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绿脓杆菌芳香硫酸酯酶序列与活性关系的初步表征被引量：1: 1; 作者李雨薇袁梅 +1 位作者杨晓兰廖飞《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期107-112,共6页; 目的:通过定点突变初步表征绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas Aeruginosa arylsulfatase,PAAS)序列-活性关系,识别通过迭代饱和突变提高突变体比活性的合适位点。方法:分析PAAS活性中心三维构象初步识别催化相关位点;定点突变获得突变... 展开更多; 关键词芳香硫酸酯酶定点突变表征; 在线阅读下载PDF 职称材料

芳香硫酸酯酶定点饱和突变方案的比较: 2; 作者李亚平种慧敏 +5 位作者袁梅周伟卢进鹏胡小蕾廖飞杨晓兰《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期459-464,共6页; 目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline ph... 展开更多; 关键词芳香硫酸酯酶定点饱和突变随机引物精确引物等量混合物单个精确引物; 在线阅读下载PDF 职称材料

尿芳香基硫酸酯酶活性检测对肺癌的诊断价值: 3; 作者包晓玲杨磊《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第22期2490-2491,共2页; 目的评价晨尿芳香基硫酸酯酶（arylsulphatase， ARS）活性检测在肺癌诊断中的应用价值。方法采用荧光测定法对98例肺癌患者、80例肺良性疾病及98例健康对照者的晨尿芳香基硫酸酯酶活性进行检测，并运用受试者工作特性（ROC）曲线评价... 展开更多; 关键词芳香基硫酸酯酶肺癌诊断受试者工作特性曲线; 在线阅读下载PDF 职称材料

Pseudoalteromonas carrageenovora芳香基硫酸酯酶突变文库热稳定性提高突变体的筛选及鉴定被引量：1: 4; 作者乔超超王新侠 +3 位作者李鹤宾倪辉肖安风朱艳冰《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第10期18-23,共6页; 利用易错聚合酶链式反应技术引入随机诱变,构建一个Pseudoalteromonas carrageenovora芳香基硫酸酯酶突变体库。经过筛选,获得一个芳香基硫酸酯酶热稳定性提高的突变株4-153。序列分析表明,该突变体有2个氨基酸替换,包括D84A和H260L。... 展开更多; 关键词芳香基硫酸酯酶易错聚合酶链式反应热稳定性提高突变体性质; 在线阅读下载PDF 职称材料

