金叶子中抑制膜结合型PGE_2合酶-1表达活性物质的分离与鉴定(英文) 被引量：5

1

作者 郭雷 龚邦强 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2008年第5期839-841,共3页

在从天然产物筛选抗炎物质的过程中,应用有机溶媒萃取、浓缩及层析分离纯化后,从金叶子中得到三个化合物:槲皮素(1)、番石榴苷(2)、栎素(3)。化合物2为首次从此植物中分离鉴定,化合物1显示了强烈的抑制mPGES-1基因表达的活性,其IC50值为... 在从天然产物筛选抗炎物质的过程中,应用有机溶媒萃取、浓缩及层析分离纯化后,从金叶子中得到三个化合物:槲皮素(1)、番石榴苷(2)、栎素(3)。化合物2为首次从此植物中分离鉴定,化合物1显示了强烈的抑制mPGES-1基因表达的活性,其IC50值为35.40μg/mL。 展开更多

关键词 金叶子 膜结合型PGe2 合酶-1 类风湿性关节炎 槲皮素 番石榴苷 栎素

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同型半胱氨酸对核因子-κB活性及白三烯E_4和前列腺素E_2合成水平的影响

2

作者 王晶 梅咏玉 +3 位作者 丁少桢 袁静静 梅俏 许建明 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第5期744-748,共5页

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人结肠腺癌(Caco-2)细胞中白三烯E_4(LTE_4)、前列素E_2(PGE_2)合成水平和核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法在Caco-2细胞中加入不同浓度(0、10、20、50μmol/L)Hcy作用不同时间(1、3、6 h),采用MTT... 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人结肠腺癌(Caco-2)细胞中白三烯E_4(LTE_4)、前列素E_2(PGE_2)合成水平和核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法在Caco-2细胞中加入不同浓度(0、10、20、50μmol/L)Hcy作用不同时间(1、3、6 h),采用MTT法和检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,观察Hcy对Caco-2细胞生长活性的影响;通过检测Caco-2细胞跨膜电阻(TEER)和样品中荧光素-5-异硫氰酸酯(FITC)浓度,观察Hcy对Caco-2细胞通透性的影响;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定Caco-2细胞上清液中LTE_4和PGE_2合成水平;采用凝胶迁移实验(EMSA)测定Caco-2细胞中NF-κB活性变化。结果随Hcy作用时间延长及作用浓度增加,Caco-2细胞活性明显受到抑制;随Hcy作用浓度增加,Caco-2细胞TEER明显降低,FITC跨膜转运量明显增加,细胞上清液中LTE_4和PGE_2水平明显升高(P<0.05);Hcy(50μmol/L)处理组细胞中NF-κB活性增强,且呈时间依赖性(1、3、6 h)。结论 Hcy通过激活NF-κB信号通路,促进Caco-2细胞肠黏膜LTE_4和PGE_2合成,引起肠黏膜炎症损伤。 展开更多

关键词 同型半胱氨酸 核转录因子-κB 5-脂氧合酶 环氧合酶-2 白三烯e4 前列腺素e2

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前列腺素E_2合酶的研究进展 被引量：9

3

作者 杨光锐 管又飞 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期182-186,共5页

关键词 前列腺素e2 合酶 病理生理作用 谷胱甘肽S 酶学特性 结合型 转移酶

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链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达 被引量：6

4

作者 韦晓虹 徐芬 +5 位作者 周丹莉 梁华 许海霞 胡芳 曾映娟 孙辽 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期88-96,共9页

