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培养鼠视网膜神经细胞的腺苷/腺苷酸受体研究 被引量:1
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作者 M.Wakakura 刘 瑶 +1 位作者 王文吉 陈钦元 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2002年第3期228-231,共4页
目的 检测体外培养鼠视网膜神经细胞上腺苷/腺苷酸受体的存在。方法 先进行兔视网膜M(?)ller细胞培养,而后依此细胞作基质培养鼠视网膜神经细胞,应用自由钙指示剂Fura-2AM及AHGUS-100系统,监测不同条件下细胞内自由钙的变化,从而确定... 目的 检测体外培养鼠视网膜神经细胞上腺苷/腺苷酸受体的存在。方法 先进行兔视网膜M(?)ller细胞培养,而后依此细胞作基质培养鼠视网膜神经细胞,应用自由钙指示剂Fura-2AM及AHGUS-100系统,监测不同条件下细胞内自由钙的变化,从而确定腺苷/腺苷酸受体的存在。 结果 1.0μmol/L ATP可引起多量神经细胞内自由钙的变化,A2,P2x,P2y受体激动剂在不同浓度下也各自具有类似的作用,此作用不能被电压依赖性钙通道阻滞剂所抑制。结论培养的视网膜神经细胞上具有A2,P2x,P2y的受体,表明ATP及去磷酸代谢物可能在视网膜功能活动中具有重要的神经介质功能。 展开更多
关键词 视网膜 神经元 细胞培养 腺苷/腺苷酸受体
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培养鼠视网膜神经细胞的腺甙/腺苷酸受体研究
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作者 刘瑶 M.Wakakura 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2002年第3期228-231,共4页
目的 检测体外培养鼠视网膜神经细胞上腺苷/腺苷酸受体的存在,方法 先进行兔视网膜Mueller细胞培养,而后依此细胞作基质培养鼠视网膜神经细胞,应用自由钙指示剂Fura-2AM及ARGUS-100系统,监测不同条件下细胞内自由钙的变化,从而确... 目的 检测体外培养鼠视网膜神经细胞上腺苷/腺苷酸受体的存在,方法 先进行兔视网膜Mueller细胞培养,而后依此细胞作基质培养鼠视网膜神经细胞,应用自由钙指示剂Fura-2AM及ARGUS-100系统,监测不同条件下细胞内自由钙的变化,从而确定腺苷/腺苷酸受体的存在。结果 1.0μmol/LATP可引起多量神经细胞内自由钙的变化,A2,P2x,P2y受体激动剂在不同浓度下也各自具有类似的作用。此作用不能被电压依赖性钙通道阻滞剂所抑制。结论 培养的视网膜神经细胞上具有A2,P2x,P2y的受体,表明ATP及去磷酸代谢物可能在视网膜功能活动中具有重要的神经介质功能。 展开更多
关键词 视网膜神经细胞 腺苷受体 腺苷酸受体 体外培养 实验研究 细胞鉴定
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腺苷酸A2A受体对小鼠小肠急性缺血再灌注损伤中肠屏障功能的影响 被引量:3
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作者 李祥 蒲羽 +3 位作者 邱远 王文生 杨桦 肖卫东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期960-965,共6页
目的探讨腺苷酸A2A受体(A2AR)在小鼠小肠急性缺血再灌注(I/R)刺激所致肠黏膜屏障损伤机制中的作用。方法 6~8周龄雄性C57BL/6小鼠12只,分为假手术组和I/R组;A2AR基因敲除雄性C57BL/6(A2AR^(-/-))小鼠12只,分为A2AR^(-/-)+假手术组和A2AR... 目的探讨腺苷酸A2A受体(A2AR)在小鼠小肠急性缺血再灌注(I/R)刺激所致肠黏膜屏障损伤机制中的作用。方法 6~8周龄雄性C57BL/6小鼠12只,分为假手术组和I/R组;A2AR基因敲除雄性C57BL/6(A2AR^(-/-))小鼠12只,分为A2AR^(-/-)+假手术组和A2AR^(-/-)+I/R组(n=6)。采用夹闭肠系膜上动脉30 min,再灌注6 h建立小鼠肠I/R模型。