突变芳香基硫酸酯酶改性琼脂的工艺优化及其性能表征被引量：2: 5; 作者张成昊姜泽东 +3 位作者李鹤宾倪辉朱艳冰李清彪《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第5期39-44,共6页; 目的:明确食鹿角菜交替假单胞菌突变芳香基硫酸酯酶K253Q改性琼脂的制备工艺,表征酶法改性琼脂的性能特征。方法:以硫酸根脱除率为评价指标,考察反应时间、加酶量、温度、pH对突变芳香基硫酸酯酶K253Q处理琼脂的影响,并对理化性质和结... 展开更多; 关键词琼脂突变芳香基硫酸酯酶改性琼脂制备性能表征; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名绿脓杆菌芳香硫酸酯酶序列与活性关系的初步表征被引量：1: 1; 作者李雨薇袁梅杨晓兰廖飞; 机构重庆医科大学检验医学院; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期107-112,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号:31570862) 教育部博士点基金资助项目(编号:20125503110007); 文摘目的:通过定点突变初步表征绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas Aeruginosa arylsulfatase,PAAS)序列-活性关系,识别通过迭代饱和突变提高突变体比活性的合适位点。方法:分析PAAS活性中心三维构象初步识别催化相关位点;定点突变获得突变体,重组表达后Ni2+-NTA亲和纯化,表征其酶学性质。结果:与野生型相比,R55、M72、G138、D317、K375等位点用常见氨基酸替换/突变都显著降低其催化活性;R55、D317和K375等突变显著降低底物选择性和/或热稳定性,而M72和G138突变主要改变其催化活性。结论:M72和G138适合作为通过迭代饱和突变实施定向进化的候选位点。; 关键词芳香硫酸酯酶定点突变表征; Keywords arylsulfatase site-directed mutagenesis characterization; 分类号 Q556 [生物学—生物化学] R446.61 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名芳香硫酸酯酶定点饱和突变方案的比较: 2; 作者李亚平种慧敏袁梅周伟卢进鹏胡小蕾廖飞杨晓兰; 机构重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆理工大学药学与生物工程学院; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期459-464,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.31570862 No.81773625)~~; 文摘目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。; 关键词芳香硫酸酯酶定点饱和突变随机引物精确引物等量混合物单个精确引物; Keywords arylsulfatase site-directed saturation mutagenesis random primer equal-mole mixture of precise primer purified precise primer; 分类号 Q754 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名尿芳香基硫酸酯酶活性检测对肺癌的诊断价值: 3; 作者包晓玲杨磊; 机构甘肃省肿瘤医院肿瘤内科; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第22期2490-2491,共2页; 文摘目的评价晨尿芳香基硫酸酯酶（arylsulphatase， ARS）活性检测在肺癌诊断中的应用价值。方法采用荧光测定法对98例肺癌患者、80例肺良性疾病及98例健康对照者的晨尿芳香基硫酸酯酶活性进行检测，并运用受试者工作特性（ROC）曲线评价尿芳香基硫酸酯酶对肺癌的诊断效能。结果肺癌组的尿ARS活性为（0.359±0.111）U/L，明显高于肺良性疾病组的（0.214±0.082）U/L和健康对照组的（0.238±0.095）U/L，差异有统计学意义（P〈0.01）；而肺良性疾病组和健康对照组的ARS活性差异无统计学意义（P=0.385）。ROC曲线分析结果显示，曲线下面积AUC为0.805（P〈0.01, 95%CI： 0.743～0.867），最佳诊断界点值为0.295 U/L，此时尿ARS活性诊断肺癌的敏感度和特异度分别为81.1%和66.7%。结论尿ARS活性检测在肺癌诊断中具有很好的临床应用价值。; 关键词芳香基硫酸酯酶肺癌诊断受试者工作特性曲线; 分类号 R446.12 [医药卫生—诊断学] R734.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Pseudoalteromonas carrageenovora芳香基硫酸酯酶突变文库热稳定性提高突变体的筛选及鉴定被引量：1: 4; 作者乔超超王新侠李鹤宾倪辉肖安风朱艳冰; 机构集美大学食品与生物工程学院厦门医学院药学系; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第10期18-23,共6页; 基金国家自然科学基金青年科学基金项目(31401632) 福建省高校新世纪优秀人才支持计划项目(B15139); 文摘利用易错聚合酶链式反应技术引入随机诱变,构建一个Pseudoalteromonas carrageenovora芳香基硫酸酯酶突变体库。经过筛选,获得一个芳香基硫酸酯酶热稳定性提高的突变株4-153。序列分析表明,该突变体有2个氨基酸替换,包括D84A和H260L。以对硝基苯硫酸钾为底物,突变酶4-153(M4-153)的最适反应温度为55℃,在45、50、55、60℃处理30 min后,M4-153分别保留85%、83%、48%和13%的残留酶活力。野生型酶(WT)在45、50、55、60℃处理30 min后,分别保留79%、68%、21%和1%的残留酶活力。M4-153与WT相比具有更好的热稳定性。M4-153的最适反应pH值为8.0,在pH 5.0~9.0范围内保持稳定。EDTA对突变酶的抑制作用表明,金属离子在突变酶的催化过程中起重要作用。M4-153对一些洗涤剂,包括Triton X-100、Tween 20、Tween 80和Chaps,有好的耐受性。M4-153对龙须菜粗多糖硫酸基团的脱硫率为79.5%。; 关键词芳香基硫酸酯酶易错聚合酶链式反应热稳定性提高突变体性质; Keywords arylesterase error-prone PCR improved thermostability mutant property; 分类号 Q814.9 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名突变芳香基硫酸酯酶改性琼脂的工艺优化及其性能表征被引量：2: 5; 作者张成昊姜泽东李鹤宾倪辉朱艳冰李清彪; 机构集美大学食品与生物工程学院福建省食品微生物与酶工程重点实验室厦门市食品生物工程技术研究中心厦门市南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室厦门医学院; 出处《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第5期39-44,共6页; 基金国家自然科学基金(31401632)。; 文摘目的:明确食鹿角菜交替假单胞菌突变芳香基硫酸酯酶K253Q改性琼脂的制备工艺,表征酶法改性琼脂的性能特征。方法:以硫酸根脱除率为评价指标,考察反应时间、加酶量、温度、pH对突变芳香基硫酸酯酶K253Q处理琼脂的影响,并对理化性质和结构进行表征。结果:以4 g琼脂为原料,确定最佳工艺条件为:反应时间6 h,加酶量80 U,反应温度50℃,初始pH7.0。另外,以100 g琼脂为原料进行放大实验,在最佳工艺条件下,硫酸根脱除率达到50.1%。在此条件下,K253Q处理后琼脂的凝胶强度、3,6-内醚半乳糖含量、白度和透明度均有显著提高,而灰分和粘度值显著降低(P<0.05)。扫描电镜分析显示,K253Q处理琼脂的微观结构表面突起之间连接更加紧密,表面更光滑。结论:K253Q处理琼脂后提高了琼脂的品质,琼脂硫酸根含量降低,凝胶强度、3,6-内醚半乳糖含量、白度和透明度提高,灰分降低。; 关键词琼脂突变芳香基硫酸酯酶改性琼脂制备性能表征; Keywords agar mutant arylsulfatase modified agar preparation characterization; 分类号 TS201.1 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	绿脓杆菌芳香硫酸酯酶序列与活性关系的初步表征	李雨薇袁梅杨晓兰廖飞	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2018	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	芳香硫酸酯酶定点饱和突变方案的比较	李亚平种慧敏袁梅周伟卢进鹏胡小蕾廖飞杨晓兰	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2019	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	尿芳香基硫酸酯酶活性检测对肺癌的诊断价值	包晓玲杨磊	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	Pseudoalteromonas carrageenovora芳香基硫酸酯酶突变文库热稳定性提高突变体的筛选及鉴定	乔超超王新侠李鹤宾倪辉肖安风朱艳冰	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	突变芳香基硫酸酯酶改性琼脂的工艺优化及其性能表征	张成昊姜泽东李鹤宾倪辉朱艳冰李清彪	《食品工业科技》 CAS 北大核心	2021	2	在线阅读下载PDF 职称材料