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鱼致病性舒伯特气单胞菌双重PCR检测方法的建立 被引量：8
1
作者 刘春 李凯彬 +4 位作者 王庆 王芳 曾伟伟 石存斌 吴淑勤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期54-57,共4页
为快速准确鉴别检测鳢源致病性舒伯特气单胞菌(A.schubertii),本实验根据该菌的促旋酶B亚单位基因(gyrB)、溶血素基因(hlyA)的保守序列设计引物,建立了检测致病性A.schubertii的双重PCR方法。结果显示gyrB和hlyA基因扩增产物分别为601 b... 为快速准确鉴别检测鳢源致病性舒伯特气单胞菌(A.schubertii),本实验根据该菌的促旋酶B亚单位基因(gyrB)、溶血素基因(hlyA)的保守序列设计引物,建立了检测致病性A.schubertii的双重PCR方法。结果显示gyrB和hlyA基因扩增产物分别为601 bp和375 bp;其最低检出菌体DNA量为2.3×10-2ng,最低检出菌数为3×102cfu。特异性试验结果显示,该方法对温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、无乳链球菌、诺卡氏菌、迟缓爱德华氏菌、荧光假单胞菌、柱状黄杆菌、哈氏弧菌以及类志贺邻单胞菌扩增结果均为阴性。应用该方法对37份临床病料样品的检测结果与传统细菌分离鉴定结果的符合率为100%,表明该方法具有良好的特异性和敏感性,可以应用于A.schubertii的快速检测和流行病学研究。 展开更多
关键词 舒伯特气单胞菌 gyrB基因 hlyA基因 双重PCR
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舒伯特气单胞菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量：4
2
作者 刘礼辉 胡蕾 +6 位作者 杨圆圆 方伟 林强 付小哲 梁红茹 赵永亮 李宁求 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2019年第8期17-24,共8页
【目的】建立一种快速、灵敏的舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii)检测方法。【方法】以舒伯特气单胞菌rpoD(RNA polymerase sigma-70 factor)为靶标基因,设计特异性引物及TaqMan探针,建立舒伯特气单胞菌的TagMan实时荧光定量PCR检... 【目的】建立一种快速、灵敏的舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii)检测方法。【方法】以舒伯特气单胞菌rpoD(RNA polymerase sigma-70 factor)为靶标基因,设计特异性引物及TaqMan探针,建立舒伯特气单胞菌的TagMan实时荧光定量PCR检测方法,同时验证该方法的特异性、灵敏度、重复性,并用该方法对50份临床样品进行检测,验证其应用效果。【结果】含舒伯特气单胞菌rpoD基因的质粒拷贝数与循环阈值(Ct)的标准曲线相关系数为1.000,扩增效率为94.705%。实时荧光定量PCR检测方法只对舒伯特气单胞菌的靶基因检测结果呈阳性,对嗜水气单胞菌(Aeromanas hydrophila)、维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)、诺卡氏菌(Nocardia seriolae)等其他14种致病菌的检测结果均为阴性,具有高度特异性;对舒伯特气单胞菌重组质粒和纯培养细菌的检出灵敏度分别为4.76拷贝/μL和15 CFU/mL;批内和批间重复性试验变异系数分别为0.95%和1.05%。50份临床样品检测结果显示,该方法阳性样品检出率为22%,高于传统细菌分离方法(10%)的检出率。【结论】建立的舒伯特气单胞菌实时荧光定量PCR检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,适用于舒伯特气单胞菌的快速诊断检测和流行病学调查。 展开更多
关键词 舒伯特气单胞菌 rpoD基因 实时荧光定量PCR
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舒伯特气单胞菌研究进展 被引量：5
3
作者 刘春 曹际振 +4 位作者 张德锋 王庆 石存斌 常藕琴 林蠡 《动物医学进展》 北大核心 2021年第4期95-99,共5页
