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P菌毛粘附素在致肾盂肾炎大肠埃希菌对小鼠尿道上行感染中的作用 被引量：6
1
作者 郑铃 洪新如 +2 位作者 陈豪 刘超斌 陈锦英 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期477-480,共4页
目的 比较2株具有不同P菌毛粘附素(PapG)的同血清型UPEC和1株无菌毛大肠埃希菌对小鼠泌尿道上行感染性的差异,探讨粘附素在UPEC尿道感染中的作用。方法 通过17PEC尿道内接种形成BALB/c小鼠尿道上行感染;观察尿液、肾脏剖面的菌落计数和... 目的 比较2株具有不同P菌毛粘附素(PapG)的同血清型UPEC和1株无菌毛大肠埃希菌对小鼠泌尿道上行感染性的差异,探讨粘附素在UPEC尿道感染中的作用。方法 通过17PEC尿道内接种形成BALB/c小鼠尿道上行感染;观察尿液、肾脏剖面的菌落计数和肾组织的病理改变。结果 具有P菌毛的UPEC菌株感染之小鼠,在其尿液和肾剖面培养出大量原感染菌,肾组织呈现中、重度急性肾盂肾炎的病理改变;不同P菌毛粘附素的UPEC感染的菌落计数、肾脏病理改变严重度无显著性差异;无菌毛大肠埃希菌感染之小鼠,其尿液和肾剖面只有少量原感染茵生长,肾组织为轻至中度急性炎症改变。结论具有不同粘附素之P菌毛在介导UPEC致小鼠上行性急性肾盂肾炎中均发挥重要作用;无菌毛大肠埃希菌亦可导致小鼠肾脏炎性改变。 展开更多
关键词 致肾盂肾炎大肠埃希菌 PapG粘附素 尿道上行感染 菌落计数 肾组织 病理
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致肾盂肾炎大肠埃希菌粘附素重组蛋白诱导小鼠免疫应答 被引量：2
2
作者 郑铃 洪新如 +2 位作者 陈豪 郑秀芬 陈锦英 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期851-854,共4页
目的获得UPECP菌毛粘附素PapG重组蛋白纯化产物,研究其诱导小鼠的免疫应答,为进一步的PapG疫苗及免疫学研究创造条件。方法GST-PapG重组蛋白经诱导表达和亲和层析纯化后接种于BALB/c小鼠;ELISA法检测小鼠免疫血清的抗体效价,以血凝抑制... 目的获得UPECP菌毛粘附素PapG重组蛋白纯化产物,研究其诱导小鼠的免疫应答,为进一步的PapG疫苗及免疫学研究创造条件。方法GST-PapG重组蛋白经诱导表达和亲和层析纯化后接种于BALB/c小鼠;ELISA法检测小鼠免疫血清的抗体效价,以血凝抑制试验测定其免疫反应性。结果重组蛋白纯化产物可诱导小鼠产生针对PapG粘附素的特异性免疫应答,免疫小鼠血清抗体的效价显著升高,而且具有较强的血凝抑制作用。结论GST-PapG重组蛋白纯化产物具有良好的免疫原性,可用于UPEC抗粘附候选疫苗的筛选和进一步的免疫学研究。 展开更多
关键词 致肾盂肾炎大肠埃希菌 PapG粘附素 重组蛋白 免疫应答
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2015—2021年CHINET临床分离大肠埃希菌耐药性变迁
3
作者 王山梅 马冰 +87 位作者 李轶 杨洋 胡付品 朱德妹 徐英春 张小江 张朝霞 季萍 谢轶 康梅 王传清 王爱敏 徐元宏 黄颖 孙自镛 陈中举 倪语星 孙景勇 褚云卓 田素飞 胡志东 李金 俞云松 林洁 单斌 杜艳 郭素芳 魏莲花 邹凤梅 张泓 王春 胡云建 艾效曼 卓超 苏丹虹 郭大文 赵金英 喻华 黄湘宁 刘文恩 李艳明 金炎 邵春红 徐雪松 鄢超 张利侠 马娟 周树平 周艳 朱镭 孟晋华 董方 吕志勇 胡芳芳 沈瀚 周万青 贾伟 李刚 吴劲松 卢月梅 李继红 段金菊 康建邦 马晓波 郑燕萍 郭如意 朱焱 陈运生 孟青 王世富 胡雪飞 沈继录 黄文辉 汪瑞忠 房华 俞碧霞 赵勇 龚萍 温开镇 张贻荣 刘江山 廖龙凤 顾洪芹 姜琳 贺雯 薛顺虹 冯佼 岳春雷 《中国感染与化疗杂志》 北大核心 2025年第1期39-47,共9页
