-
题名RNAi法分析香菇色氨酸合酶基因的功能
被引量：3
- 1
-
-
作者
王晨
罗义
王刚正
徐瑞平
周雁
龚钰华
边银丙
-
机构
华中农业大学应用真菌研究所
-
出处
《食用菌学报》
CSCD
北大核心
2019年第4期1-8,共8页
-
基金
国家自然科学基金(34116162)
湖北省技术创新专项重大项目(2016ABA100)
-
文摘
色氨酸合酶(tryptophan synthase,TrpB)是生物体内一种重要的功能蛋白,在生物抗逆应激反应过程中发挥着重要的调控作用。本研究以香菇(Lentinula edodes)耐热栽培菌株S606为实验材料,采用双向启动子(Leactin和Legpd)启动LetrpB蛋白β亚基功能结构域的反向互补片段(400 bp),构建了LetrpB基因的RNAi载体,利用农杆菌介导法将该载体转入香菇菌丝中,在潮霉素培养基上筛选转化子,再通过PCR检测片段是否插入,获得了稳定的阳性转化子。实时荧光定量PCR结果显示,与野生型菌株相比,转化子的LetrpB基因表达量显著下调,转化子LeALDH、LeamiE等基因的表达量也显著下调,而LeYuccA的表达量显著上调。40℃高温处理24 h后,野生型S606的菌丝体在25℃条件下可以恢复生长,而RNAi转化子的菌丝体则不能恢复生长。研究结果表明,香菇菌株S606的LetrpB基因参与了热胁迫应激反应。
-
关键词
香菇
色氨酸合酶
RNAI
耐热性
-
Keywords
Lentinula edodes
tryptophan synthase
RNA interference
thermotolerance
-
分类号
S64
[农业科学—蔬菜学]
-
