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弓形虫致密颗粒抗原GRA8的原核和真核表达质粒的构建被引量：3: 1; 作者袁仕善吴少庭 +4 位作者黄达娜张仁利高世同林绮萍余新炳《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第3期203-206,210,共5页; 目的　构建弓形虫RH株致密颗粒抗原GRA8的原核和真核重组表达质粒。方法　参照GRA8序列分别设计引物 ,采用PCR从弓形虫RH株基因组DNA中分别扩增出编码GRA8的基因片段 ,克隆至 pMD18-T载体 ;菌落PCR鉴定阳性克隆并测序分析 ;各组阳性克... 展开更多; 关键词弓形虫致密颗粒抗原 GRA8 原核真核表达质粒; 在线阅读下载PDF 职称材料

弓形虫表面抗原和致密颗粒蛋白的研究进展被引量：3: 2; 作者苑文英刘辉 +1 位作者刘秀华刘嘉琳《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期289-292,共4页; 关键词弓形虫表面抗原致密颗粒蛋白致密颗粒抗原棒状体蛋白滋养体生活史配子体裂殖体; 在线阅读下载PDF 职称材料

弓形虫和乙型肝炎病毒混合核酸疫苗的研究Ⅲ.pcDNA3-HBsAg-GRA1免疫小鼠的保护性观察被引量：7: 3; 作者王丹静舒衡平 +2 位作者蔡力汀吴翔蒋立平《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第6期515-518,共4页; 目的观察重组质粒pcDNA3HBsAgGRA1DNA接种诱导的保护性免疫应答。方法质粒DNA免疫BALB/c小鼠;ELISA法检测GRA1、HBsAg抗体及亚类水平;提取各免疫组小鼠肌肉组织DNA进行PCR检测;弓形虫RH强毒株攻击感染各免疫组小鼠。结果经pcDNA3HBsAgG... 展开更多; 关键词弓形虫乙肝表面抗原致密颗粒抗原-1 DNA疫苗; 在线阅读下载PDF 职称材料

弓形虫GRA1基因的体外扩增、克隆及鉴定被引量：7: 4; 作者贾雪梅陈观今 +1 位作者郭虹郑焕钦《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期17-19,9,共4页; 目的　体外扩增弓形虫RH株致密颗粒蛋白GRA1基因 ,并构建真核表达质粒。方法　从接种了弓形虫RH株的小鼠腹水中收集、纯化速殖子 ,提取基因组DNA ;据已知的GRA1基因列 ,设计合成一对引物 ,并引入EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点。应用PCR技术 ,... 展开更多; 关键词弓形虫致密颗粒抗原1 聚合酶链反应基因克隆 GRA1基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