目的了解2015—2021年CHINET所属52所医院临床分离大肠埃希菌对各类抗菌药物的耐药性及变迁。方法按照CHINET耐药监测网统一方案进行大肠埃希菌的抗菌药物敏感性试验。采用WHONET 5.6及SPSS 20.0软件进行数据分析。结果2015—2021年共... 目的了解2015—2021年CHINET所属52所医院临床分离大肠埃希菌对各类抗菌药物的耐药性及变迁。方法按照CHINET耐药监测网统一方案进行大肠埃希菌的抗菌药物敏感性试验。采用WHONET 5.6及SPSS 20.0软件进行数据分析。结果2015—2021年共分离到非重复大肠埃希菌临床分离株289760株,主要分离自尿液标本[(44.7±3.2)%],女性尿标本占比高于男性(59.0%对29.5%);未成年人呼吸道及脑脊液标本分离株占比均高于成人(16.7%对7.8%,0.8%对0.1%);上述差异均有统计学意义(P值<0.05)。内科分离株占比最多[(28.9±2.8)%],有增长趋势。7年间,产ESBL大肠埃希菌及碳青霉烯类耐药大肠埃希菌(carbapenem resistant Escherichia coli,CREco)总检出率分别为55.9%及1.8%。产ESBL大肠埃希菌历年检出率三级医院最高。儿童医院CREco历年检出率高于二、三级医院。三级医院产ESBL大肠埃希菌、儿童医院产ESBL大肠埃希菌和CREco检出率均有下降趋势。二、三级医院CREco检出率有缓慢上升趋势。历年抗生素耐药率变化趋势缓慢。碳青霉烯类药物(亚胺培南、美罗培南)是β内酰类药物中抗菌活性最好的药物(耐药率≤2.1%)。β内酰酶抑制剂复方制剂(哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮-舒巴坦)、氨基糖苷类药物(阿米卡星)以及呋喃妥因和磷霉素(分离自尿标本菌株)耐药率均在10%以内。不同等级医院和不同科室分离的大肠埃希菌对抗菌药物的耐药率存在差异,尤其对头孢唑林及环丙沙星,分离自非ICU未成年住院患者的菌株耐药率明显低于其他科室患者(P<0.05)。对于大多数药物,分离自ICU的大肠埃希菌耐药率(除替加环素外)高于其他科室;三级医院分离株(替加环素、多黏菌素B、头孢吡肟、碳青霉烯类除外)耐药率高于二级医院和儿童医院。结论大肠埃希菌是重要致病菌,超半数的临床分离株产ESBL。虽然CREco总体检出率低,但在二、三级医院的检出率近年有上升趋势,需特别关注。 展开更多
关键词 细菌耐药监测 大肠埃希菌 药物敏感性试验
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兔源肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌的分离鉴定及小鼠感染试验
4
作者 张鲁星 石晴晴 +5 位作者 陶梦珂 李苗苗 赵恒 胡功政 吴华 刘建华 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期55-61,共7页
为确定某规模化兔场仔兔呼吸道感染合并腹泻引起死亡的原因,无菌采集病兔气管、肺、肝组织进行病毒和细菌检测。通过细菌分离培养、革兰氏染色、生化鉴定、16S rRNA序列同源性比对分析,确定分离菌株种属。通过药物敏感性试验、耐药基因... 为确定某规模化兔场仔兔呼吸道感染合并腹泻引起死亡的原因,无菌采集病兔气管、肺、肝组织进行病毒和细菌检测。通过细菌分离培养、革兰氏染色、生化鉴定、16S rRNA序列同源性比对分析,确定分离菌株种属。通过药物敏感性试验、耐药基因检测及动物回归对分离菌株的耐药性和致病性进行分析。结果显示,病毒检测结果均为阴性;从同一只仔兔的肺脏、气管中分离得到2株肺炎克雷伯氏菌,分别将其命名为KF1、KQ2,从肝脏中分离得到1株大肠埃希氏菌并将其命名为EG3。药敏试验结果显示,菌株KF1、KQ2和EG3均对黏菌素和氨苄青霉素钠耐药,对阿米卡星和氟苯尼考敏感。3株菌均检出耐药基因mcr-1和bla TEM。动物致病性试验显示,KF1组小鼠5 h后死亡50%,24 h全部死亡;混合组小鼠12 h后全部死亡;KQ2和EG3组48 h全部死亡。以上研究表明,大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌的混合感染是引起仔兔死亡的主要原因,3株分离株单独及混合感染均能引起试验小鼠死亡。 展开更多
关键词 兔 肺炎克雷伯氏菌 大肠埃希氏菌 分离鉴定 耐药基因
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湖北省某鸽场大肠埃希氏菌的分离鉴定与耐药性分析
5
作者 王娟 卢琴 +3 位作者 张记高 程伊洛 张腾飞 刘静波 《动物医学进展》 北大核心 2025年第5期134-138,共5页
