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灰产色链霉菌海藻糖合成酶的自诱导表达及两阶段温度控制发酵的优化
被引量：
4
1
作者
杨鑫
吴茜
+3 位作者
崔怀言
徐娴
朱丽英
江凌
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期14-18,共5页
克隆灰产色链霉菌海藻糖合成酶基因(tres),导入大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并对重组菌自诱导发酵条件进行优化。采用简并PCR的方法扩增灰产色链霉菌海藻糖合成酶基因(tres),将tres基因和表达载体p ET28a连接,构建重组质粒p ET28a-tres...
克隆灰产色链霉菌海藻糖合成酶基因(tres),导入大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并对重组菌自诱导发酵条件进行优化。采用简并PCR的方法扩增灰产色链霉菌海藻糖合成酶基因(tres),将tres基因和表达载体p ET28a连接,构建重组质粒p ET28a-tres,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,筛选重组子进行自诱导表达。利用HPLC法测定酶活研究温度对自诱导发酵海藻糖合成酶催化酶活的影响。该研究成功构建了重组大肠杆菌BL21(DE3)。重组菌自诱导表达最优发酵条件:采用两阶段温度控制,37℃培养2.5 h,25℃继续培养14 h,并添加3%乙醇,酶活达到1.29×104U/m L,与传统IPTG恒温培养方式相比酶活提高了55.25%,海藻糖得率达71%。
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关键词
海藻糖合成酶
自诱导发酵
两阶段温度控制策略
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职称材料
题名
灰产色链霉菌海藻糖合成酶的自诱导表达及两阶段温度控制发酵的优化
被引量：
4
1
作者
杨鑫
吴茜
崔怀言
徐娴
朱丽英
江凌
机构
南京工业大学生物与制药工程学院
南京工业大学理学院
南京工业大学食品与轻工学院
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期14-18,共5页
基金
江苏省自然科学基金项目(BK20131046
BK20130917)
+1 种基金
江苏省高校自然科学基金面上项目(14KJB530003)
教育部高等学校博士学科点专项科研基金(20123221120011)
文摘
克隆灰产色链霉菌海藻糖合成酶基因(tres),导入大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并对重组菌自诱导发酵条件进行优化。采用简并PCR的方法扩增灰产色链霉菌海藻糖合成酶基因(tres),将tres基因和表达载体p ET28a连接,构建重组质粒p ET28a-tres,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,筛选重组子进行自诱导表达。利用HPLC法测定酶活研究温度对自诱导发酵海藻糖合成酶催化酶活的影响。该研究成功构建了重组大肠杆菌BL21(DE3)。重组菌自诱导表达最优发酵条件:采用两阶段温度控制,37℃培养2.5 h,25℃继续培养14 h,并添加3%乙醇,酶活达到1.29×104U/m L,与传统IPTG恒温培养方式相比酶活提高了55.25%,海藻糖得率达71%。
关键词
海藻糖合成酶
自诱导发酵
两阶段温度控制策略
Keywords
trehalose synthase
auto-induced fermentation
two-stage temperature controlling strategy
分类号
TQ920.6 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
灰产色链霉菌海藻糖合成酶的自诱导表达及两阶段温度控制发酵的优化
杨鑫
吴茜
崔怀言
徐娴
朱丽英
江凌
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2015
4
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