弓形虫GRA1基因变异及真核表达载体的构建被引量：2: 5; 作者李淑红吴春风 +3 位作者刘力华谭岩于军潘广新《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期369-371,共3页; 目的 :构建弓形虫致密颗粒抗原 1 (GRA1 )基因真核表达质粒。方法 :根据 GRA1基因已知序列 ,设计一对引物。用 PCR技术从弓形虫 RH株基因组 DNA中扩增 GRA1基因片段 ,插入 pc DNA3质粒 ,转化大肠杆菌 DH5 α感受态细胞 ,经酶切及 PCR鉴... 展开更多; 关键词弓形虫属/遗传学致密颗粒抗原1 聚合酶链反应克隆分子变异(遗传学); 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弓形虫致密颗粒抗原GRA8的原核和真核表达质粒的构建被引量：3: 1; 作者袁仕善吴少庭黄达娜张仁利高世同林绮萍余新炳; 机构深圳市疾病预防控制中心中山大学基础医学院; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第3期203-206,210,共5页; 文摘目的　构建弓形虫RH株致密颗粒抗原GRA8的原核和真核重组表达质粒。方法　参照GRA8序列分别设计引物 ,采用PCR从弓形虫RH株基因组DNA中分别扩增出编码GRA8的基因片段 ,克隆至 pMD18-T载体 ;菌落PCR鉴定阳性克隆并测序分析 ;各组阳性克隆的质粒分别亚克隆至原核表达质粒pGEX - 4T - 2和真核表达载体 pVAX1,分别转化大肠杆菌BL2 1和JM10 9,PCR和酶切鉴定转化菌落的插入序列 ;将构建的原核表达菌株经IPTG诱导 ,SDS -PAGE和免疫印迹分析融合蛋白的表达 ;将构建的真核重组表达质粒免疫小鼠 ,观察其诱导的抗体应答。结果　PCR扩增出GRA8基因的特异片段 ,各组阳性克隆的序列正确 ,并分别被亚克隆到原核表达质粒 pGEX - 4T - 2和真核表达载体pVAX1上 ,构建了弓形虫致密颗粒抗原GRA8的原核和真核重组表达质粒 ;原核表达质粒在大肠杆菌中表达了GRA8的融合蛋白 ;真核重组表达质粒诱导小鼠产生了抗弓形虫抗原的抗体。结论　以pGEX - 4T - 2和 pVAX1为载体 ,分别成功构建了GRA8的原核和真核重组表达质粒。; 关键词弓形虫致密颗粒抗原 GRA8 原核真核表达质粒; Keywords Toxoplasma gondii dense granule antigen GRA8 cloning expression; 分类号 R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弓形虫表面抗原和致密颗粒蛋白的研究进展被引量：3: 2; 作者苑文英刘辉刘秀华刘嘉琳; 机构河北大学医学部寄生虫学教研室; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期289-292,共4页; 关键词弓形虫表面抗原致密颗粒蛋白致密颗粒抗原棒状体蛋白滋养体生活史配子体裂殖体; 分类号 R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弓形虫和乙型肝炎病毒混合核酸疫苗的研究Ⅲ.pcDNA3-HBsAg-GRA1免疫小鼠的保护性观察被引量：7: 3; 作者王丹静舒衡平蔡力汀吴翔蒋立平; 机构中南大学湘雅医学院病原生物学系; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第6期515-518,共4页; 文摘目的观察重组质粒pcDNA3HBsAgGRA1DNA接种诱导的保护性免疫应答。方法质粒DNA免疫BALB/c小鼠;ELISA法检测GRA1、HBsAg抗体及亚类水平;提取各免疫组小鼠肌肉组织DNA进行PCR检测;弓形虫RH强毒株攻击感染各免疫组小鼠。结果经pcDNA3HBsAgGRA1免疫组小鼠产生抗GRA1和HBsAg抗体,且抗GRA1的抗体水平明显高于GRA1单独和GRA1与HBsAg混合免疫组。弓形虫RH强毒株攻击感染pcDNA3HBsAgGRA1免疫组小鼠,其存活时间明显长于其他各组,结果提示HBsAg可能起免疫佐剂作用。结论将GRA1与HBsAg融合明显增强了GRA1的免疫原性和保护性。; 关键词弓形虫乙肝表面抗原致密颗粒抗原-1 DNA疫苗; Keywords Toxoplasma gandii dense granules antigen-1(GRA1) the hepatitis B surface antigen(HBsAg) DNA vaccine; 分类号 R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学] R373.2 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弓形虫GRA1基因的体外扩增、克隆及鉴定被引量：7: 4; 作者贾雪梅陈观今郭虹郑焕钦; 机构昆明医学院寄生虫学教研室中山医科大学寄生虫研究所; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期17-19,9,共4页; 基金美国中华医学基金会 (项目号 93 -5 94) "2 11"重点学科建设课题项目基金资助; 文摘目的　体外扩增弓形虫RH株致密颗粒蛋白GRA1基因 ,并构建真核表达质粒。方法　从接种了弓形虫RH株的小鼠腹水中收集、纯化速殖子 ,提取基因组DNA ;据已知的GRA1基因列 ,设计合成一对引物 ,并引入EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点。应用PCR技术 ,从弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA1基因片段。扩增目的基因片段经纯化、双酶切后 ,插入真核表达质粒pEGFP -N3中 ,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 ,于卡那霉素阳性LB平板上筛选阳性克隆。重组子经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切、PCR鉴定。结果　从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出 785bp的GRA1基因片段 ,构建重组质粒pEGFPN3-GRA1,酶切和PCR鉴定产物大小均与预期值相符。结论　成功地从弓形虫RH株基因组DNA中获取了GRA1基因 ,并构建了pEGFPN3-GRA1重组质粒。; 关键词弓形虫致密颗粒抗原1 聚合酶链反应基因克隆 GRA1基因; Keywords Toxoplasma gondii GRA1 gene PCR Cloning; 分类号 R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弓形虫GRA1基因变异及真核表达载体的构建被引量：2: 5; 作者李淑红吴春风刘力华谭岩于军潘广新; 机构吉林大学基础医学院病原生物学教研室吉林大学第一医院中心实验室空军总医院胸外科; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期369-371,共3页; 基金吉林省科技厅资助课题 (1 9980 334); 文摘目的 :构建弓形虫致密颗粒抗原 1 (GRA1 )基因真核表达质粒。方法 :根据 GRA1基因已知序列 ,设计一对引物。用 PCR技术从弓形虫 RH株基因组 DNA中扩增 GRA1基因片段 ,插入 pc DNA3质粒 ,转化大肠杆菌 DH5 α感受态细胞 ,经酶切及 PCR鉴定、测序。结果 :从弓形虫 RH株基因组中扩增出 775 bp的 GRA1基因 ,测序显示该基因存在一 1 35 bp的插入序列 ,使得所得 PCR产物分子量大于预期值 (6 2 8bp)。该插入序列造成GRA1基因移码突变。结论 :首次报道了变异的弓形虫 RH株; 关键词弓形虫属/遗传学致密颗粒抗原1 聚合酶链反应克隆分子变异(遗传学); Keywords Toxoplasma gondii/genetics GRA1 PCR cloning,molecalar, variation (genetics); 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	弓形虫致密颗粒抗原GRA8的原核和真核表达质粒的构建	袁仕善吴少庭黄达娜张仁利高世同林绮萍余新炳	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	2004	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	弓形虫表面抗原和致密颗粒蛋白的研究进展	苑文英刘辉刘秀华刘嘉琳	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	弓形虫和乙型肝炎病毒混合核酸疫苗的研究Ⅲ.pcDNA3-HBsAg-GRA1免疫小鼠的保护性观察	王丹静舒衡平蔡力汀吴翔蒋立平	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	2005	7	在线阅读下载PDF 职称材料
4	弓形虫GRA1基因的体外扩增、克隆及鉴定	贾雪梅陈观今郭虹郑焕钦	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	2002	7	在线阅读下载PDF 职称材料
5	弓形虫GRA1基因变异及真核表达载体的构建	李淑红吴春风刘力华谭岩于军潘广新	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2004	2	在线阅读下载PDF 职称材料