大肠杆菌病是危害鸽养殖业的重要细菌性传染病,然而相关的流行及耐药数据却相对较少。为研究湖北省鸽场大肠埃希氏菌的流行及耐药情况,采集了肉鸽屠宰后的肝、脾、肠内容物等285份,经伊红美蓝琼脂培养基分离培养,通过PCR鉴定,分离到了19... 大肠杆菌病是危害鸽养殖业的重要细菌性传染病,然而相关的流行及耐药数据却相对较少。为研究湖北省鸽场大肠埃希氏菌的流行及耐药情况,采集了肉鸽屠宰后的肝、脾、肠内容物等285份,经伊红美蓝琼脂培养基分离培养,通过PCR鉴定,分离到了199株鸽源大肠埃希氏菌,分离率为69.82%。经过双重PCR扩增对菌株进行系统进化群鉴定,筛选出高致病群菌株60株(B2群34株,D群26株),占分离株的30.15%。采用药敏纸片法对60株高致病群菌株进行了12种抗菌药物的耐药性分析,结果表明,这些菌株对林可霉素、氟苯尼考、四环素、氨苄西林、红霉素和甲氧苄氨嘧啶的耐药率高于95%,而对大观霉素、替加环素、头孢噻肟、环丙沙星、多黏菌素B和美罗培南等较为敏感。所有菌株均耐3种以上的抗菌药物,最多可耐9种抗菌药物,其中51.67%的菌株耐6种抗菌药物,占比最多。研究结果可为湖北省鸽场大肠杆菌病的预防与合理用药提供科学数据。 展开更多
关键词 大肠埃希氏菌 分离鉴定 致病群 耐药性 鸽
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2016—2023年上海市浦东新区和松江区畜禽源大肠埃希菌耐药性比较
6
作者 方雅红 张妤 +5 位作者 孙冰清 姜芹 龚志亮 李闽 商军 张亦菲 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2025年第1期38-47,共10页
为了调查2016—2023年上海市浦东新区和松江区(下文简称“两区”)畜禽源大肠埃希菌(E.coli)的耐药性变迁情况,本试验从两区畜禽养殖场分别采集401和490份畜禽肛拭子进行大肠埃希菌的分离鉴定,并调查养殖场的抗菌药物使用情况;采用微量... 为了调查2016—2023年上海市浦东新区和松江区(下文简称“两区”)畜禽源大肠埃希菌(E.coli)的耐药性变迁情况,本试验从两区畜禽养殖场分别采集401和490份畜禽肛拭子进行大肠埃希菌的分离鉴定,并调查养殖场的抗菌药物使用情况;采用微量肉汤稀释法测定分离的大肠埃希菌对10大类14种抗菌药物的敏感性。结果显示,两区不同养殖场的抗菌药物使用情况存在差异。两区分别分离到333和350株大肠埃希菌,分离率为83.04%和71.43%。两区分离菌株对四环素(87.09%,82.00%)、磺胺异噁唑(77.78%,82.00%)、氨苄西林(82.58%,70.30%)和复方新诺明(70.87%,76.90%)的耐药率较高,对头孢他啶(6.61%,6.90%)和黏菌素(0.90%,0.90%)较为敏感,未检测到美罗培南耐药菌株;多重耐药菌株占比分别为87.99%和81.71%。8年间,两区分离菌株对多数抗菌药物的耐药率、多重耐药菌株占比和耐药谱数量整体呈下降趋势,松江区下降趋势更明显。结果表明,浦东新区和松江区畜禽源大肠埃希菌对部分抗菌药物的耐药率高且多重耐药情况严重,在减抗背景下,两区耐药水平均有缓解,松江区缓解程度更大。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 耐药性 兽用抗菌药 减量化行动 浦东新区 松江区
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山东省猪源和鸡源致泻性大肠埃希菌耐药性特征分析
7
作者 陈玉 王鹤佳 +6 位作者 赵琪 程敏 刘芳琴 崔明全 张纯萍 李霆 张启迪 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第7期43-55,共13页
为了解山东省养殖环节致泻性大肠埃希菌(DEC)的耐药性特征,本试验从山东省10个城市35个养殖场共收集猪和鸡相关样本120份,对大肠埃希菌进行分离培养和质谱鉴定,使用多重荧光定量PCR方法对分离菌株进行致病类型鉴定,并采用微量肉汤稀释... 为了解山东省养殖环节致泻性大肠埃希菌(DEC)的耐药性特征,本试验从山东省10个城市35个养殖场共收集猪和鸡相关样本120份,对大肠埃希菌进行分离培养和质谱鉴定,使用多重荧光定量PCR方法对分离菌株进行致病类型鉴定,并采用微量肉汤稀释法进行耐药表型分析,最后对分离菌株进行全基因组测序基因型特征和系统发育关系分析。结果显示,从120份样本中共分离出110株大肠埃希菌,其中33株为DEC,77株为非DEC;33株DEC中包括肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)27株、肠产毒大肠埃希菌(ETEC)4株、肠出血性大肠埃希菌(EHEC)2株。药敏试验结果显示,在检测的25种药物中,DEC对氨苄西林(81.82%)、氟苯尼考(81.82%)和氯霉素(81.82%)的耐药率较高,DEC与非DEC的耐药率无显著性差异(P>0.05),鸡源DEC对卡那霉素、新霉素、头孢噻肟、妥布霉素和氨曲南5种药物的耐药率显著高于猪源DEC(P<0.05或P<0.01)。