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亚洲玉米螟幼虫膜结合海藻糖酶基因RNAi效应被引量：3: 1; 作者靳婷婷戈峰吴杰《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2020年第3期452-457,共6页; 海藻糖是昆虫的血糖,为昆虫提供能量;海藻糖酶催化海藻糖分解为葡萄糖,是几丁质生物合成的原料。围食膜(peritrophic membranes,PMs)是昆虫消化道特有结构,对昆虫消化食物、保护肠道表皮细胞具有重要作用;几丁质是PMs的重要组分。海藻糖... 展开更多; 关键词亚洲玉米螟膜结合海藻糖酶 RNAI 几丁质合成酶围食膜; 在线阅读下载PDF 职称材料

绿盲蝽膜结合型海藻糖酶ALTre-2基因表达、纯化及酶学特性被引量：6: 2; 作者谭永安肖留斌 +1 位作者柏立新孙洋《棉花学报》 CSCD 北大核心 2013年第5期396-402,共7页; 以绿盲蝽为材料,在前期获得绿盲蝽膜结合型海藻糖酶(ALTre-2)基因的基础上,构建了ALTre-2原核表达载体(pET28a-ALTre-2),经IPTG诱导表达、变性、复性和蛋白纯化后,获得具海藻糖酶活力的重组蛋白,最后在以海藻糖为底物及重组蛋白浓度为1.... 展开更多; 关键词绿盲蝽膜结合型海藻糖酶原核表达酶学特性; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用RNAi技术沉默稻纵卷叶螟膜结合型海藻糖酶基因被引量：4: 3; 作者赵凤杜娟 +1 位作者李尚伟张泽杰《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第6期1105-1112,共8页; 【目的】明确沉默稻纵卷叶螟膜结合型海藻糖酶基因(CmTre2)对其生长发育的影响,为稻纵卷叶螟的防治奠定理论基础。【方法】基于RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,针对稻纵卷叶螟膜结合型海藻糖酶基因(CmTre2)设计靶位点,体外合成双链... 展开更多; 关键词稻纵卷叶螟膜结合型海藻糖酶 RNA干扰酶活力; 在线阅读下载PDF 职称材料

转CmTreⅡ基因水稻RNAi效应的室内和田间抗性及遗传性鉴定被引量：2: 4; 作者王爽杜娟李尚伟《山地农业生物学报》 2017年第2期40-45,共6页; 本研究采用农杆菌介导的遗传转化技术,将CmTreⅡ(膜结合型海藻糖酶基因一个靶位点)导入粳稻中花11号中,利用CmTreⅡ-dsRNA(含有膜结合型海藻糖酶基因一个靶位点的双链RNA)的沉默效应,沉默稻纵卷叶螟的膜结合型海藻糖酶,最终获得一批抗... 展开更多; 关键词稻纵卷叶螟转基因抗虫性膜结合型海藻糖酶 RNA干扰; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名亚洲玉米螟幼虫膜结合海藻糖酶基因RNAi效应被引量：3: 1; 作者靳婷婷戈峰吴杰; 机构中国农业科学院蜜蜂研究所/农业部授粉昆虫生物学重点开放实验室中国科学院动物研究所/农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室; 出处《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2020年第3期452-457,共6页; 基金国家重点研发计划(2017YFD0200400) 中国农业科学院科技创新工(CAASASTIP-2018-IAR)。; 文摘海藻糖是昆虫的血糖,为昆虫提供能量;海藻糖酶催化海藻糖分解为葡萄糖,是几丁质生物合成的原料。围食膜(peritrophic membranes,PMs)是昆虫消化道特有结构,对昆虫消化食物、保护肠道表皮细胞具有重要作用;几丁质是PMs的重要组分。海藻糖酶(trehalase,Tre)和几丁质合成酶(chitin synthase,CHS)是几丁质合成途径的第1个和最后1个酶。本研究通过饲喂亚洲玉米螟(Orstrinia furnacalis,Asian corn borer,ACB)膜结合海藻糖酶(OfMT)基因特异的干扰dsRNA,研究RNAi对ACB幼虫中肠CHSB(OfCHSB)基因表达及幼虫发育的影响。发现处理48 h后,OfMT基因和OfCHSB基因表达量分别下降了52%和53%,幼虫发育迟缓。通过对处理及对照ACB幼虫中肠石蜡切片进行苏木精-伊红染色(hematoxylin-ethanol,HE染色)和几丁质标记,发现血腔内脂肪体组织减小、中肠围食膜组织中几丁质含量减少。推测OfMT基因有可能成为ACB的生物防治的靶标基因。; 关键词亚洲玉米螟膜结合海藻糖酶 RNAI 几丁质合成酶围食膜; Keywords Ostrinia furnacalis membrane-bound trehalase RNAi chitin synthase peritrophic membranes; 分类号 S433.4 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名绿盲蝽膜结合型海藻糖酶ALTre-2基因表达、纯化及酶学特性被引量：6: 2; 作者谭永安肖留斌柏立新孙洋; 机构江苏省农业科学院植物保护研究所; 出处《棉花学报》 CSCD 北大核心 2013年第5期396-402,共7页; 基金公益性行业(农业)科研专项(201103012) 现代农业产业技术体系建设专项资金国家科技支撑计划项目(2012BAD19B05); 文摘以绿盲蝽为材料,在前期获得绿盲蝽膜结合型海藻糖酶(ALTre-2)基因的基础上,构建了ALTre-2原核表达载体(pET28a-ALTre-2),经IPTG诱导表达、变性、复性和蛋白纯化后,获得具海藻糖酶活力的重组蛋白,最后在以海藻糖为底物及重组蛋白浓度为1.1 mg·mL-1的条件下,对纯化得到的重组ALTre-2蛋白进行活性检测,确定了其酶促反应的最佳pH和最适温度。