【目的】探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达情况。【方法】多次小剂量腹腔注射STZ诱导1型糖尿病小鼠模型,实验分为两组:正常对照组(NC)和糖尿病组(DM)。ELISA法检测血清和尿液中前列腺素E2(PGE2)的表达水... 【目的】探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达情况。【方法】多次小剂量腹腔注射STZ诱导1型糖尿病小鼠模型,实验分为两组:正常对照组(NC)和糖尿病组(DM)。ELISA法检测血清和尿液中前列腺素E2(PGE2)的表达水平;RT-q PCR法检测肾组织环氧合酶-2(COX-2)、膜结合型前列腺素E2合成酶-1(m PGES-1)、各型EP受体(EP1、EP2、EP3、EP4)的m RNA表达水平;Westernblot法检测相应蛋白表达水平。【结果】随着周龄增加,DM组小鼠逐渐出现明显多饮、多尿、体质量下降等糖尿病消耗症状;与NC组小鼠相比,DM组小鼠空腹血糖(FBG)和24 h尿蛋白排泄量均显著增加(P<0.05);肾脏COX-2和EP4表达水平明显上调(P<0.05)、而m PGES-1、EP1、EP2、EP3 m RNA表达无显著变化(P>0.05);同时,DM组小鼠24 h尿PGE2定量显著高于NC组(P<0.05)。【结论】1型糖尿病小鼠肾脏组织中,早期即可检测到COX-2和EP4表达上调,伴24 h尿PGE2定量增加,提示COX-2/PGE2/EP4信号轴激活可能参与了糖尿病肾病的发生发展。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 环氧合酶-2 前列腺素e2 膜结合型前列腺素e2合成酶-1 4型前列腺素e2受体

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基于mPGES-1表达调控的药物筛选模型的建立

5

作者 郭雷 王淑军 龚邦强 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2008年第B05期1-4,共4页

聚合酶链式反应扩增mPGES-1上游调控序列并插入到已预先在pGL3-Basic载体的Sal Ⅰ位点插入真核筛选基因新霉素抗性基因（neomycin）形成的质粒pGL3B—neo中，构建重组报告基因载体pGL3B-neo／mPGES-1，转染人肺癌细胞A549，通过G418筛... 聚合酶链式反应扩增mPGES-1上游调控序列并插入到已预先在pGL3-Basic载体的Sal Ⅰ位点插入真核筛选基因新霉素抗性基因（neomycin）形成的质粒pGL3B—neo中，构建重组报告基因载体pGL3B-neo／mPGES-1，转染人肺癌细胞A549，通过G418筛选，建立了稳定的mPGES-1表达下调剂筛选细胞株SPGES1。通过检测荧光素酶报告基因表达水平的变化筛选人mPGES．1表达下调剂，并优化了其筛选条件，优化的条件是每孔细胞接种数目为1×10^4-3×10^4个，溶剂DMSO终浓度为1％，底物用量为20μL。利用该模型可有效地进行人mPGES-1表达下调剂的筛选。 展开更多

关键词 膜结合型前列腺素e2合酶-1 炎症 前列腺素e2 报告基因 筛选模型

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人参皂甙Rg1通过P38信号通路影响帕金森病MPTP模型小鼠黑质COX-2的表达 被引量：17

6

作者 王茜 郑桓 +1 位作者 张作凤 张宇新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1594-1598,共5页

目的研究P38信号通路在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中对环氧合酶-2(COX-2)的表达调控作用,以探讨导致多巴胺(DA)能神经元变性失活的可能机制,以及人参皂甙Rg1对P38信号通路的影响和对多巴胺神经元的... 目的研究P38信号通路在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中对环氧合酶-2(COX-2)的表达调控作用,以探讨导致多巴胺(DA)能神经元变性失活的可能机制,以及人参皂甙Rg1对P38信号通路的影响和对多巴胺神经元的保护作用。方法采用MPTP制备亚急性PD小鼠模型,用免疫组织化学和免疫蛋白印记法,观察小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH),COX-2,前列腺素E2(PGE2)以及磷酸化P38(p-P38)的表达变化;并观察给予人参皂甙Rg1对上述变化的影响。结果与对照组小鼠相比,模型组小鼠出现典型PD症状,在MPTP第3次注射后6 h,黑质区p-P38,COX-2,PGE2阳性细胞显著增加(P<0.01)。在MPTP第5次注射后24 h,黑质区TH阳性神经元显著丢失60%(P<0.01);经人参皂甙Rg1处理后,模型小鼠PD症状减轻,与模型组比较,在MPTP第3次注射后6 h,黑质区p-P38,COX-2,PGE2阳性细胞明显减少(P<0.01),在MPTP第5次注射后24 h,TH阳性细胞数较对照组仅下降30%。结论P38通路在亚急性PD模型早期对黑质COX-2表达可能起重要调控作用;人参皂甙Rg1可影响P38信号通路及C0X-2的表达而对小鼠多巴胺神经元起到一定保护作用。 展开更多