舒伯特气单胞菌(Aeromonas schubertii)已逐渐成为重要的人、兽、鱼共患致病菌。近年来,舒伯特气单胞菌感染引起的内脏类结节病在养殖鳢科鱼类中较为流行,严重危害鳢养殖业的健康发展,也对畜牧养殖业和人类健康造成潜在的威胁。论文对... 舒伯特气单胞菌(Aeromonas schubertii)已逐渐成为重要的人、兽、鱼共患致病菌。近年来,舒伯特气单胞菌感染引起的内脏类结节病在养殖鳢科鱼类中较为流行,严重危害鳢养殖业的健康发展,也对畜牧养殖业和人类健康造成潜在的威胁。论文对舒伯特气单胞菌的分类学地位、生物学特性、致病性及检测技术等进行综述,为舒伯特气单胞菌病的有效防控提供参考。 展开更多
关键词 舒伯特气单胞菌 临床特征 毒力因子 诊断方法
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杂交鳢舒伯特气单胞菌弱毒疫苗候选株筛选及其免疫效果评价 被引量：2
4
作者 胡蕾 刘礼辉 +6 位作者 杨圆圆 方伟 林强 付小哲 梁红茹 刘山桂 李宁求 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第5期74-79,共6页
为获得一种安全、高效的舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii)弱毒疫苗候选株,通过鱼体攻毒实验筛选天然弱毒株,用筛选的弱毒株制备弱毒疫苗,对杂交鳢进行免疫后,采用荧光定量RT-PCR方法评价免疫相关基因表达情况,同时采用强毒株攻毒... 为获得一种安全、高效的舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii)弱毒疫苗候选株,通过鱼体攻毒实验筛选天然弱毒株,用筛选的弱毒株制备弱毒疫苗,对杂交鳢进行免疫后,采用荧光定量RT-PCR方法评价免疫相关基因表达情况,同时采用强毒株攻毒免疫的杂交鳢测定相对免疫保护率(relative percentage survival,RPS),综合评价弱毒株作为活疫苗侯选株的潜力。结果显示:筛选到一株舒伯特气单胞菌天然弱毒株OM170701,其对靶动物杂交鳢与非靶动物大口黑鲈均无明显致病性;该弱毒疫苗候选株能诱导杂交鳢肝脏中IL-8、IL-1β、补体C3表达量上调,免疫后72 h相对表达量达到最高,分别是对照组的相对表达量的4.95倍、5.57倍、3.94倍;免疫组IgM的相对表达量显著高于对照组,其中第28天时免疫组IgM相对表达量是对照组的17.26倍;攻毒后免疫组成活率显著高于对照组,其RPS为65%。结果表明,该弱毒株通过注射免疫能引发杂交鳢非特异性和特异性免疫应答,并提供良好的免疫保护。 展开更多
关键词 杂交鳢 舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii) 弱毒疫苗 免疫基因 相对免疫保护率
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60种中草药对舒伯特气单胞菌的体外抑菌作用 被引量：4
5
作者 周梦 余米 +2 位作者 张承露 封孝兰 郑永华 《贵州农业科学》 CAS 2021年第2期85-91,共7页
【目的】选取60种中草药,研究其对杂交鳢源舒伯特气单胞菌的体外抑菌作用,为防治杂交鳢源舒伯特气单胞菌诱发的疾病提供科学依据。【方法】通过水提法获得60种中草药提取液,采用琼脂扩散法对杂交鳢源舒伯特气单胞菌进行体外抑菌试验,采... 【目的】选取60种中草药,研究其对杂交鳢源舒伯特气单胞菌的体外抑菌作用,为防治杂交鳢源舒伯特气单胞菌诱发的疾病提供科学依据。【方法】通过水提法获得60种中草药提取液,采用琼脂扩散法对杂交鳢源舒伯特气单胞菌进行体外抑菌试验,采用二倍稀释法测定筛选出的抑菌作用较好的中草药水提物对杂交鳢源舒伯特气单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。【结果】五倍子、大黄、黄柏、黄连、地榆、丁香、木瓜、诃子、五味子、儿茶、乌梅对舒伯特气单胞菌极度敏感,有较好的抑菌效果,其中乌梅的体外抑菌效果最佳,抑菌圈直径为(28.62±0.66)mm。【结论】抑菌杀菌效果最好的是五倍子,其最小抑菌质量浓度和最小杀菌质量浓度均为1.95 mg/mL,其次是诃子、乌梅、地榆、黄连、儿茶和丁香,再次是木瓜和五味子;大黄和黄柏较差。 展开更多
关键词 舒伯特气单胞菌 杂交鳢 中草药 抑菌效果
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五种消毒剂对舒伯特气单胞菌杀菌效果研究 被引量：1
6
作者 刘枝华 涂娇 +3 位作者 胡雄 邓佩仪 陈江凤 邵俭 《山地农业生物学报》 2019年第3期89-92,共4页