全基因组序列分析结果显示,33株DEC共包含27种ST型,其中ST10为优势型别;共携带41种耐药质粒,其中以ColRNAI最为常见;共携带54种耐药基因,包括氨基糖苷类(15种)、β-内酰胺类(12种)、磺胺类(9种)、氟喹诺酮类(4种)、酰胺醇类(4种)、大环内酯类(3种)、四环素类(3种)、多磷类(2种)、多肽类(1种)和利福霉类(1种)。其中,氨基糖苷类耐药基因aph(3′)-IIa在DEC中的携带率显著高于非DEC(P<0.05),而aadA5的携带率则显著低于非DEC(P<0.05)。研究表明,山东省猪源和鸡源DEC耐药严重,耐药质粒和耐药基因种类繁多,菌株具有较高的遗传多样性。本试验结果可为优化畜牧业抗菌药物使用管理策略提供关键数据支持,也为防控DEC相关腹泻暴发和耐药性扩散提供科学依据。 展开更多
关键词 致泻性大肠埃希菌 多重荧光定量PCR 全基因组测序 耐药性
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重庆城口地区家养山羊携带产志贺毒素大肠埃希菌情况及其分子特征分析
8
作者 彭晶晶 胡彬 +8 位作者 杨茜 李轶 黄海 刘文双 孟宇 王礼君 熊衍文 袁毅 侯配斌 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第5期529-536,共8页
目的了解重庆城口地区家养山羊中产志贺毒素大肠埃希菌的携带情况、耐药情况及分子特征。方法2023年8月采集重庆城口辖区内不同村镇养殖户的羊粪便样本283份。经EC肉汤增菌后接种选择性培养基进行产志贺毒素大肠埃希菌菌株分离,对stx1/s... 目的了解重庆城口地区家养山羊中产志贺毒素大肠埃希菌的携带情况、耐药情况及分子特征。方法2023年8月采集重庆城口辖区内不同村镇养殖户的羊粪便样本283份。经EC肉汤增菌后接种选择性培养基进行产志贺毒素大肠埃希菌菌株分离,对stx1/stx2阳性菌株进行耐药性分析和全基因组测序。通过全基因组序列分析菌株stx基因亚型、血清型、多位点序列型、毒力基因和耐药基因携带情况并进行系统进化分析。结果从283份羊粪样本中检出46株产志贺毒素大肠埃希菌,检出率为16.25%。46株菌分为12种O∶H血清型,最常见的是O76∶H19和O8∶H7,各为9株;O157∶H7型5株。MLST型有11种,ST675、ST196为优势型别,均为9株菌,占比均为19.57%。菌株共分为7种不同stx亚型及组合,主要为stx1c亚型(26/46,56.52%),其次为stx2k亚型(9/46,19.57%),其中9株stx2k亚型菌株血清型和MLST型均为O8∶H7和ST196。在耐药表型检测实验中,46株菌中对氨苄西林耐药的有2株,对氨苄西林/舒巴坦、头孢唑啉及头孢西丁耐药的各1株。鉴定出的9株产2k亚型志贺毒素大肠埃希菌(Stx2k-STEC)菌株虽然均携带β-内酰胺类耐药相关基因blaEC-18,但药敏试验显示对检测的15种抗菌药物均敏感。系统进化分析显示9株Stx2k-STEC菌株高度相似,但与中国其他地区的Stx2k-STEC分离株的遗传差异较大。结论重庆城口地区家养山羊为STEC的重要动物宿主,并携带与国内其他地区不同克隆的Stx2k-STEC新菌型。 展开更多
关键词 产志贺毒素大肠埃希菌 志贺毒素2k亚型 血清分型 药物敏感性检测 全基因组测序
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宁夏地区致犊牛腹泻大肠埃希氏菌和沙门氏菌的鉴定及药敏试验
9
作者 丁栋昭 邵倩 +6 位作者 张雯 李鑫 王复江 朱磊鑫 卿素珠 杨奇 张为民 《动物医学进展》 北大核心 2025年第9期28-34,共7页
为调查宁夏地区引起犊牛腹泻的大肠埃希氏菌(Escherichia coli)和沙门氏菌(Salmonella)的流行特征,采集了宁夏地区4个市的100份犊牛腹泻的粪便样本进行大肠埃希氏菌和沙门氏菌的分离检测。用PCR、动物试验和微量肉汤稀释法分别检测分离... 为调查宁夏地区引起犊牛腹泻的大肠埃希氏菌(Escherichia coli)和沙门氏菌(Salmonella)的流行特征,采集了宁夏地区4个市的100份犊牛腹泻的粪便样本进行大肠埃希氏菌和沙门氏菌的分离检测。用PCR、动物试验和微量肉汤稀释法分别检测分离菌株的毒力基因携带情况、致病性和耐药性。结果显示,共分离鉴定到97株大肠埃希氏菌和20株沙门氏菌,其中大肠埃希氏菌毒力基因F41、eaeA检出率较高,STX1、STX2、STa检出率较低;沙门氏菌毒力基因spvC、fimA、sopE、invA、stn均有检出;携带毒力基因的分离株对小鼠均有致病性;药敏结果显示,分离到的97株大肠埃希氏菌对碳青霉烯类抗菌药物全部敏感,对其他药物表现不同程度的耐药性,对磺胺类药物耐药率达80.0%以上,多重耐药率为40.2%;分离的20株沙门氏菌对碳青霉烯类、多肽类抗菌药物全部敏感,对其他药物表现不同程度的耐药性,对磺胺类抗菌药物耐药率达70.0%以上,多重耐药率为20.0%。研究结果为宁夏地区犊牛腹泻防控提供了参考依据。 展开更多
