根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立 被引量：33

1

作者 黄天带 李哲 +3 位作者 孙爱花 周权男 华玉伟 黄华孙 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1691-1697,共7页

为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系,以花药愈伤组织为受体,研究了农杆菌菌株、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响。结果表明,农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对转化效率具有显著影响,AS不... 为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系,以花药愈伤组织为受体,研究了农杆菌菌株、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响。结果表明,农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对转化效率具有显著影响,AS不影响转化效率。2.2万个花药愈伤组织经EHA105菌株侵染后,转入未添加AS的培养基,22℃共培养6d,通过50mgL-1卡那霉素抗性筛选、叶片GUS染色、uidA和NptII基因PCR特异扩增、PCR产物测序及NptII基因Southern检测,鉴定出11株转基因植株,并通过嫁接和次生体胚发生,获得来自8个转基因株系的681株转基因植株,移栽成活253株。 展开更多

关键词 橡胶树 根癌农杆菌 花药愈伤组织 遗传转化 次生体胚发生

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采用流式细胞仪鉴定紫花苜蓿花药愈伤组织的变异 被引量：16

2

作者 耿小丽 魏臻武 姚喜红 《草业学报》 CSCD 北大核心 2011年第3期156-161,共6页

本试验采用流式细胞仪,对3个基因型8个继代周期的苜蓿愈伤组织DNA含量进行测定。通过DPAC软件(data pool application of cytometre)分析出细胞DNA含量变异百分率和处于S期细胞的百分率,并采用SPSS 10.0软件分析出愈伤组织继代时间与DN... 本试验采用流式细胞仪,对3个基因型8个继代周期的苜蓿愈伤组织DNA含量进行测定。通过DPAC软件(data pool application of cytometre)分析出细胞DNA含量变异百分率和处于S期细胞的百分率,并采用SPSS 10.0软件分析出愈伤组织继代时间与DNA含量变异率之间的关系。结果表明,本试验所采用的3个基因型8个继代周期24个紫花苜蓿愈伤组织样本DNA含量均发生了变化,且全都出现了DNA加倍的现象。在24个样本中,DNA含量变异率最大的是自选系大叶0510的愈伤组织继代15周时的样本,变异率达到了19.45%。通过SPSS10.0软件分析,表明紫花苜蓿愈伤组织DNA含量变异细胞百分率与继代时间存在相关性,随着继代时间的延长,染色体变异率有增加的趋势,但这种趋势不是无限增大的。继代0～12周是愈伤组织DNA含量变异的集中发生期,以后随着继代次数的增加,DNA含量变异率趋向于稳定。 展开更多

关键词 苜蓿 花药愈伤组织 流式细胞仪 DNA含量变异 遗传变异

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消毒方法对草莓花药愈伤组织形成的影响 被引量：8

3

作者 乔奇 张振臣 +2 位作者 靳秀兰 刘顺卿 王健 《河南农业科学》 CSCD 1999年第7期29-29,共1页

花药培养是培育脱毒草莓的重要途径，而表面消毒又是花药培养的重要环节，为了选择合适的表面消毒方法，我们进行了该项试验。１材料和方法供试草莓品种为“日本一号”，于河南省农科院植保所温室中种植。１９９８年１０月至１９９９年... 花药培养是培育脱毒草莓的重要途径，而表面消毒又是花药培养的重要环节，为了选择合适的表面消毒方法，我们进行了该项试验。１材料和方法供试草莓品种为“日本一号”，于河南省农科院植保所温室中种植。１９９８年１０月至１９９９年１月采集直径为０．４～０．６ｃｍ的... 展开更多

关键词 草莓 花药愈伤组织 消毒方法 花药培养

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AgNO_3对橡胶树花药愈伤组织形态及体胚发生的影响 被引量：5

4

作者 戴雪梅 黄天带 +3 位作者 李季 杨先锋 辛士超 黄华孙 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1426-1431,共6页