为筛选对舒伯特气单胞菌(Aeromonas schubertii)具有较好杀菌效果的消毒剂及其最小杀菌浓度(Minimum Bactericidal Concentration,MBC),选用五种消毒剂(聚维酮碘、双链季铵盐碘、大蒜素、二氧化氯、复合碘)进行杀菌实验,设置舒伯特气单... 为筛选对舒伯特气单胞菌(Aeromonas schubertii)具有较好杀菌效果的消毒剂及其最小杀菌浓度(Minimum Bactericidal Concentration,MBC),选用五种消毒剂(聚维酮碘、双链季铵盐碘、大蒜素、二氧化氯、复合碘)进行杀菌实验,设置舒伯特气单胞菌母液浓度为(1~2)×10^3 cfu/mL,五种消毒剂目标浓度均为0.3750mg/L。研究结果表明,双链季铵盐碘对舒伯特气单胞菌杀菌效果最好,杀菌率为63.02%;其次是复合碘,杀菌率为43.56%。当双链季铵盐碘和复合碘两种消毒剂浓度为目标浓度3倍(1.1250mg/L)时,可全部杀灭舒伯特气单胞菌。因此,五种消毒剂对舒伯特气单胞菌都具有一定的杀菌效果,依次为:双链季铵盐碘>复合碘>二氧化氯>大蒜素,其中双链季铵盐碘和复合碘的效果最好,其最小杀菌浓度(MBC)为1.1250 mg/L。 展开更多
关键词 舒伯特气单胞菌 消毒剂 目标浓度 最小杀菌浓度
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黑水虻虫浆对杂交鳢血清免疫、抗氧化指标和肠道形态、菌群及抗病力的影响 被引量：6
7
作者 谢雨桐 朱喜锋 +5 位作者 李诗洋 黄燕华 刘春 鲁慧杰 王绥涛 王国霞 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期5297-5308,共12页
本试验旨在研究饲料中添加黑水虻虫浆(BSFLP)对杂交鳢血清免疫、抗氧化指标和肠道形态、菌群及抗病力的影响。添加0(FM,对照)、2%(BSFLP2)、4%(BSFLP4)和6%(BSFLP6)BSFLP湿物质(分别对应添加0、9、18、27 g/kg BSFLP干物质)配制4种等蛋... 本试验旨在研究饲料中添加黑水虻虫浆(BSFLP)对杂交鳢血清免疫、抗氧化指标和肠道形态、菌群及抗病力的影响。添加0(FM,对照)、2%(BSFLP2)、4%(BSFLP4)和6%(BSFLP6)BSFLP湿物质(分别对应添加0、9、18、27 g/kg BSFLP干物质)配制4种等蛋白质和等脂肪的饲料。选取420尾均质量为(10.84±0.01)g的杂交鳢,随机分成4组,每组3个重复,每个重复35尾,养殖周期为56 d。结果表明:各组间血清丙二醛含量、溶菌酶、过氧化氢酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性及总抗氧化能力无显著差异(P>0.05)。与FM组比较,试验组肠绒毛宽度、绒毛高度无显著变化(P>0.05),BSFLP4组肌层厚度、杯状细胞数显著增加(P<0.05)。BSFLP4组肠内容物菌群Shannon指数显著高于FM组(P<0.05),物种多样性增加。BSFLP6组后肠菌群Sobs指数、Chao指数和Ace指数显著高于BSFLP2组(P<0.05)。用舒伯特气单胞菌感染,BSFLP4组死亡率显著低于FM组和BSFLP6组(P<0.05)。综上所述,饲料中添加BSFLP可以改善杂交鳢免疫、抗氧化能力,调节肠道形态和肠道内容物菌群结构、增加菌群多样性进而提高肠道健康,增强抗舒伯特气单胞菌感染的能力。综合来看,杂交鳢饲料中添加18 g/kg BSFLP干物质为宜。 展开更多
关键词 黑水虻虫浆 杂交鳢 免疫 抗氧化 肠道结构 肠道微生物 舒伯特气单胞菌
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基于一个典型案例谈谈对鱼类细菌病诊治的认识与思考 被引量：1
8
作者 梁芝源 杨紫晴 +1 位作者 胡飞 胡雄 《当代水产》 2021年第10期58-61,共4页
鱼病的病原--病毒、细菌、真菌、寄生虫等的生物学特性差异极大,其对药物的敏感性千差万别,治疗思路与用药方案完全不同。即使是生命力极顽强、以“浮头三天不死”而著称的生鱼(乌鳗、杂交鳗),在每年炎热的夏季也饱受舒伯特气单胞菌病... 鱼病的病原--病毒、细菌、真菌、寄生虫等的生物学特性差异极大,其对药物的敏感性千差万别,治疗思路与用药方案完全不同。即使是生命力极顽强、以“浮头三天不死”而著称的生鱼(乌鳗、杂交鳗),在每年炎热的夏季也饱受舒伯特气单胞菌病、诺卡氏菌病等细菌性病害的肆虐。尽管“以防为主,防重于治,防治结合”是鱼病防控工作的方针,业内关于鱼病预防的理论、策略、产品(方案)不枚胜举,但是,养殖一线的细菌病依然年年流行,每年都有大量养殖户因之遭受惨重的损失。 展开更多
关键词 细菌性病害 诺卡氏菌病 防控工作 细菌病 用药方案 鱼病 舒伯特气单胞菌 认识与思考
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