关键词 犊牛腹泻 大肠埃希氏菌 沙门氏菌 毒力基因 耐药性
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鱼腥草挥发油抗大肠埃希菌的活性成分和机制研究
10
作者 翟亚森 刘晓会 +5 位作者 杨天波 高瑾 胡文毅 武艺 彭媛媛 赵琳静 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第10期88-95,共8页
该研究考察鱼腥草挥发油(Houttuynia essential oil,HEO)对常见食源性致病菌大肠埃希菌(Escherichia coli)的抗菌活性,探讨其主要的活性成分及可能的作用机理。采用气相色谱-质谱技术,结合Kovats保留指数,从HEO中共鉴定了41种化学成分。... 该研究考察鱼腥草挥发油(Houttuynia essential oil,HEO)对常见食源性致病菌大肠埃希菌(Escherichia coli)的抗菌活性,探讨其主要的活性成分及可能的作用机理。采用气相色谱-质谱技术,结合Kovats保留指数,从HEO中共鉴定了41种化学成分。HEO对E.coli有较好的体外抑制活性,最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)分别为5.3 mg/mL和7.1 mg/mL;相比对照组,亚抑菌浓度HEO暴露对E.coli生长有明显抑制作用。扫描电子显微镜和荧光光谱分析表明,不同浓度(0.1~1.0 MIC)HEO可导致菌体出现不同程度的萎缩、凹陷,甚至破裂,可改变细胞膜通透性,破坏细胞膜完整性,并显著降低胞内蛋白质、核酸及活性氧水平,且存在显著量效关系。通过整合网络分析和贪心算法的系统研究,发现芳樟醇、茴香脑、黄樟素、樟脑、桉叶油醇可能是HEO抗E.coli的主要活性成分,涉及的靶点包括PTGS2、CYP1A2、MAOB、PARP1、ACHE、AR、DRD2、IDO1、MAOA、TRPV1等。研究结果为鱼腥草资源的开发利用以及天然抗菌剂的研究提供了重要参考依据。 展开更多
关键词 鱼腥草挥发油 大肠埃希菌 抗菌机制 网络分析 贪心算法
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苦杏仁粕抑制产肠毒素性大肠埃希菌的作用机制
11
作者 朱亚南 吴文婷 +4 位作者 王馨怡 张露 邱雪辉 王虎玄 易建华 《陕西科技大学学报》 北大核心 2025年第2期73-80,共8页
产肠毒素性大肠埃希菌(ETEC)是导致人畜腹泻的主要病原菌.本文以苦杏仁粕为原料,将其1%的提取液与ETEC H10407共同培养,研究苦杏仁粕对ETEC生长、形态等的影响,并利用转录组测序技术,探究苦杏仁粕提取液对ETEC中基因的转录表达的作用.... 产肠毒素性大肠埃希菌(ETEC)是导致人畜腹泻的主要病原菌.本文以苦杏仁粕为原料,将其1%的提取液与ETEC H10407共同培养,研究苦杏仁粕对ETEC生长、形态等的影响,并利用转录组测序技术,探究苦杏仁粕提取液对ETEC中基因的转录表达的作用.结果表明:1%的苦杏仁粕提取液可以显著抑制ETEC的生长,破坏菌体细胞形态,减少了脂肪酸合成、蛋白质翻译通路相关基因的表达,增加了细菌趋化性信号通路相关基因cheB、cheR,ABC转运蛋白途径中铁元素转运相关基因fecB、fecC、fecD等的表达.苦杏仁粕可能引发了ETEC的代谢紊乱,从而抑制了其生长.研究结果将为开发利用苦杏仁,用于ETEC的防治提供参考. 展开更多
关键词 苦杏仁粕 产肠毒素性大肠埃希菌 抑菌 差异基因表达
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实时荧光定量PCR法检测左旋多巴中大肠埃希菌宿主细胞DNA残留量
12
作者 许冰瑜 刘妍 +2 位作者 郭心瑶 严方 孙桂斌 《中国药科大学学报》 北大核心 2025年第2期176-182,共7页