橡胶树的花药愈伤组织在长期继代过程中,胚性易下降甚至丧失;而AgNO_3作为乙烯活性抑制剂,被广泛应用于植物组织培养中。该研究以继代培养4 a以上的热研7-33-97花药愈伤组织为材料,在继代培养基中添加2.5 mg·L^(-1)AgNO_3预培养35 ... 橡胶树的花药愈伤组织在长期继代过程中,胚性易下降甚至丧失;而AgNO_3作为乙烯活性抑制剂,被广泛应用于植物组织培养中。该研究以继代培养4 a以上的热研7-33-97花药愈伤组织为材料,在继代培养基中添加2.5 mg·L^(-1)AgNO_3预培养35 d后,观察预培养前后愈伤组织表形及其细胞形态的变化,并设计不同浓度AgNO_3及不同处理时间对其进行体胚诱导,90 d后分别统计胚状体总数和正常胚数。结果表明:浅黄色质地柔软的愈伤组织在含AgNO_3的培养基上预培养后能转变成鲜黄色易碎愈伤组织,在倒置显微镜下前者大多表现为不规则多边形,细胞内含物较稀薄;而后者则呈圆形或椭圆形,细胞内含物丰富,属于典型的胚性细胞。在体胚诱导的第1个月添加5 mg·L^(-1)AgNO_3能显著促进体胚的发生,AgNO_3浓度升至10 mg·L^(-1)时体胚发生受到抑制,且畸形胚的形成率显著增加;在含5 mg·L^(-1)AgNO_3的培养基中培养2个月以上,体胚发育明显受阻,大部分形成畸形胚。该研究结果在一定程度上恢复了橡胶树长期继代花药愈伤组织的胚性能力,并提高了其体胚发生频率,为橡胶树花药胚性愈伤组织长期继代培养过程中胚性的保持提供了参考。 展开更多

关键词 橡胶树 花药愈伤组织 AGNO3 细胞形态 体胚发生

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百日草根尖和花药愈伤组织染色体制片技术 被引量：6

5

作者 叶要妹 陈天花 +1 位作者 齐迎春 杨涛 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期673-675,740,共4页

以种子萌发根尖和花药愈伤组织为材料,研究了取样时间、预处理方法对百日草染色体制片的影响。结果表明:根尖上午8:00～9:00,花药愈伤继代3～5d上午9:00～10:00为最佳取样预处理时间;采用三种药剂预处理活体根尖,以4℃下饱和对二氯苯溶... 以种子萌发根尖和花药愈伤组织为材料,研究了取样时间、预处理方法对百日草染色体制片的影响。结果表明:根尖上午8:00～9:00,花药愈伤继代3～5d上午9:00～10:00为最佳取样预处理时间;采用三种药剂预处理活体根尖,以4℃下饱和对二氯苯溶液或0.002mol/L的8-羟基喹啉液预处理8h效果最佳,花药愈伤则以饱和对二氯苯溶液预处理6h效果最佳。本实验的预处理温度是固定的,可克服预处理随季节和时间温度的变化而带来的不稳定性,且百日草花药愈伤染色体观察为首次报道。 展开更多

关键词 百日草 根尖 花药愈伤组织 预处理 染色体制片

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光皮树花药愈伤组织原生质体分离的研究 被引量：5

6

作者 李昌珠 王丽华 +3 位作者 陈建华 蒋丽娟 李培旺 张良波 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期135-139,共5页

为获得高质量的原生质体,给光皮树转化系统的建立奠定基础,以光皮树花药愈伤组织为材料,研究了愈伤组织结构、酶液组合、酶解时间及渗透压对原生质体分离效果及活力的影响,从而确定适合光皮树花药愈伤组织原生质体最佳分离条件。结果表... 为获得高质量的原生质体,给光皮树转化系统的建立奠定基础,以光皮树花药愈伤组织为材料,研究了愈伤组织结构、酶液组合、酶解时间及渗透压对原生质体分离效果及活力的影响,从而确定适合光皮树花药愈伤组织原生质体最佳分离条件。结果表明:淡黄绿色、疏松的愈伤组织在CPW+2%纤维素酶R-10+0.3%蜗牛酶+0.25%果胶酶Y-23+13%甘露醇+0.6/L MES的酶解液中,黑暗条件下振荡酶解10 h,原生质体产量达到3.19×106个/g,具活力的原生质体为73.48%。 展开更多

关键词 光皮树 花药愈伤组织 原生质体 分离条件

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油茶12个物种花药愈伤组织诱导及继代培养 被引量：28

7

作者 丁植磊 张日清 +1 位作者 刘友全 闻丽 《经济林研究》 2007年第1期20-24,共5页

选择12个油茶物种进行花药愈伤组织的诱导,以小果油茶、普通油茶、短柱油茶、浙江红花油茶、茶陵红花油茶、多齿红花油茶诱导率较高,在40％～70％之间,其中小果油茶、普通油茶的愈伤组织诱导率高达70％。红皮糙果油茶、广西糙果油茶、... 选择12个油茶物种进行花药愈伤组织的诱导,以小果油茶、普通油茶、短柱油茶、浙江红花油茶、茶陵红花油茶、多齿红花油茶诱导率较高,在40％～70％之间,其中小果油茶、普通油茶的愈伤组织诱导率高达70％。红皮糙果油茶、广西糙果油茶、茶陵红花油茶、多齿红花油茶、攸县油茶花药褐化较严重。继代培养中6-BA和KT均有较好的促进作用,小果油茶、普通油茶、短柱油茶、浙江红花油茶、茶陵红花油茶、多齿红花油茶的愈伤组织均增殖较好。油茶花药培养应以小果油茶、普通油茶、短柱油茶、浙江红花油茶、茶陵红花油茶、多齿红花油茶作为进一步试验的基本材料,开展下一步的愈伤组织增殖和脱分化试验。 展开更多

