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苯丙氨酸脱氨酶cDNA在大肠杆菌中的克隆与表达及酶法合成L-苯丙氨酸被引量：5: 1; 作者胡维刘敬忠 +2 位作者向华贾兴元周艳《微生物学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期30-32,共3页; 利用基因重组技术 ,在大肠杆菌中克隆并表达苯丙氨酸脱氨酶 (PAL) (EC4 .3 .1 .5) ,并应用此酶转化肉桂酸生成L 苯丙氨酸。方法是将欧芹苯丙氨酸脱氨酶cDNA亚克隆到组成型表达载体pMG3 6e启动子P3 2下游 ,以菌落PCR法鉴定插入片段的大... 展开更多; 关键词苯丙氨酸脱氨酶苯丙氨酸基因表达酶法合成; 在线阅读下载PDF 职称材料

苯丙氨酸脱氨酶发酵工艺及其酶学性质研究被引量：4: 2; 作者贾晓娟郭丽芸 +1 位作者刘毅焦庆才《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第11期827-830,共4页; 选育出一株具有较高苯丙氨酸脱氨酶活性的菌株巨大芽孢杆菌AS1.127-NJU10。考察了该菌的发酵产酶条件,结果表明:蔗糖为最佳碳源、酵母浸膏和NH4C l组成最佳氮源,其质量浓度分别为:ρ(蔗糖)=20 g/L,ρ(酵母浸膏)=2 g/L和ρ(NH4C l)=10 g... 展开更多; 关键词苯丙氨酸脱氨酶巨大芽孢杆菌AS1.127-NJU10 发酵; 在线阅读下载PDF 职称材料

由BL21DE3^(pET28C-rPAL-1-cDNA)高效表达具有酶活性的苯丙氨酸脱氨酶被引量：1: 3; 作者蔡朱男余应年 +1 位作者陈星若袁丽芳《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第3期211-215,共5页; 为了开辟苯丙酮尿症治疗新途径 ,本实验室构建了插入水稻苯丙氨酸脱氨酶 (PAL) c DNA的重组表达质粒 ,并用它转化大肠杆菌 BL2 1 DE3获得工程菌 BL2 1 DE3p ET2 8C-r PAL -1-c DNA.经异丙基硫代 -β-D-半乳糖苷诱导后 ,通过 SDS- PAGE... 展开更多; 关键词脱氨酶类苯丙氨酸脱氨酶苯丙氨酸苯丙酮尿症; 在线阅读下载PDF 职称材料

固定化苯丙氨酸脱氨酶拆分D,L苯丙氨酸制备D苯丙氨酸: 4; 作者房月芹朱龙宝 +4 位作者黄楠周丽丁重阳刘颖周哲敏《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期243-246,共4页; 为了建立新的D-苯丙氨酸生产工艺,对固定化苯丙氨酸解氨酶(PAL)拆分D,L-苯丙氨酸进行了研究。以介孔材料(MCM-41)为载体固定PAL,将其用于拆分消旋体D,L-苯丙氨酸制备高光学纯的D-苯丙氨酸。最佳的固定化条件是载酶量为50mg/g、壳聚糖浓... 展开更多; 关键词苯丙氨酸脱氨酶介孔材料MCM-41 固定化 D L-苯丙氨酸拆分; 在线阅读下载PDF 职称材料

浙江沿海细菌芳香族氨基酸代谢途径的研究被引量：1: 5; 作者史薇刘乐然苏秀榕《水利渔业》北大核心 2007年第2期22-23,共2页; 根据苯丙氨酸脱氨酶可由苯丙氨酸诱导产生的原理,采用以苯丙氨酸为底物的简易纸片法为初筛模型,筛选浙江沿海具有产苯丙氨酸酶能力的细菌。对2 315株海洋细菌发酵液的研究结果表明,23.20%的细菌可以产生苯丙氨酸脱氨酶,其中12.22%具有... 展开更多; 关键词浙江沿海海洋细菌苯丙氨酸脱氨酶氮(氨)代谢; 在线阅读下载PDF 职称材料

用PCR法直接快速筛查重组阳性克隆被引量：14: 6; 作者胡维向华 +1 位作者周艳刘敬忠《生物技术通报》 CAS CSCD 1999年第6期39-40,43,共3页; 本研究目的是应用ＰＣＲ法快速筛查插入有苯丙氨酸脱氨酶（ＰＡＬ）ｃＤＮＡ重组阳性克隆。用于ＰＣＲ扩增的引物是位于载体ｐＥＴ２３ｂ启动子处的Ｔ７启动子引物和位于目的基因ＰＡＬｃＤＮＡ３′端终止密码ＴＡＡ处的引物。以... 展开更多; 关键词 PCR 基因克隆苯丙氨酸脱氨酶重组体筛查阳性克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