关键词 帕金森病 炎症 环氧合酶-2 前列腺素e2 磷酸化P38 人参皂甙RG1

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白细胞介素1β刺激对脑微血管内皮细胞COX活性、mRNA表达和PGE_2释放的影响 被引量：3

7

作者 郭建友 霍海如 +4 位作者 赵保胜 刘洪斌 李兰芳 郭淑英 姜廷良 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期710-714,共5页

目的:探讨白细胞介素1β(IL-1β)刺激不同时间对大鼠脑微血管内皮细胞(rCMEC)的环氧合酶(COX)活性及其mRNA表达和PGE2释放的影响。方法:建立rCMEC培养,进行Ⅷ因子相关抗原鉴定。细胞长至融合状态后加入IL-1β(30μg/L),分别刺激0.5、1、... 目的:探讨白细胞介素1β(IL-1β)刺激不同时间对大鼠脑微血管内皮细胞(rCMEC)的环氧合酶(COX)活性及其mRNA表达和PGE2释放的影响。方法:建立rCMEC培养,进行Ⅷ因子相关抗原鉴定。细胞长至融合状态后加入IL-1β(30μg/L),分别刺激0.5、1、2、4、8、12、24 h,ELISA测定细胞内COX-1、COX-2的活性及细胞外液PGE2含量,荧光实时定量PCR检测COX-1、COX-2的mRNA表达量,扩增产物进行熔解曲线图及琼脂糖电泳分析,并与未刺激的rCMEC作比较。结果:①Ⅷ因子抗体免疫组化染色可见90%以上的培养细胞呈阳性,确认为rCMEC。②IL-1β刺激4 h时细胞培养液PGE2含量已明显高于未刺激组(P<0.05);12 h时PGE2含量达到最大值(P<0.01);24 h时PGE2含量有所回降,但与未刺激组比较仍有显著差异(P<0.05)。③IL-1β刺激不同时间rCMEC内COX-1活性与未刺激组相比无统计学差异(P>0.05);COX-2活性在第8 h时已明显高于未刺激组(P<0.05),12 h活性达峰值(P<0.01),24 h活性有所回降,但仍具显著差异(P<0.05)。④IL-1β刺激不同时间COX-1 mRNA表达与未刺激组比较无明显差异(P>0.05);未刺激组在本实验条件下未检测到COX-2 mRNA表达,IL-1β刺激1h时可见COX-2 mRNA表达,4 h时COX-2 mRNA表达至峰值,而后开始回降,第12 h时已未见表达。熔解曲线图显示无非特异性扩增;琼脂糖电泳可见扩增基因与目的基因长度相符,结果与荧光定量PCR一致。结论:IL-1β作用下,rCMEC释放的PGE2持续增加并于12h达峰值,这一过程主要与COX-2 mRNA表达激活及COX-2活性增加有关。 展开更多

关键词 白细胞介素1 脑 内皮细胞 前列腺素e类 环氧合酶-2

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环氧合酶-2抑制剂对创伤后应激障碍大鼠神经功能的改善

8

作者 何主强 段发亮 +3 位作者 王孟阳 吴京雷 罗明 韦君武 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期544-548,共5页