采用实时荧光定量PCR技术,建立特异性强、灵敏度高的左旋多巴中大肠埃希菌(Escherichiacoli)宿主细胞DNA残留量的检测方法,并进行验证和初步应用。以大肠埃希菌中的相对保守的E.coli MB6菌株16S核糖体RNA基因序列作为目的基因设计多对引... 采用实时荧光定量PCR技术,建立特异性强、灵敏度高的左旋多巴中大肠埃希菌(Escherichiacoli)宿主细胞DNA残留量的检测方法,并进行验证和初步应用。以大肠埃希菌中的相对保守的E.coli MB6菌株16S核糖体RNA基因序列作为目的基因设计多对引物,通过PCR进行特异性扩增获得目的片段。将目的片段重组至pLENTI-BSD-CON载体构建重组质粒命名为pLENTI-BSD-CON-E.coli-16S,以其为标准品,结合磁珠法提取纯化DNA,建立定量PCR检测方法(SYBR-Green法)。对建立的方法进行线性与范围、准确度、精密度、专属性、定量限及耐用性的方法学验证,应用于左旋多巴原料药的检测,并与试剂盒检测方法(Taqman探针法)进行比较。建立的定量PCR检测方法(SYBR-Green法)正向引物序列:5'-TTCGATGCAACGCGAAGAAC-3';反向引物序列:5'-GTGTAGCCCTGGTCGTAAGG-3'。以重组质粒作为标准品,DNA质量浓度在10fg/μL~3 ng/μL范围内线性关系良好(R^(2)≥0.98),定量限为10 fg/μL,加标溶液回收率在59.7%~80.7%范围内,RSD均小于30%。应用该法对3批左旋多巴原料药进行检测,DNA残留量均在限度以下。结果表明,建立的检测方法可用于定量检测左旋多巴等由大肠埃希菌作为宿主细胞生产的生物制品的DNA残留量,并且其灵敏度优于试剂盒检测方法。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 左旋多巴 构建质粒 实时荧光定量PCR 外源性DNA残留 帕金森病
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改良法大肠埃希菌制备的急性肾盂肾炎大鼠模型 被引量：2
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作者 何立群 龚学忠 +1 位作者 郑平东 杨践 《中国比较医学杂志》 CAS 2004年第3期154-154,共1页
关键词 大肠埃希菌 急性肾盂肾炎 大鼠模型 造模方法
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致奶牛乳房炎大肠埃希菌的分离鉴定及耐药分析
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作者 丁颖 张伟 +5 位作者 魏铭清 刘非凡 张倩 周霞 王震 张辉 《现代畜牧兽医》 2025年第3期16-20,共5页
试验旨在了解石河子地区引起奶牛乳房炎的大肠埃希菌耐药性与致病性情况。试验对石河子周边地区患乳房炎奶牛的乳样进行细菌分离纯化,对分离株进行细菌生化鉴定、革兰氏染色镜检、16S rDNA鉴定以及致病性试验、药敏试验。结果显示:试验... 试验旨在了解石河子地区引起奶牛乳房炎的大肠埃希菌耐药性与致病性情况。试验对石河子周边地区患乳房炎奶牛的乳样进行细菌分离纯化,对分离株进行细菌生化鉴定、革兰氏染色镜检、16S rDNA鉴定以及致病性试验、药敏试验。结果显示:试验分离出一株疑似大肠埃希菌,其形态呈卵圆形或杆状菌,革兰氏染色呈红色,经生化鉴定后的鉴定值为A070,对其进行16S rDNA测序比对鉴定为大肠埃希菌。药敏试验结果显示,分离株对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类等药物均具有一定的耐药性。致病性试验结果显示,分离株可致使小鼠死亡,死亡小鼠肝脏肿大,肝脏、脾脏、心脏均有淤血点。研究表明,试验成功从生鲜乳样本中分离到一株致病性大肠埃希菌,该菌株对部分抗生素具有一定耐药性,研究结果可为养殖场治疗奶牛乳房炎临床用药提供参考。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 分离鉴定 药敏试验 致病性试验
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简达气单胞菌和大肠埃希菌致肝胆管结石患者血流感染1例
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作者 郝小康 杜恬恬 +4 位作者 刘欣 陈辉辉 黎萌 周娟 徐世林 《中国感染与化疗杂志》 北大核心 2025年第4期464-466,共3页
