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碱性α-淀粉酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达及酶学性质研究被引量：6: 1; 作者金辉廖思明 +2 位作者王青艳刘筱梦黄日波《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期154-159,共6页; 将已克隆的碱性α-淀粉酶基因信号肽编码序列去除,用PCR的方法加入酶切位点,然后与表达载体pHIS1525连接转化大肠杆菌DH5α,筛选出阳性转化子DH5α-pHIS1525-JH,并提取质粒进一步转化巨大芽孢杆菌YYBm1原生质体,获得基因工程菌YYBm1-pHI... 展开更多; 关键词碱性α-淀粉酶巨大芽孢杆菌芽孢杆菌表达系统基因表达酶学性质; 在线阅读下载PDF 职称材料

大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体的构建及其在蛋白酶基因表达中的应用被引量：7: 2; 作者杨键游志庆 +3 位作者麦志茂李洁田新朋张偲《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期146-150,共5页; 利用基因重组技术,以枯草杆菌表达载体pWB980为骨架,插入大肠杆菌的克隆载体pUC18中的抗性基因和复制子,构建穿梭质粒pY980coli。将海洋细菌蛋白酶基因hspa插入pY980coli载体P43启动子下游,导入枯草杆菌WB600中,可实现活性表达。; 关键词穿梭载体 P43启动子枯草芽孢杆菌表达系统蛋白酶分泌表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶在枯草杆菌中的表达及酶学性质被引量：2: 3; 作者郑春阳刘珺 +1 位作者魏国祥王磊《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1333-1337,共5页; 首先根据Thermopolyspora flexuosa的内切-1,4-β-木聚糖酶基因设计了引物,PCR扩增成功后进行酶切消化,连接载体质粒pHT43,经大肠杆菌DH5α扩增后,挑选阳性克隆,经菌体PCR及测序验证后,将基因序列测序正确的质粒大量抽提,经过转化导入... 展开更多; 关键词枯草芽孢杆菌表达系统分泌表达耐高温嗜热内切-1 4-β-木聚糖酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

嗜热酸性普鲁兰水解酶Ⅲ的高效分泌表达及其酶学性质被引量：4: 4; 作者曾静郭建军袁林《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第3期98-103,109,共7页; 本文探索了嗜热酸性普鲁兰水解酶ⅢTk-PUL在枯草芽孢杆菌表达系统中的高效分泌表达条件,并对重组Tk-PUL的酶学性质进行了初步研究。通过构建Tk-PUL分泌表达信号肽筛选库,并结合高通量筛选方法,确定引导Tk-PUL在枯草芽孢杆菌中高效分泌... 展开更多; 关键词普鲁兰水解酶Ⅲ 双功能酶枯草芽孢杆菌表达系统分泌表达酶学性质; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名碱性α-淀粉酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达及酶学性质研究被引量：6: 1; 作者金辉廖思明王青艳刘筱梦黄日波; 机构广西大学生命与科学技术学院广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期154-159,共6页; 基金广西自然科学基金重点项目(2010GXNSFD013030) 广西科学院基金项目(09YJ17SW02); 文摘将已克隆的碱性α-淀粉酶基因信号肽编码序列去除,用PCR的方法加入酶切位点,然后与表达载体pHIS1525连接转化大肠杆菌DH5α,筛选出阳性转化子DH5α-pHIS1525-JH,并提取质粒进一步转化巨大芽孢杆菌YYBm1原生质体,获得基因工程菌YYBm1-pHIS1525-JH。SDS-PAGE分析表明该基因在巨大芽孢杆菌中得到了有效表达。酶学性质研究表明,该酶的最适温度与pH值分别为60℃与pH8.5,在pH7.0-10.5之间具有较好的稳定性,Km值为1.94 mg/mL,酶活力可达2 516.5 U。; 关键词碱性α-淀粉酶巨大芽孢杆菌芽孢杆菌表达系统基因表达酶学性质; Keywords Alkaline α-amylase Bacillus megaterium Bacillus expression system Gene expression Enzyme properties; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体的构建及其在蛋白酶基因表达中的应用被引量：7: 2; 作者杨键游志庆麦志茂李洁田新朋张偲; 机构中国科学院南海海洋研究所中国科学院海洋生物资源可持续利用重点实验室中国科学院研究生院; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期146-150,共5页; 基金国家“973”计划项目(2010CB833804) 国家“863”计划项目(2012AA092104) 海洋公益性行业科研专项(201305018); 文摘利用基因重组技术,以枯草杆菌表达载体pWB980为骨架,插入大肠杆菌的克隆载体pUC18中的抗性基因和复制子,构建穿梭质粒pY980coli。