目的检测创伤后应激障碍(post traumatic stress disorder,PTSD)大鼠海马区环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)水平和应用COX-2抑制剂塞来昔布(celecoxib)后对大鼠神经功能的改善作用,研究COX-2在PTSD中的可能作用。方法成年雄性大鼠... 目的检测创伤后应激障碍(post traumatic stress disorder,PTSD)大鼠海马区环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)水平和应用COX-2抑制剂塞来昔布(celecoxib)后对大鼠神经功能的改善作用,研究COX-2在PTSD中的可能作用。方法成年雄性大鼠分为正常对照组、PTSD组、COX-2抑制剂治疗组,通过旷场实验、高架十字迷宫实验、水迷宫实验评估大鼠行为能力;通过免疫组织化学染色、RT-PCR与Western blot测量大鼠海马组织COX-2表达情况;ELISA法检测大鼠海马组织白介素-1(interleukin-1,IL-1)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)以及前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的水平;应用Griess法检测海马组织一氧化氮(nitric oxide,NO)的表达。结果 RT-PCR及Western blot检测显示,治疗组COX-2mRNA及蛋白表达低于模型组而高于正常对照组,差异有统计学意义(均P<0.05),ELISA检测显示治疗组IL-1、IL-6、PEG2含量低于模型组而高于正常对照组,差异有统计学意义(均P<0.05),Griess法检测治疗组NO含量低于模型组而高于正常对照组,差异有统计学意义(均P<0.05),且治疗组较模型组行为学功能得到改善。结论 PTSD大鼠海马中IL-1、IL-6及COX-2的水平升高,同时其下游NO、PGE2的表达增加,推测COX-2是PTSD致病机制中的重要环节,COX-2抑制剂可能通过抑制炎性因子表达改善PTSD大鼠神经功能。 展开更多

关键词 创伤后应激障碍 环氧合酶-2 白细胞介素-1 白细胞介素-6 一氧化氮 前列腺素e2 塞来昔布

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同型半胱氨酸对实验性结肠炎模型中COX-2及5-LOX表达的影响 被引量：4

9

作者 王晶 丁少桢 +4 位作者 胡翠 胡静 刘晓昌 梅俏 许建明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1627-1628,共2页

同型半胱氨酸（homocysteine,Hey）是-种含巯基氨基酸,是甲硫氨酸去甲基化过程中的产物,可通过多种途径促发炎症反应,启动由细胞免疫所介导的局部和全身慢性炎症.研究发现[1,Hcy可激活核因子-KB（nuclearractor-kappaB,NF-κB）,导致多... 同型半胱氨酸（homocysteine,Hey）是-种含巯基氨基酸,是甲硫氨酸去甲基化过程中的产物,可通过多种途径促发炎症反应,启动由细胞免疫所介导的局部和全身慢性炎症.研究发现[1,Hcy可激活核因子-KB（nuclearractor-kappaB,NF-κB）,导致多种炎症基因转录,参与炎症的发生. 展开更多

关键词 同型半胱氨酸 炎症性肠病 环氧合酶-2 5-脂氧合酶 核转录因子-κB 白三烯 前列腺素e2

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基于选择性抑制mPGES-1的表达筛选抗炎中药 被引量：3

10

作者 郭雷 王淑军 龚邦强 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2010年第1期33-36,共4页

通过建立的选择性膜型前列腺素E2合酶-1(mPGES-1)表达抑制剂的体外细胞筛选模型,对50味中药共236个样品进行筛选。初筛中,筛选中药不同极性提取物对mPGES-1表达的抑制作用,抑制率>50%的样品进入复筛;复筛中,检测初筛活性样品对环氧化... 通过建立的选择性膜型前列腺素E2合酶-1(mPGES-1)表达抑制剂的体外细胞筛选模型,对50味中药共236个样品进行筛选。初筛中,筛选中药不同极性提取物对mPGES-1表达的抑制作用,抑制率>50%的样品进入复筛;复筛中,检测初筛活性样品对环氧化酶(COX)-1和COX-2表达的抑制作用,抑制率均<20%的样品认为是阳性物。结果表明,吲哚美辛对3种酶的抑制活性与文献报道相近;筛选发现泽泻组分1、蒲黄组分2对mPGES-1的表达有可重复的选择性抑制作用,对泽泻组分1、蒲黄组分2进行进一步研究,有望确定其抗炎的有效部位或化合物。 展开更多

