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题名重组花生过敏原Ara h2的生物合成
被引量：5
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作者
胡纯秋
高金燕
罗春萍
陈红兵
朱盼
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机构
南昌大学食品科学与技术国家重点实验室
南昌大学中德联合研究院
南昌大学生命科学与食品工程学院
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出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010年第15期203-207,共5页
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基金
南昌大学食品科学与技术国家重点实验室目标导向项目(SKLF-MB-200807)
江西省主要学科学术和技术带头人培养项目([2004]234号)
教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-08-07-04)
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文摘
为获得重组花生过敏原Ara h2。通过RT-PCR合成cDNA,并以此为模板进行PCR扩增目的基因Ara h2,扩增产物经纯化后克隆至pMD19-TSimple载体中,构建重组质粒pMD19-T-Ara h2。上述重组质粒经酶切纯化后定向克隆到pGEX-4T-1表达载体中,构建原核表达载体pGEX-4T-1-Ara h2,并转化表达宿主菌BL21-codonPlus(DE3)-RIPL中,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳结果表明,该表达蛋白大小约为46kD,与理论值相符。通过Glutathione Sepharose 4B凝胶亲和层析方法纯化融合蛋白GST-Ara h2,获得融合蛋白纯度约为90%。Western blotting分析表明,经纯化的融合蛋白能与抗Ara h2兔血清发生特异性反应,说明该蛋白具有良好的免疫原性。
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关键词
食物过敏
花生过敏原ara
H2
生物合成
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Keywords
food allergy
peanut allergen ara h 2
biosynthesis
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分类号
Q786
[生物学—分子生物学]
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