HE染色观察小肠黏膜的形态学变化;免疫荧光及蛋白质印迹检测肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1蛋白变化,尤斯灌流仪检测肠上皮通透性变化。结果 HE染色显示假手术组和A2AR^(-/-)+假手术组小肠黏膜完整、无水肿,两组无明显差异;而I/R组和A2AR^(-/-)+I/R组小肠黏膜明显水肿、绒毛断裂、部分脱落,且A2AR^(-/-)+I/R组损伤程度明显重于I/R组。小肠黏膜上皮通透性检测发现,假手术组和A2AR^(-/-)+假手术组没有显著性差异;与假手术组相比,I/R组和A2AR^(-/-)+I/R组小肠黏膜跨上皮电阻(trans-epithelium electrical resistant,TER)值均显著下降(P<0.01),且A2AR^(-/-)+I/R组相比I/R组TER值下降更为明显(P<0.05)。免疫荧光及蛋白定量分析显示假手术组与A2AR^(-/-)+假手术组肠上皮高表达ZO-1,而在I/R组和A2AR^(-/-)+I/R组中ZO-1表达明显减少,同时A2AR^(-/-)+I/R组中ZO-1的表达显著低于I/R组(P<0.05)。结论小肠I/R刺激可诱导肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1表达与分布异常,造成肠黏膜屏障损伤;而A2AR可通过调控肠上皮细胞ZO-1表达加强肠黏膜屏障功能,在肠I/R损伤中发挥潜在的保护作用。 展开更多
关键词 腺苷酸A2A受体 肠黏膜屏障 肠缺血再灌注 紧密连接蛋白
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垂体腺苷酸环化酶激活肽拮抗lactacystin细胞毒性作用的机制研究 被引量:1
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作者 管丽娜 巴茂文 +4 位作者 冀永强 连培文 李宁 牟贤玉 于国平 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2015年第4期421-424,共4页
目的探讨垂体腺苷酸环化酶活化肽(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide,PACAP)对蛋白酶体抑制剂lactacystin诱导的帕金森病多巴胺能细胞凋亡作用的影响及其分子机制。方法用神经生长因子将鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞诱导分... 目的探讨垂体腺苷酸环化酶活化肽(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide,PACAP)对蛋白酶体抑制剂lactacystin诱导的帕金森病多巴胺能细胞凋亡作用的影响及其分子机制。方法用神经生长因子将鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞诱导分化成神经元的细胞模型,经20μmol/L的lactacystin作用24h,建立帕金森病细胞实验模型。实验分为对照组、lactacystin组、PACAP1-27干预组(干预1组)、PACAP1-27和PACAP6-27共同干预组(干预2组)。Western blot法检测线粒体凋亡相关蛋白bcl-2、bax、bcl-2/bax比值、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达情况。结果与对照组比较,lactacystin组bcl-2表达、bcl-2/bax比值明显降低(P<0.01),bax表达无明显变化,Caspase-3表达明显升高(P<0.01);与lactacystin组比较,干预1组bcl-2表达、bcl-2/bax比值明显升高(P<0.01),bax表达无变化,Caspase-3表达明显降低(P<0.01);与干预1组比较,干预2组Caspase-3表达明显升高(P<0.01)。结论蛋白酶体抑制剂lactacystin引起线粒体损伤导致细胞损伤;PACAP1-27通过调节上述信号通路发挥保护作用。而PACAP1-27的受体拮抗剂PACAP6-27则减弱了PACAP1-27的这一作用。 展开更多
关键词 受体 垂体腺苷酸环化酶激活多肽 帕金森病 多巴胺 细胞凋亡 PC12细胞 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
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