急性胆道感染是消化系统常见的急危重症,主要包括急性胆囊炎和急性胆管炎,多与胆石症共同存在,严重时会导致多个器官功能受损,危及生命[1]。气单胞菌属于革兰阴性菌,普遍存在水生环境和食品中,是一种重要的水生、人畜共患病新发病原菌[2... 急性胆道感染是消化系统常见的急危重症,主要包括急性胆囊炎和急性胆管炎,多与胆石症共同存在,严重时会导致多个器官功能受损,危及生命[1]。气单胞菌属于革兰阴性菌,普遍存在水生环境和食品中,是一种重要的水生、人畜共患病新发病原菌[2]。目前已知有36个种,与人类疾病有关的主要是嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌和维氏气单胞菌[3]。 展开更多
关键词 血流感染 简达气单胞菌 大肠埃希菌
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新疆某野生动物园草食动物粪源大肠埃希氏菌和肠球菌的分离鉴定与耐药性分析
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作者 马超 刘泽鹏 +3 位作者 陈万昭 吴慧敏 夏盼盼 夏利宁 《动物医学进展》 北大核心 2025年第8期44-50,共7页
采集新疆某野生动物园高山区梅花鹿、马鹿、牦牛和荒漠区的马属动物(蒙古野驴和普氏野马)的新鲜粪便共231份,进行大肠埃希氏菌和肠球菌的分离鉴定;用琼脂稀释法对分离的大肠埃希氏菌和肠球菌进行最小抑菌浓度的测定;PCR检测常见相关耐... 采集新疆某野生动物园高山区梅花鹿、马鹿、牦牛和荒漠区的马属动物(蒙古野驴和普氏野马)的新鲜粪便共231份,进行大肠埃希氏菌和肠球菌的分离鉴定;用琼脂稀释法对分离的大肠埃希氏菌和肠球菌进行最小抑菌浓度的测定;PCR检测常见相关耐药基因。结果显示,野生动物园草食动物粪便中的肠球菌和大肠埃希氏菌分离率分别为93.5%(216/231)和56.7%(131/231);肠球菌中屎肠球菌分离率为64.3%(139/216)。药敏试验结果显示,大肠埃希氏菌对氟苯尼考、氨苄西林、多西环素和四环素的耐药率在12.5%以下,对其余6种药物敏感;肠球菌对四环素(1.9%,4/216)、多西环素(0.9%,2/216)和恩诺沙星(5.1%,11/216)的耐药率较低,对阿米卡星(28.2%,61/216)的耐药率较高,对其余6种药物敏感。耐药基因检测结果显示,大肠埃希氏菌仅检出β-内酰胺类耐药基因bla EC(47.3%)、四环素类耐药基因tet(A)(9.2%)和酰胺醇类耐药基因floR(1.5%);肠球菌仅检出氨基糖苷类耐药基因aac(6′)-Ii(53.7%)和四环素类耐药基因tet(M)(0.5%)。结果表明,该野生动物园草食动物粪源大肠埃希氏菌和肠球菌的耐药率低,且耐药基因检出率不高,除了β-内酰胺类药物的耐药表型和耐药基因检出率不符外,其余药物的耐药表型与基因型呈正相关。说明动物在封闭管理情况下,可避免携带的细菌产生和传播耐药性。 展开更多
关键词 动物园 野生草食动物 大肠埃希氏菌 肠球菌 耐药性分析
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肺部多耐药大肠埃希菌感染患者合并活动性结核病的因素分析
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作者 申晓菲 梁雅雪 +1 位作者 夏文娟 范晓云 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第2期338-343,共6页
目的分析肺部多重耐药大肠埃希菌(MDR-ECO)感染患者合并活动性结核病(ATB)的影响因素。方法收集肺部感染MDR-ECO的住院患者204例,其中合并ATB患者共89例为观察组,使用单因素分析及多因素Logistic回归分析筛选出肺部MDR-ECO感染患者合并... 目的分析肺部多重耐药大肠埃希菌(MDR-ECO)感染患者合并活动性结核病(ATB)的影响因素。方法收集肺部感染MDR-ECO的住院患者204例,其中合并ATB患者共89例为观察组,使用单因素分析及多因素Logistic回归分析筛选出肺部MDR-ECO感染患者合并ATB的危险因素。结果患者年龄、中性粒细胞数、血红蛋白、活动性恶性肿瘤、类风湿关节炎、抗生素暴露史、1年内手术史等均是肺部MDR-ECO感染患者合并ATB的影响因素(均P<0.05),其中高龄(95%CI:0.949~0.992,P=0.008)、中性粒细胞降低(95%CI:0.750~0.922,P<0.001)、抗生素暴露史(95%CI:1.202~2.596,P=0.004)是独立危险因素。结论部分肺部MDR-ECO感染患者易合并ATB,应加强对高龄、中性粒细胞数少、既往有抗生素暴露史的高危患者进行ATB筛查。 展开更多
关键词 肺部感染 多重耐药大肠埃希菌 活动性结核病 影响因素 危险因素 筛查
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大肠埃希菌质粒编码的bla_(KPC-2)基因介导碳青霉烯类药物低水平耐药的分子机制