关键词 油茶物种 花药愈伤组织诱导 激素配比 增殖反应

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铜元素对水稻花药愈伤组织绿苗分化率的影响 被引量：2

8

作者 罗天宽 张小玲 +3 位作者 李道品 汤佰龙 胡彩英 鲍素芬 《江苏农业学报》 CSCD 2002年第4期249-250,共2页

关键词 铜元素 水稻 花药愈伤组织 绿苗分化率

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冬小麦花药愈伤组织无性系R_2的变异 被引量：2

9

作者 王培 陈玉蓉 +1 位作者 王峰 何萍 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1993年第S1期48-53,共6页

从一株冬小麦H_1花粉试管苗基部,取未分化绿苗的胚性愈伤组织建立细胞无性系,从中获得4丛R_1结实株系,对其R_2进行田间观察,发现其中一株发生了变异,R_2的株系变异率为25.00%.该变异株系R_2的86个单株的变异情况统计结果显示,在3个主要... 从一株冬小麦H_1花粉试管苗基部,取未分化绿苗的胚性愈伤组织建立细胞无性系,从中获得4丛R_1结实株系,对其R_2进行田间观察,发现其中一株发生了变异,R_2的株系变异率为25.00%.该变异株系R_2的86个单株的变异情况统计结果显示,在3个主要农艺性状中,株高变异率最高,为67.44%,其次是千粒重,为50.00%,单株穗数居第三位,为47.67%.其它性状如种子蛋白质含量,粒色,粒形,穗形均发生变异,且幅度大,频率高,不仅株系内存在变异,穗系内也存在变异.在调查的性状中只有芒性未发生变异. 展开更多

关键词 冬小麦 花药愈伤组织 无性系变异

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不同培养基条件对红景天花药愈伤组织生长量的影响 被引量：2

10

作者 盖玉红 魏健 《黑龙江农业科学》 2015年第4期10-12,37,共4页

为进一步开发利用红景天资源,以红景天花药诱导的愈伤组织为材料,研究了不同培养基、不同种类和浓度的生长素和细胞分裂素对花药愈伤组织生长量的影响。结果表明:培养基MS和NB对花药愈伤组织生长量的影响无显著差异;低浓度的生长素对红... 为进一步开发利用红景天资源,以红景天花药诱导的愈伤组织为材料,研究了不同培养基、不同种类和浓度的生长素和细胞分裂素对花药愈伤组织生长量的影响。结果表明:培养基MS和NB对花药愈伤组织生长量的影响无显著差异;低浓度的生长素对红景天花药愈伤组织生长量有利,2,4-D对愈伤组织生长的影响略高于NAA。高浓度的6-BA利于在景天花药愈伤组织生长,在含有相同浓度NAA的培养基中,6-BA比KT适合花药愈伤组织生长。 展开更多

关键词 红景天花药愈伤组织 生长量 培养基 生长素 细胞分裂素

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控制花药愈伤组织诱导及再生的小麦基因

11

作者 李银心 《生物技术通报》 CAS CSCD 1989年第2期18-18,共1页

巴黎大学和加拿大植物生物技术研究所的研究表明,在谷类植物中,控制花药培养物再生的基因与控制体细胞或组织培养物再生的基因是不同的(Agricell Report 8∶42,1987)10∶13,1988)。匈牙利科学院及作物研究所的 E.Szakács 及共同事... 巴黎大学和加拿大植物生物技术研究所的研究表明,在谷类植物中,控制花药培养物再生的基因与控制体细胞或组织培养物再生的基因是不同的(Agricell Report 8∶42,1987)10∶13,1988)。匈牙利科学院及作物研究所的 E.Szakács 及共同事发现:在小麦中,愈伤组织诱导,总的植物再生(绿色及白化植株)和绿色植物再生分别受不同的遗传控制并且能够各自独立地遗传(Plant Cell Rep.7∶127,1988)。通过对“Chinese Spring”/“Cheyenne”进行染色体替代系的遗传分析,Szakács研究小组断定7A 和1B 染色体对愈伤组织诱导起着相当大的作用,3A 展开更多