将海洋细菌蛋白酶基因hspa插入pY980coli载体P43启动子下游,导入枯草杆菌WB600中,可实现活性表达。; 关键词穿梭载体 P43启动子枯草芽孢杆菌表达系统蛋白酶分泌表达; Keywords Shuttle vector P43 promoter Bacillus subtilisexpression system Protease Secretory expression; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶在枯草杆菌中的表达及酶学性质被引量：2: 3; 作者郑春阳刘珺魏国祥王磊; 机构天津强微特生物科技有限公司; 出处《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1333-1337,共5页; 基金天津市滨海新区科技小巨人成长计划-科技型企业创新发展(科技创业)项目(2010-BK130070) 天津市科技型中小企业技术创新基金项目(11C26211203970) +1 种基金天津市科技计划项目(12ZCZDSY01800); 文摘首先根据Thermopolyspora flexuosa的内切-1,4-β-木聚糖酶基因设计了引物,PCR扩增成功后进行酶切消化,连接载体质粒pHT43,经大肠杆菌DH5α扩增后,挑选阳性克隆,经菌体PCR及测序验证后,将基因序列测序正确的质粒大量抽提,经过转化导入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilius WB800N宿主,培养并经过1 mmol/L IPTG诱导表达后,发酵胞外上清经SDS-PAGE电泳证明重组蛋白质成功获得表达。其相对分子质量为27 kD,最适反应温度为80℃,最适反应pH为6.0。由此得知,分泌表达的嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶的枯草芽孢杆菌工程菌株构建成功,这为未来该酶的产业化生产奠定了基础。; 关键词枯草芽孢杆菌表达系统分泌表达耐高温嗜热内切-1 4-β-木聚糖酶; Keywords Bacillus subtilis expression system, expression and secretion, thermophilic endo-1，4-β-xylanase; 分类号 Q936 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名嗜热酸性普鲁兰水解酶Ⅲ的高效分泌表达及其酶学性质被引量：4: 4; 作者曾静郭建军袁林; 机构江西省科学院微生物研究所; 出处《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第3期98-103,109,共7页; 基金国家自然科学基金青年科学基金项目(31501422) 江西省青年科学基金项目(20171BAB214003) 江西省科学院项目(2018-JCQN-02,2018-YCXY-02); 文摘本文探索了嗜热酸性普鲁兰水解酶ⅢTk-PUL在枯草芽孢杆菌表达系统中的高效分泌表达条件,并对重组Tk-PUL的酶学性质进行了初步研究。通过构建Tk-PUL分泌表达信号肽筛选库,并结合高通量筛选方法,确定引导Tk-PUL在枯草芽孢杆菌中高效分泌表达的信号肽。结果表明,在信号肽AmyE的引导下,重组Tk-PUL在枯草芽孢杆菌表达系统中高效分泌表达。Tk-PUL属于单结构域双功能酶,同时具有α-淀粉酶活性和普鲁兰酶活性。重组Tk-PUL的α-淀粉酶活性的最适反应pH为4.5,最适反应温度为100℃,对应的绝对酶活为54.08 U/mg,于100℃的半衰期约为2 h。重组Tk-PUL的普鲁兰酶活性的最适反应pH为4.5,最适反应温度为100℃,对应的绝对酶活为110.39 U/mg,于100℃的半衰期约为2 h。本研究为Tk-PUL在淀粉酶法制糖工业中的应用奠定了基础。; 关键词普鲁兰水解酶Ⅲ 双功能酶枯草芽孢杆菌表达系统分泌表达酶学性质; Keywords type Ⅲ pullulan hydrolase bifunctional enzyme Bacillus subtilis expression system secretory expression enzymatic properties; 分类号 TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	碱性α-淀粉酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达及酶学性质研究	金辉廖思明王青艳刘筱梦黄日波	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2011	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体的构建及其在蛋白酶基因表达中的应用	杨键游志庆麦志茂李洁田新朋张偲	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2013	7	在线阅读下载PDF 职称材料
3	嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶在枯草杆菌中的表达及酶学性质	郑春阳刘珺魏国祥王磊	《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	嗜热酸性普鲁兰水解酶Ⅲ的高效分泌表达及其酶学性质	曾静郭建军袁林	《食品工业科技》 CAS 北大核心	2020	4	在线阅读下载PDF 职称材料