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作者 白栓成 杨澜 +5 位作者 罗湘 黄丽雅 王雨欣 王熔 廖凤婷 廖晓萍 《华南农业大学学报》 北大核心 2025年第3期326-335,共10页
【目的】明确碳青霉烯酶编码质粒p21QH43K-KPC从肺炎克雷菌Klebsiella pneumoniae转移到大肠埃希菌Escherichia coli后介导碳青霉烯类药物低水平耐药的分子机制。【方法】采用构建EZ-Tn5转座子突变文库、基因敲除、转录组测序和全基因... 【目的】明确碳青霉烯酶编码质粒p21QH43K-KPC从肺炎克雷菌Klebsiella pneumoniae转移到大肠埃希菌Escherichia coli后介导碳青霉烯类药物低水平耐药的分子机制。【方法】采用构建EZ-Tn5转座子突变文库、基因敲除、转录组测序和全基因组测序(WGS)等手段,探究bla_(KPC-2)基因在大肠埃希菌中对美罗培南产生低水平耐药的分子机制。【结果】通过构建接合子EC600/p21QH43K-KPC的EZ-Tn5转座子突变文库,获得1株对美罗培南耐药水平增强的转座子突变株EC600/p21QH43K-KPC-130(MIC=8.000 mg/L)。WGS结果和Mauve分析显示,该转座子插入到染色体ompR基因,同时发现了2个点突变基因ltrA和iron。基因敲除发现,只有ompR缺失突变体对碳青霉烯的敏感性降低,并且可以通过基因回补恢复这一表型。【结论】质粒编码的bla_(KPC-2)基因在大肠埃希菌中介导碳青霉烯类药物低水平耐药与ompR对bla_(KPC-2)基因的调控有关。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 OmpR基因 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶-2 碳青霉烯类药物 耐药性 分子机制
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犊牛粪源性大肠埃希菌耐药基因的检测分析
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作者 张博 张力国 +2 位作者 王正欣 闫海滨 王海丰 《中国动物保健》 2025年第4期173-175,共3页
本研究旨在探讨辽东地区45株犊牛粪源性大肠埃希菌分离菌株对7种抗生素的耐药情况和17种耐药基因的携带情况。结果显示,对7种抗生素均有耐药性,检出阳性耐药基因11种;对7种抗生素的耐药性与耐药基因进行相关性分析,发现并存在不携带耐... 本研究旨在探讨辽东地区45株犊牛粪源性大肠埃希菌分离菌株对7种抗生素的耐药情况和17种耐药基因的携带情况。结果显示,对7种抗生素均有耐药性,检出阳性耐药基因11种;对7种抗生素的耐药性与耐药基因进行相关性分析,发现并存在不携带耐药基因却耐药,以及携带耐药基因却不表现耐药性的情况,说明耐药性不仅与基因携带有关,还受其他因素影响。这些发现为理解大肠埃希菌耐药机制提供了新视角,为犊牛大肠埃希菌病的防控和治疗提供参考。 展开更多
关键词 犊牛 大肠埃希菌 耐药基因
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200味中药及复方对大肠埃希菌体外抑菌实验的研究 被引量：1
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作者 兰新财 陈欣 +4 位作者 缪雨臻 卢骏 赵丽丽 姚红健 叶菁 《中国兽药杂志》 2025年第2期23-31,共9页
为研究中药及其复方对大肠埃希菌的抑菌效果,优选常用200味中药,采用“中药管皿法”进行体外抑菌试验。结果表明:乌梅、木瓜、五倍子等16味中药对大肠埃希菌有明显的抑菌作用;在中兽医辨证论治方法和君臣佐使组方原则指导下,将这16味中... 为研究中药及其复方对大肠埃希菌的抑菌效果,优选常用200味中药,采用“中药管皿法”进行体外抑菌试验。结果表明:乌梅、木瓜、五倍子等16味中药对大肠埃希菌有明显的抑菌作用;在中兽医辨证论治方法和君臣佐使组方原则指导下,将这16味中药组成7个复方和3个成方制剂。进一步进行体外抑菌试验。结果显示复方A1、B1、A2、B2、J1抑菌效果显著。本研究为中兽药替抗产品开发提供依据。 展开更多
关键词 中药 复方 大肠埃希菌 抑菌 实验研究
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