关键词 花药愈伤组织 染色体替代 遗传分析 花药培养 愈伤组织诱导 作物研究所 匈牙利科学院 巴黎大学 植物生物技术 培养物

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脱水时间对超低温保存橡胶树花药愈伤组织生理指标的影响

12

作者 周权男 吉辛 +4 位作者 吴胤乐 李季 杨先锋 吴日智 黄天带 《热带作物学报》 2025年第9期2127-2134,共8页

超低温保存可降低橡胶树花药愈伤组织长期继代发生的遗传变异风险,是长期保存愈伤组织的有效方法。为评价脱水时间对超低温保存过程中橡胶树花药愈伤组织与抗性相关生理指标的影响,本研究将花药愈伤组织于植物玻璃化溶液(plant vitrific... 超低温保存可降低橡胶树花药愈伤组织长期继代发生的遗传变异风险,是长期保存愈伤组织的有效方法。为评价脱水时间对超低温保存过程中橡胶树花药愈伤组织与抗性相关生理指标的影响,本研究将花药愈伤组织于植物玻璃化溶液(plant vitrification solution,PVS)PVS2中分别脱水0、10、20、40 min后进行超低温保存24 h,分析脱水时间对超低温保存前后愈伤组织中可溶性蛋白、丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性等生理指标的影响。结果显示:脱水时间对超低温保存后花药愈伤组织中可溶性蛋白、MDA含量、SOD和POD活性具有显著影响(P<0.05),而对CAT活性无显著影响。除MDA外,超低温保存后每个脱水时间的各生理指标值均高于保存前。脱水40 min的花药愈伤组织超低温保存后,其可溶性蛋白含量、CAT、SOD和POD活性均达最大值,分别为129.63μg/mL、627.30 U/g、290.38 U/g、25643.33 U/g,MDA含量最低,为41.31 nmol/g,表明脱水40 min可明显增强超低温保存后愈伤组织细胞的持水能力和抗氧化水平。进一步对脱水40 min后超低温保存的花药愈伤组织进行复苏,平均存活率在70%以上,且能诱导易碎胚性愈伤系的形成,平均诱导率为13.33%,为橡胶树花药愈伤组织超低温保存再生奠定生理基础。 展开更多

关键词 橡胶树 花药愈伤组织 超低温保存 脱水时间 生理指标 存活率

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菊芋简化培养基培养梨花药试验初报

13

作者 顾迺良 杨学 赵惠祥 《天津农学院学报》 CAS 1995年第1期39-42,共4页

随着组织培养和细胞培养工作的进展,现已逐渐转向生产应用,因此对培养基的研究就越来越显得重要了.由于生产上用大罐深层培养组织或细胞,生产药物或生物制品,以及培养花粉植株和苗木工厂化生产,使用培养基的量将不是以升计量而是以吨计... 随着组织培养和细胞培养工作的进展,现已逐渐转向生产应用,因此对培养基的研究就越来越显得重要了.由于生产上用大罐深层培养组织或细胞,生产药物或生物制品,以及培养花粉植株和苗木工厂化生产,使用培养基的量将不是以升计量而是以吨计量,这样如何使培养基简化、易被制作、降低成本就成为产业化生产的先决条件,我国已成功地利用土豆作代用品制作培养基在作物花培上应用,为此我们从长远观点出发,为适应未来的需要,找出更多的物质来做代用品,本文利用菊芋块茎制作培养基来诱导梨花药愈伤组织与1/2MS和N₆去分化培养基做了比较试验,现将试验结果报如下: 展开更多

关键词 简化培养基 花药愈伤组织 诱导率 菊芋 细胞分裂 组织培养 低温处理 细胞培养 自溶产物 分化培养基

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日本培育出早熟草莓

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作者 孙国凤 《生物技术通报》 CAS CSCD 1991年第11期13-14,共2页

茨城县园艺试验场小组利用草莓的愈伤组织培养培育出早熟变异系统.将进行扩大规模的栽培试验,确定其有用性. 园艺试验场资源开发部小组从草莓的代表品种“女峰”的4～6毫米大小的花蕾中取出花药,进行培养,经愈伤组织到不定胚最后形成植... 茨城县园艺试验场小组利用草莓的愈伤组织培养培育出早熟变异系统.将进行扩大规模的栽培试验,确定其有用性. 园艺试验场资源开发部小组从草莓的代表品种“女峰”的4～6毫米大小的花蕾中取出花药,进行培养,经愈伤组织到不定胚最后形成植株.将获得的花药愈伤组织的草莓27株移植到田间,从各系统采集10株子代,以无病毒化的“女峰”为对照进行促成栽培试验. 展开更多

关键词 花药愈伤组织 不定胚 促成栽培 开发部 栽培期 草毒 农业试验场

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