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艾地骨化醇通过抑制CYR61的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖和转移
被引量：
1
1
作者
王海鹏
陈明
+3 位作者
黄韬
杨彤涛
廖博
韩先伟
《山西医科大学学报》
CAS
2023年第1期38-47,共10页
目的探讨艾地骨化醇(eldecalcitol,ED-71)对骨肉瘤细胞增殖、转移和富含半胱氨酸蛋白61(CYR61)表达的影响。方法首先,使用Lipofectamine 2000将CYR61过表达重组pcDNA3.1质粒(pcDNA3.1-CYR61组)及阴性对照pcDNA3.1质粒(pcDNA3.1-NC组)转...
目的探讨艾地骨化醇(eldecalcitol,ED-71)对骨肉瘤细胞增殖、转移和富含半胱氨酸蛋白61(CYR61)表达的影响。方法首先,使用Lipofectamine 2000将CYR61过表达重组pcDNA3.1质粒(pcDNA3.1-CYR61组)及阴性对照pcDNA3.1质粒(pcDNA3.1-NC组)转染到人骨肉瘤细胞系(U2OS)中,通过RT-PCR和Western blot验证转染效率。然后,将U2OS细胞分为对照组、ED-71组、ED-71+pcDNA3.1-NC组和ED-71+pcDNA3.1-CYR61组,对照组和ED-71组细胞未进行转染,ED-71+pcDNA3.1-NC组细胞转染pcDNA3.1-NC,ED-71+pcDNA3.1-CYR61组细胞转染pcDNA3.1-CYR61。转染后,对照组细胞不做药物处理,其余3组细胞用含有5 nmol/L艾地骨化醇的1640培养基培养24 h。CCK-8法和集落形成实验测定U2OS细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,RT-PCR检测细胞中CYR61 mRNA水平,Western blot检测细胞中CYR61、Bax、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、Fibronectin、E-cadherin和N-cadherin的蛋白表达水平。结果与pc-DNA3.1-NC组比较,pcDNA3.1-CYR61组细胞中CYR61的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.001)。与对照组比较,ED-71组中CYR61的mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.001),OD_(450 nm)值降低(P<0.001),集落数量降低(P<0.001),细胞凋亡率升高(P<0.001),Bax蛋白表达水平升高(P<0.001),Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.001),迁移和侵袭细胞数降低(P<0.001),MMP-2、MMP-9和Fibronectin蛋白表达水平降低(P<0.001),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.001),N-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.001)。与ED-71+pcDNA3.1-NC组比较,ED-71+pcDNA3.1-CYR61组U2OS细胞中CYR61的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.001),集落数量升高(P<0.001),OD_(450 nm)值升高(P<0.001),细胞凋亡率降低(P<0.001),Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.001),迁移和侵袭细胞数升高(P<0.001),MMP-2、MMP-9和Fibronectin蛋白相对表达水平升高(P<0.001),E-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.001),N-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.001)。结论艾地骨化醇通过抑制CYR61的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖和转移能力。
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关键词
艾地骨化醇
骨肉瘤
富含半胱氨酸蛋白61
肿瘤侵袭
细胞增殖
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职称材料
题名
艾地骨化醇通过抑制CYR61的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖和转移
被引量：
1
1
作者
王海鹏
陈明
黄韬
杨彤涛
廖博
韩先伟
机构
空军军医大学第二附属医院
出处
《山西医科大学学报》
CAS
2023年第1期38-47,共10页
基金
国家自然科学基金资助项目(82174266)。
文摘
目的探讨艾地骨化醇(eldecalcitol,ED-71)对骨肉瘤细胞增殖、转移和富含半胱氨酸蛋白61(CYR61)表达的影响。方法首先,使用Lipofectamine 2000将CYR61过表达重组pcDNA3.1质粒(pcDNA3.1-CYR61组)及阴性对照pcDNA3.1质粒(pcDNA3.1-NC组)转染到人骨肉瘤细胞系(U2OS)中,通过RT-PCR和Western blot验证转染效率。然后,将U2OS细胞分为对照组、ED-71组、ED-71+pcDNA3.1-NC组和ED-71+pcDNA3.1-CYR61组,对照组和ED-71组细胞未进行转染,ED-71+pcDNA3.1-NC组细胞转染pcDNA3.1-NC,ED-71+pcDNA3.1-CYR61组细胞转染pcDNA3.1-CYR61。转染后,对照组细胞不做药物处理,其余3组细胞用含有5 nmol/L艾地骨化醇的1640培养基培养24 h。CCK-8法和集落形成实验测定U2OS细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,RT-PCR检测细胞中CYR61 mRNA水平,Western blot检测细胞中CYR61、Bax、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、Fibronectin、E-cadherin和N-cadherin的蛋白表达水平。结果与pc-DNA3.1-NC组比较,pcDNA3.1-CYR61组细胞中CYR61的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.001)。与对照组比较,ED-71组中CYR61的mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.001),OD_(450 nm)值降低(P<0.001),集落数量降低(P<0.001),细胞凋亡率升高(P<0.001),Bax蛋白表达水平升高(P<0.001),Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.001),迁移和侵袭细胞数降低(P<0.001),MMP-2、MMP-9和Fibronectin蛋白表达水平降低(P<0.001),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.001),N-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.001)。与ED-71+pcDNA3.1-NC组比较,ED-71+pcDNA3.1-CYR61组U2OS细胞中CYR61的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.001),集落数量升高(P<0.001),OD_(450 nm)值升高(P<0.001),细胞凋亡率降低(P<0.001),Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.001),迁移和侵袭细胞数升高(P<0.001),MMP-2、MMP-9和Fibronectin蛋白相对表达水平升高(P<0.001),E-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.001),N-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.001)。结论艾地骨化醇通过抑制CYR61的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖和转移能力。
关键词
艾地骨化醇
骨肉瘤
富含半胱氨酸蛋白61
肿瘤侵袭
细胞增殖
Keywords
eldecalcitol
osteosarcoma
cysteine-rich protein 61
tumor invasion
cell proliferation
分类号
R738 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
艾地骨化醇通过抑制CYR61的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖和转移
王海鹏
陈明
黄韬
杨彤涛
廖博
韩先伟
《山西医科大学学报》
CAS
2023
1
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