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题名一种高温细菌葡聚糖磷酸化酶基因的克隆与表达
被引量：2
- 1
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作者
陈世琼
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机构
北京市海淀区产品质量监督检验所国家食品质量安全监督检验中心
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出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第7期40-43,共4页
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文摘
葡聚糖磷酸化酶(GlgP)在生物体的糖代谢过程中具有中心地位的作用。腾冲嗜热厌氧杆菌(Thermo-anaerobacter tengcongensis MB4T=AS.1.2430T=JCM11007T)分离自云南腾冲的温泉,其最适生长温度为75℃。为研究腾冲嗜热厌氧杆菌的葡聚糖磷酸化酶(Tte-GlgP)的性质,试验以T.tengcongensis MB4T的全基因组为模板,通过PCR扩增得到MB4T中的编码GlgP的基因(glgp),将其克隆到表达载体pET23b上,经过PCR验证、酶切验证和测序验证正确后,转化到宿主细胞大肠杆菌BL21DE3中,成功得到了表达。通过SDS-PAGE电泳分析得到其分子量约为64ku,与预期的结果一致。试验为Tte-GlgP性质的进一步研究和应用构建了基因工程菌株。
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关键词
腾冲嗜热厌氧杆菌
葡聚糖磷酸化酶
克隆
表达
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Keywords
Therrnoanaerobacter tengcongensis, glucan phosphorylase, cloning overexpression
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分类号
Q93
[生物学—微生物学]
Q78
[生物学—分子生物学]
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题名一种高温细菌葡聚糖磷酸化酶的性质研究(Ⅰ)
被引量：1
- 2
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作者
陈世琼
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机构
北京市海淀区产品质量监督检验所国家食品质量安全监督检验中心
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出处
《中国酿造》
CAS
北大核心
2009年第4期74-76,共3页
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文摘
为了研究极端嗜热细菌腾冲嗜热厌氧杆菌葡聚糖磷酸化酶(Tte-GlgP)的性质,将用大肠杆菌BL21DE3表达的Tte-GlgP进行了纯化,分别用SDS-PAGE电泳法及毛细管电泳法测定了分子量及等电点,结果表明,Tte-GlgP的分子量约为64kDa,等电点约为6.2,与推测的结果一致,说明Tte-GlgP在大肠杆菌体内可能得到了正确的折叠;WESTERN杂交试验的结果表明,Tte-GlgP在腾冲嗜热厌氧杆菌体内有表达,且终浓度为1.5%的麦芽糖能轻度诱导Tte-GlgP在腾冲嗜热厌氧杆菌体内的表达,而终浓度为1.5%的葡萄糖则轻度抑制Tte-GlgP在腾冲嗜热厌氧杆菌体内的表达,说明Tte-GlgP在腾冲菌体内可能参与了碳水化合物的代谢。本研究为进一步认识和应用Tte-GlgP提供了依据。
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关键词
腾冲嗜热厌氧杆菌
葡聚糖磷酸化酶
纯化
等电点
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Keywords
tengcongens
Glucan phosphorylase
purification
pI
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分类号
Q555
[生物学—生物化学]
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