关键词 膜型前列腺素e2合酶-1 炎症 中药 药物筛选

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mPGES-1、NF-κB p65在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义 被引量：5

11

作者 何志媛 谢双锋 +5 位作者 聂大年 尹松梅 何璋海 肖洁 马丽萍 李益清 《中山大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期73-81,共9页

【目的】检测膜结合型前列腺素E2合酶1(mPGES-1)和核转录因子κB p65(NF-κB p65)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达,探究两者与主要临床特征及预后关系,分析它们的潜在的临床价值。【方法】采用免疫组织化学方法,检测83例DLBCL... 【目的】检测膜结合型前列腺素E2合酶1(mPGES-1)和核转录因子κB p65(NF-κB p65)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达,探究两者与主要临床特征及预后关系,分析它们的潜在的临床价值。【方法】采用免疫组织化学方法,检测83例DLBCL组织中mPGES-1和NF-κB p65的表达,分析两者与临床特征及预后关系。【结果】DLBCL组织中mPGES-1、NF-κB p65高表达所占的比例分别为65.1%(54/83)和73.5%(61/83),且两者的表达水平呈正相关(P<0.05)。这两个蛋白的高表达与B淋巴细胞瘤/白血病蛋白-2(BCL-2)、高Ki-67、高乳酸脱氢酶(LDH)、淋巴结外侵犯、临床晚期和国际预后指数(IPI)评分高有关(P<0.05)。此外,NF-κB p65与多发性骨髓瘤癌基因1(MUM1)、病理类型也有关(P<0.05)。生存分析提示,mPGES-1和NF-κB p65是总生存期(OS)的不良因素,其中NF-κB p65是OS的独立预后因素(P<0.05)。【结论】mPGES-1和NF-κB p65在DLBCL高表达,且两者之间呈正相关,这两种蛋白与DLBCL患者的肿瘤进展和不良预后密切相关。 展开更多

关键词 膜结合型前列腺素e2合酶1 核转录因子κBp65 弥漫大B细胞淋巴瘤 临床意义 预后

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microRNA-155与支气管哮喘的研究进展 被引量：9

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作者 周好好 黄翠萍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第14期1791-1792,F0003,F0004,共4页

哮喘是一种常见的异质性疾病,具有复杂的病理生理学过程。目前吸入性糖皮质激素和支气管舒张剂是控制哮喘最有效的治疗方案,但并不是对所有的患者都有效。以microRNA为靶点的治疗药物代表着一种新的治疗策略,其中microRNA-155是研究最... 哮喘是一种常见的异质性疾病,具有复杂的病理生理学过程。目前吸入性糖皮质激素和支气管舒张剂是控制哮喘最有效的治疗方案,但并不是对所有的患者都有效。以microRNA为靶点的治疗药物代表着一种新的治疗策略,其中microRNA-155是研究最为密集的免疫系统相关的miRNA之一,在活化的B细胞、T细胞、树突状细胞和巨噬细胞中高度表达,为固有免疫和/或适应性免疫应答的细胞功能所必需,通过基因水平调节哮喘的发生与发展,microRNA-155作用机制与哮喘气道炎症密切相关,本文就microRNA-155与哮喘关系作一综述。 展开更多

关键词 支气管哮喘 microRNA-155 2型固有淋巴细胞 TH1/TH2 环氧合酶-2/前列腺素e2

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