水稻(秀水11)再生系统的改进和转化(英文 ) 被引量：1: 7; 作者郭泽建李德葆《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期247-253,共7页; 对水稻 (秀水 11)的再生了进行了改进 ,再生频率达到 35% .利用该系统 ,我们进行了苯丙氨酸脱氨酸基因的转化 ,获得了再生植株 .经; 关键词水稻再生转化苯丙氨酸脱氨酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名苯丙氨酸脱氨酶cDNA在大肠杆菌中的克隆与表达及酶法合成L-苯丙氨酸被引量：5: 1; 作者胡维刘敬忠向华贾兴元周艳; 机构首都医科大学附属北京红十字朝阳医院基础医学研究中心; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期30-32,共3页; 基金北京市自然科学基金资助项目; 文摘利用基因重组技术 ,在大肠杆菌中克隆并表达苯丙氨酸脱氨酶 (PAL) (EC4 .3 .1 .5) ,并应用此酶转化肉桂酸生成L 苯丙氨酸。方法是将欧芹苯丙氨酸脱氨酶cDNA亚克隆到组成型表达载体pMG3 6e启动子P3 2下游 ,以菌落PCR法鉴定插入片段的大小和方向都正确的克隆 ,进而以HPLC检测肉桂酸浓度的方法鉴别重组质粒有催化肉桂酸生成L 苯丙氨酸的酶活力。结果获得能表达PAL酶活性的阳性克隆 ,在pH1 0 ,含 1 .0 %肉桂酸、8.0mol/L氨的转化液中 ,3 0℃反应 2 0h ,肉桂酸重量转化率可达 60 %。该基因工程菌有希望用于工业化生产L 苯丙氨酸。; 关键词苯丙氨酸脱氨酶苯丙氨酸基因表达酶法合成; Keywords phenylalanine ammonia lyase (PAL) phenylalanine gene expression.; 分类号 TQ922.9 [轻工技术与工程—发酵工程] TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名苯丙氨酸脱氨酶发酵工艺及其酶学性质研究被引量：4: 2; 作者贾晓娟郭丽芸刘毅焦庆才; 机构南京大学医药生物技术国家重点实验室; 出处《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第11期827-830,共4页; 基金国家技术创新基金(02CJ-13-01-16)~~; 文摘选育出一株具有较高苯丙氨酸脱氨酶活性的菌株巨大芽孢杆菌AS1.127-NJU10。考察了该菌的发酵产酶条件,结果表明:蔗糖为最佳碳源、酵母浸膏和NH4C l组成最佳氮源,其质量浓度分别为:ρ(蔗糖)=20 g/L,ρ(酵母浸膏)=2 g/L和ρ(NH4C l)=10 g/L;发酵培养基最适pH=6.5,培养温度为37℃;诱导物ρ(L-苯丙氨酸)=1 g/L时,酶活最高达1 070 U。同时对苯丙氨酸脱氨酶的性质进行了研究,结果表明:该酶最适pH=5.8,最适温度为40℃,反应液中添加φ(吐温-80)=0.2%和c(K+)=10-5mol/L能明显提高酶活。; 关键词苯丙氨酸脱氨酶巨大芽孢杆菌AS1.127-NJU10 发酵; Keywords Phenylalanine deaminase Bacillus magterium AS1. 127 - NJU10 fermentation; 分类号 O93 [理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名由BL21DE3^(pET28C-rPAL-1-cDNA)高效表达具有酶活性的苯丙氨酸脱氨酶被引量：1: 3; 作者蔡朱男余应年陈星若袁丽芳; 机构浙江大学医学院病理生理学教研室中国医学科学院基础医学研究所遗传室; 出处《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第3期211-215,共5页; 基金浙江省自然科学基金资助! (39746 3); 文摘为了开辟苯丙酮尿症治疗新途径 ,本实验室构建了插入水稻苯丙氨酸脱氨酶 (PAL) c DNA的重组表达质粒 ,并用它转化大肠杆菌 BL2 1 DE3获得工程菌 BL2 1 DE3p ET2 8C-r PAL -1-c DNA.