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甘蔗苏氨酸脱氨酶基因的克隆与表达分析 被引量:4
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作者 张玉叶 黄宁 +3 位作者 苏炜华 肖新换 罗俊 阙友雄 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期59-67,共9页
应用电子克隆技术.以烟草AAG59585序列为探针.获得了甘蔗苏氨酸脱氨酶(threonine deaminase)基因的全长cDNA,命名为Sc功。经RT—PCR扩增和验证,该基因序列与电子克隆结果一致性高达99%。序列分析结果表明:ScTD基因全长2120bp,... 应用电子克隆技术.以烟草AAG59585序列为探针.获得了甘蔗苏氨酸脱氨酶(threonine deaminase)基因的全长cDNA,命名为Sc功。经RT—PCR扩增和验证,该基因序列与电子克隆结果一致性高达99%。序列分析结果表明:ScTD基因全长2120bp,具有完整的开放阅读框(ORF,164-1681bp),编码505个氨基酸,该基因编码蛋白定位于微体.为可溶性蛋白,不存在信号肽,二级结构原件多为α-螺旋,含有多个保守功能域,主要在氨基酸合成中发挥作用。电子表达分析结果显示,该基因在甘蔗根尖、根颈、花序、叶片、全株、芽和茎中组成型表达,其中在花序和根中的表达量最高。荧光定量PCR结果分析表明:该基因在甘蔗各组织中均有表达,且在根中的表达量最高。此外,该基因的表达受水杨酸胁迫后表达量最高.约为对照组的43.16倍,其次为聚乙二醇和茉莉酸甲酯.分别为6.90倍和4.40倍.推测该基因的表达与甘蔗抗病虫和抗渗透胁迫有关。此结果为甘蔗ScTD基因的克隆和功能验证以及在甘蔗基因工程中的应用奠定基础。 展开更多
关键词 甘蔗 苏氨酸脱氨酶基因 电子克隆 生物信息学 表达分析
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生物催化“一锅法”制备2-氨基丁酸 被引量:6
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作者 苏金环 郭皓 +1 位作者 曾聪明 文军 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第9期921-924,936,共5页
以克隆表达的苏氨酸脱氨酶(L-TD)和亮氨酸脱氢酶(L-LeuDH)为催化剂,用"一锅法"将天然氨基酸转化为非天然氨基酸,最后结晶回收产物,总收率可达84%左右。所得产物经质谱和核磁共振波谱确证了结构,且HPLC检测其光学纯度>99.9... 以克隆表达的苏氨酸脱氨酶(L-TD)和亮氨酸脱氢酶(L-LeuDH)为催化剂,用"一锅法"将天然氨基酸转化为非天然氨基酸,最后结晶回收产物,总收率可达84%左右。所得产物经质谱和核磁共振波谱确证了结构,且HPLC检测其光学纯度>99.9%。该工艺使用的原料和酶价格低廉,又避免了中间的提取分离过程。 展开更多
关键词 2-基丁 “一锅法” 苏氨酸脱氨酶 脱氢酶 精细化工中间体
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