试验结果表明:ALTre-2基因在大肠杆菌BL21(DE3)中能够高效表达一个约60 kD大小的蛋白,SDS-PAGE显示该蛋白以包涵体形式存在,经变性、复性及蛋白纯化获得了具海藻糖酶活力的重组蛋白;该重组ALTre-2蛋白在pH为7.0时活性最高,同时重组ALTre-2蛋白酶活性最适温度是50℃。研究结果为深入探讨绿盲蝽膜结合型海藻糖酶分子调控机制奠定基础。; 关键词绿盲蝽膜结合型海藻糖酶原核表达酶学特性; Keywords Apolygus lucorum membrane-bound trehalase prokaryotic expression enzymatic characteristic; 分类号 S435.622 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用RNAi技术沉默稻纵卷叶螟膜结合型海藻糖酶基因被引量：4: 3; 作者赵凤杜娟李尚伟张泽杰; 机构贵州大学昆虫研究所/贵州山地农业病虫害重点实验室遵义市第十八中学; 出处《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第6期1105-1112,共8页; 基金国家自然科学基金项目“利用RNAi技术防治稻纵卷叶螟的研究”(31360443)。; 文摘【目的】明确沉默稻纵卷叶螟膜结合型海藻糖酶基因(CmTre2)对其生长发育的影响,为稻纵卷叶螟的防治奠定理论基础。【方法】基于RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,针对稻纵卷叶螟膜结合型海藻糖酶基因(CmTre2)设计靶位点,体外合成双链RNA(dsCmTre2),将其注射入稻纵卷叶螟3龄幼虫体内,观察试虫表型变化,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CmTre2的表达水平,测定酶活力。【结果】注射dsCmTre2的幼虫取食量明显下降,生长发育阻滞,体型变小,出现畸形和死亡现象。注射dsCmTre2后5 d,幼虫死亡率明显高于对照组,存活幼虫体重明显轻于对照组;CmTre2和几丁质合成酶B基因(CmCHSB)的表达量较对照分别下降53.70%和34.41%;膜结合型海藻糖酶活力较对照组下降35.61%。【结论】CmTre2基因对稻纵卷叶螟的生长发育具有重要作用,该基因的沉默影响几丁质合成,引起发育障碍。该研究结果为进一步利用RNAi技术在田间防治稻纵卷叶螟奠定了基础。; 关键词稻纵卷叶螟膜结合型海藻糖酶 RNA干扰酶活力; Keywords Cnaphalocrocis medinalis Membrane-bound trehalase RNA interference Enzyme activity; 分类号 Q966 [生物学—昆虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转CmTreⅡ基因水稻RNAi效应的室内和田间抗性及遗传性鉴定被引量：2: 4; 作者王爽杜娟李尚伟; 机构贵州大学昆虫研究所/贵州山地农业病虫害重点实验实贵州大学昆虫资源开发利用特色重点实验室; 出处《山地农业生物学报》 2017年第2期40-45,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31360443) 贵州省科技创新人才团队项目(黔科合人才团队[2014]4001号); 文摘本研究采用农杆菌介导的遗传转化技术,将CmTreⅡ(膜结合型海藻糖酶基因一个靶位点)导入粳稻中花11号中,利用CmTreⅡ-dsRNA(含有膜结合型海藻糖酶基因一个靶位点的双链RNA)的沉默效应,沉默稻纵卷叶螟的膜结合型海藻糖酶,最终获得一批抗虫性较好的转基因纯合株系。研究中进一步检测了这些株系的室外卷叶率、白叶率以及室内抗虫性。采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测转基因水稻室内抗虫性CmTre2基因的相对表达量。通过RT-PCR技术检测了转CmTreⅡ基因水稻的遗传性。结果显示:在室外抗虫性试验中,稻纵卷叶螟对水稻的取食量明显下降,转CmTreⅡ基因水稻的卷叶率和白叶率分别为13.40%和12.47%,相比对照组分别下降了11.32%和10.10%;在室内抗虫性试验中,RT-q PCR检测结果表明,稻纵卷叶螟在取食转CmTreⅡ基因水稻的96 h后,CmTre2基因的相对表达量比对照组下降了29.00%;7 d后,实验组的死亡率为56.67%,相比对照组增加了46.67%。在遗传性试验中,检测发现转CmTreⅡ基因水稻的遗传性良好。因此本研究成功鉴定了转CmTreⅡ基因水稻对稻纵卷叶螟的抗虫性以及遗传性。; 关键词稻纵卷叶螟转基因抗虫性膜结合型海藻糖酶 RNA干扰; Keywords Cnaphalocrocis medinalis transgenosis insect resistance the membrane - bound trehalase RNAi; 分类号 Q958.1 [生物学—动物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	亚洲玉米螟幼虫膜结合海藻糖酶基因RNAi效应	靳婷婷戈峰吴杰	《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心	2020	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	绿盲蝽膜结合型海藻糖酶ALTre-2基因表达、纯化及酶学特性	谭永安肖留斌柏立新孙洋	《棉花学报》 CSCD 北大核心	2013	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	利用RNAi技术沉默稻纵卷叶螟膜结合型海藻糖酶基因	赵凤杜娟李尚伟张泽杰	《西南农业学报》 CSCD 北大核心	2020	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	转CmTreⅡ基因水稻RNAi效应的室内和田间抗性及遗传性鉴定	王爽杜娟李尚伟	《山地农业生物学报》	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料