经异丙基硫代 -β-D-半乳糖苷诱导后 ,通过 SDS- PAGE及微型蛋白双向电泳 ,证明表达的目的蛋白的分子量为 78.6ku,主要存在于破碎菌体的沉积物中 (以包涵体形式存在 ) .按 Zucker法测定 PAL酶活性 ,并进行酶动力学实验 .测得表达蛋白的酶比活性为 462 nmol·g-1·min-1,Km,vmax分别为 0 .50 mmol·L-1和3. 0 5nmol · min-1.结果证明所建立BL2 1 DE3p ET2 8C-r PAL -1-c DNA大肠杆菌菌株能高效表达有活性的 PAL .; 关键词脱氨酶类苯丙氨酸脱氨酶苯丙氨酸苯丙酮尿症; Keywords ammonia-lyases phenylalanine ammonia-lyase phenylalanine enzymology; 分类号 R96 [医药卫生—药理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名固定化苯丙氨酸脱氨酶拆分D,L苯丙氨酸制备D苯丙氨酸: 4; 作者房月芹朱龙宝黄楠周丽丁重阳刘颖周哲敏; 机构江南大学环境与土木工程学院江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室安徽工程大学生物化学工程学院; 出处《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期243-246,共4页; 基金工业生物技术教育部重点实验开发课题(KLIB-KF201107 KLIB-KF201203); 文摘为了建立新的D-苯丙氨酸生产工艺,对固定化苯丙氨酸解氨酶(PAL)拆分D,L-苯丙氨酸进行了研究。以介孔材料(MCM-41)为载体固定PAL,将其用于拆分消旋体D,L-苯丙氨酸制备高光学纯的D-苯丙氨酸。最佳的固定化条件是载酶量为50mg/g、壳聚糖浓度为0.1%(w/v)、戊二醛浓度为0.05%(v/v),固定化酶的活性达到最大,酶活保留达到92%,重复利用20次后,活性仍能保持85%。将制备的固定化酶应用于D,L-苯丙氨酸的拆分,反应24h L-苯丙氨酸转化率达到98%,D-苯丙氨酸的ee值达到96%,且连续拆分10个批次后固定化酶对L-苯丙氨酸的转化率仍保持在95%以上。因此,高效稳定的固定化PAL在拆分D,L-苯丙氨酸生产D-苯丙氨酸中具有良好的应用前景。; 关键词苯丙氨酸脱氨酶介孔材料MCM-41 固定化 D L-苯丙氨酸拆分; Keywords phenylalanine ammonia lyase (PAL) MCM-41 immobilization chiral resolution of D, L- phenylalanine; 分类号 TS255.1 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名浙江沿海细菌芳香族氨基酸代谢途径的研究被引量：1: 5; 作者史薇刘乐然苏秀榕; 机构宁波大学生命科学与生物工程学院中山大学生命科学学院; 出处《水利渔业》北大核心 2007年第2期22-23,共2页; 文摘根据苯丙氨酸脱氨酶可由苯丙氨酸诱导产生的原理,采用以苯丙氨酸为底物的简易纸片法为初筛模型,筛选浙江沿海具有产苯丙氨酸酶能力的细菌。对2 315株海洋细菌发酵液的研究结果表明,23.20%的细菌可以产生苯丙氨酸脱氨酶,其中12.22%具有微弱酶活力,8.68%具有较低酶活,2.07%具有中等酶活,0.23%具有强酶活。在浙江沿海有76.80%的细菌通过将苯丙氨酸羧化转变成酪氨酸后进入三羧酸循环,进而参与机体代谢;其余细菌可以通过PAL的作用来转移苯丙氨酸的氨基形成苯丙酮酸和氨。