 黄艳花 覃连红 《湖北农业科学》 北大核心 2008年第10期1168-1170,共3页

对紫背天葵青枯病进行了田间调查、病原菌分离及纯化、致病性与寄主范围测定,结果证实该病是一种维管束细菌性病害,其病原菌与茄科劳尔氏菌至少有10种相同的寄主,其中紫背天葵等6种植物是茄科劳尔氏菌的新寄主。

关键词 紫背天葵 青枯病 茄科劳尔氏菌 致病性

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不同绿肥防控烟草青枯病的机理 被引量：5

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作者 刘艳霞 张恒 +5 位作者 姚云静 毛林昌 朱经伟 高维常 李蕾 李想 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期2326-2337,共12页

针对烟草青枯病[病原青枯菌(Ralstonia solanacearum)]对烟叶生产造成的危害,探索不同种类绿肥翻压对土壤青枯菌和微生物群落的影响,为生物防控烟草土传病害提供新的手段和方法。以适合西南烟区种植的15种绿肥为材料,利用盆栽生物模拟,... 针对烟草青枯病[病原青枯菌(Ralstonia solanacearum)]对烟叶生产造成的危害,探索不同种类绿肥翻压对土壤青枯菌和微生物群落的影响,为生物防控烟草土传病害提供新的手段和方法。以适合西南烟区种植的15种绿肥为材料,利用盆栽生物模拟,筛选并验证能够抑制土壤中青枯菌数量的绿肥种类,采取超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)、荧光定量PCR以及微生物高通量测序等技术,鉴定、分析绿肥根系分泌物主要物质种类和含量,并开展田间试验验证防控效果。结果表明:1)随着绿肥种植时间增加,土壤中青枯菌数量总体呈下降趋势,绿豆(Vigna radi)根系分泌物对青枯菌的抑制效果最明显,抑菌率达69.05%。2)二月兰(Orychophragmus violaceus)根系分泌物中的氨基酸总量最高,油菜(Brassica campestris)最低,绿豆的酪氨酸含量最高,比最低含量(油菜)高54.74%,二月兰的谷氨酸和丙氨酸含量明显高于其他绿肥,毛叶苕子(Vicia villosa)的丝氨酸含量比绿豆高33.19%。3)田间施用绿肥后,绿豆处理的青枯病防控率高达55.61%。4)对照(灭菌自来水接种劳尔氏菌)的根际土壤青枯菌相对丰度明显高于种植绿肥的土壤,分别是油菜、毛叶苕子、绿豆、二月兰的4.35、4.14、2.90和2.29倍,绿豆处理土壤中的α-变形菌属(Alphaproteobacteria)、粘细菌属(Haliangium)和克雷伯氏菌属(Klebsiella)相对丰度高于其他处理。5)绿肥处理的土壤在氨基酸代谢、转录代谢、复制和修复代谢等功能潜力上有所增强。研究表明,绿肥根系分泌物极大地影响吧土传病原菌数量,绿肥施用后土壤微生物群落结构和功能潜力发生变化,绿豆适宜生物防控青枯病,这为烟草青枯病的绿色防控提供了新的途径和方法。 展开更多

关键词 绿肥 烟叶生产 青枯病生物防控 茄科劳尔氏菌 根系分泌物 土壤微生物群落结构 功能基因

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