目的观察不同浓度的苦杏仁苷对IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的影响,并进一步探讨其作用的可能机制。方法从1月龄SD大鼠椎间盘中分离软骨终板并培养,经鉴定后,随机分组为正常组、诱导组、苦杏仁苷10-2、10-3、10-4、10-5mol·...目的观察不同浓度的苦杏仁苷对IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的影响,并进一步探讨其作用的可能机制。方法从1月龄SD大鼠椎间盘中分离软骨终板并培养,经鉴定后,随机分组为正常组、诱导组、苦杏仁苷10-2、10-3、10-4、10-5mol·L-1给药组,CCK-8法检测各组对大鼠椎间盘软骨终板细胞增殖的影响。Real-time PCR(RTPCR)检测聚集蛋白聚糖(aggrecan-1)、Ⅱ型胶原(type II collagen,Col2a1)、Ⅹ型胶原(type X collagen,Col10al)、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)基因的表达情况。细胞免疫荧光检测分析Col2a1、Col10al的表达,流式细胞仪检测其对软骨终板细胞凋亡的影响。结果苦杏仁苷10-2mol·L-1给药组能够抑制椎间盘软骨终板细胞的增殖,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。流式分析,其细胞凋亡比例较诱导组及正常组均较高。RT-PCR检测结果显示一定浓度的苦杏仁苷能够上调Aggrecan、Col2a1mRNA的表达,下调Col10al、MMP-13 mRNA的表达,与诱导组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。一定浓度的苦杏仁苷能够上调Col2a1蛋白的表达,下调Col10al蛋白的表达。结论一定浓度的苦杏仁苷能够抑制IL-1β诱导大鼠椎间盘软骨终板细胞发生退变,起到延缓椎间盘退变的作用。展开更多
文摘目的观察不同浓度的苦杏仁苷对IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的影响,并进一步探讨其作用的可能机制。方法从1月龄SD大鼠椎间盘中分离软骨终板并培养,经鉴定后,随机分组为正常组、诱导组、苦杏仁苷10-2、10-3、10-4、10-5mol·L-1给药组,CCK-8法检测各组对大鼠椎间盘软骨终板细胞增殖的影响。Real-time PCR(RTPCR)检测聚集蛋白聚糖(aggrecan-1)、Ⅱ型胶原(type II collagen,Col2a1)、Ⅹ型胶原(type X collagen,Col10al)、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)基因的表达情况。细胞免疫荧光检测分析Col2a1、Col10al的表达,流式细胞仪检测其对软骨终板细胞凋亡的影响。结果苦杏仁苷10-2mol·L-1给药组能够抑制椎间盘软骨终板细胞的增殖,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。流式分析,其细胞凋亡比例较诱导组及正常组均较高。RT-PCR检测结果显示一定浓度的苦杏仁苷能够上调Aggrecan、Col2a1mRNA的表达,下调Col10al、MMP-13 mRNA的表达,与诱导组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。一定浓度的苦杏仁苷能够上调Col2a1蛋白的表达,下调Col10al蛋白的表达。结论一定浓度的苦杏仁苷能够抑制IL-1β诱导大鼠椎间盘软骨终板细胞发生退变,起到延缓椎间盘退变的作用。