; 关键词浙江沿海海洋细菌苯丙氨酸脱氨酶氮(氨)代谢; 分类号 Q936 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名用PCR法直接快速筛查重组阳性克隆被引量：14: 6; 作者胡维向华周艳刘敬忠; 机构首都医科大学附属北京红十字朝阳医院; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 1999年第6期39-40,43,共3页; 基金北京自然科学基金; 文摘本研究目的是应用ＰＣＲ法快速筛查插入有苯丙氨酸脱氨酶（ＰＡＬ）ｃＤＮＡ重组阳性克隆。用于ＰＣＲ扩增的引物是位于载体ｐＥＴ２３ｂ启动子处的Ｔ７启动子引物和位于目的基因ＰＡＬｃＤＮＡ３′端终止密码ＴＡＡ处的引物。以灭菌吸头挑一单菌落加入ＰＣＲ体系扩增。结果：在筛查的３个克隆中，有２个阳性克隆，并且插入方向正确，经ＤＮＡ序列测定得到进一步证实。结果表明，以ＰＣＲ方法筛查重组阳性克隆，可以简便快速鉴定插入片段的大小和方向，不需提取质粒。; 关键词 PCR 基因克隆苯丙氨酸脱氨酶重组体筛查阳性克隆; Keywords Ploymerase Chain Reaction (PCR) recombinant clone phenylalanine ammonia lgase(PAL); 分类号 Q784 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水稻(秀水11)再生系统的改进和转化(英文 ) 被引量：1: 7; 作者郭泽建李德葆; 机构浙江大学生物技术研究所; 出处《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期247-253,共7页; 基金 The National Natural Science Foundationof China(39980 0 33); 文摘对水稻 (秀水 11)的再生了进行了改进 ,再生频率达到 35% .利用该系统 ,我们进行了苯丙氨酸脱氨酸基因的转化 ,获得了再生植株 .经; 关键词水稻再生转化苯丙氨酸脱氨酶; Keywords Oryza sativa regeneration transformation phenylalanine ammonia lyase; 分类号 S511.035.3 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	苯丙氨酸脱氨酶cDNA在大肠杆菌中的克隆与表达及酶法合成L-苯丙氨酸	胡维刘敬忠向华贾兴元周艳	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2000	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	苯丙氨酸脱氨酶发酵工艺及其酶学性质研究	贾晓娟郭丽芸刘毅焦庆才	《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心	2005	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	由BL21DE3^(pET28C-rPAL-1-cDNA)高效表达具有酶活性的苯丙氨酸脱氨酶	蔡朱男余应年陈星若袁丽芳	《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心	2000	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	固定化苯丙氨酸脱氨酶拆分D,L苯丙氨酸制备D苯丙氨酸	房月芹朱龙宝黄楠周丽丁重阳刘颖周哲敏	《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	浙江沿海细菌芳香族氨基酸代谢途径的研究	史薇刘乐然苏秀榕	《水利渔业》北大核心	2007	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	用PCR法直接快速筛查重组阳性克隆	胡维向华周艳刘敬忠	《生物技术通报》 CAS CSCD	1999	14	在线阅读下载PDF 职称材料
7	水稻(秀水11)再生系统的改进和转化(英文 )	郭泽建李德葆	《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2000	1	在线阅读下载PDF 职称材料