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survivin基因沉默对腺样囊性癌细胞生长和凋亡的影响 被引量:7
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作者 汪欣 杨军 +2 位作者 许波 熊宇 张从纪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1053-1056,共4页
目的探讨RNA干扰下调survivin基因表达后腺样囊性癌细胞生物学行为变化及其与caspase-3基因表达的相关性。方法设计、合成小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),构建表达载体pGenesil-shRNA-survivin,将重组质粒导入人腺样囊性癌ACC-... 目的探讨RNA干扰下调survivin基因表达后腺样囊性癌细胞生物学行为变化及其与caspase-3基因表达的相关性。方法设计、合成小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),构建表达载体pGenesil-shRNA-survivin,将重组质粒导入人腺样囊性癌ACC-2细胞株,G418筛选阳性克隆。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot分别检测转染后的ACC-2细胞中survivin、caspase-3 mRNA及蛋白表达的变化,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖,原位细胞凋亡(TUNEL)法及透射电子显微镜研究细胞凋亡。结果测序证实表达载体构建成功,在pGenesil-shRNA-survivin的ACC-2细胞株中,survivin mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05),caspase-3 mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.05),survivin与caspase-3的mRNA和蛋白表达呈显著负相关(r=-0.333,P<0.05)。ACC-2细胞增殖受到抑制,透射电镜及TUNEL法可见细胞出现凋亡。结论成功构建了survivin基因的RNAi真核表达载体,pGenesil-shRNA-survivin重组质粒能有效抑制腺样囊性癌细胞生长。 展开更多
关键词 RNA干扰 腺样囊性癌细胞 SURVIVIN CASPASE-3
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槲寄生碱对人腺样囊性癌细胞的抑制作用 被引量:5
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作者 李亚娟 周洪澜 +5 位作者 葛岩 张丽红 王心蕊 廖翔宇 高婷 王医术 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期601-604,共4页
目的:研究槲寄生碱对人腺样囊性癌(ACC)细胞生长的抑制作用。方法:以5-氟尿嘧啶(5-FU)作用组为阳性对照组,以不加药组为阴性对照组,实验组为0.625、1.250、2.500和5.000mg·L-1槲寄生组。采用CCK-8试剂盒测定槲寄生碱对ACC细胞的抑... 目的:研究槲寄生碱对人腺样囊性癌(ACC)细胞生长的抑制作用。方法:以5-氟尿嘧啶(5-FU)作用组为阳性对照组,以不加药组为阴性对照组,实验组为0.625、1.250、2.500和5.000mg·L-1槲寄生组。采用CCK-8试剂盒测定槲寄生碱对ACC细胞的抑制作用,通过绘制细胞生长曲线观察药物作用后细胞的生长情况及状态。利用PCNA免疫化学染色观察槲寄生碱对ACC细胞增殖的影响。结果:槲寄生碱可抑制ACC细胞的生长,其IC50值为2.24mg·L-1;生长曲线显示,药物作用后的ACC细胞生长较对照组缓慢;形态学观察显示药物作用后的ACC细胞逐渐变为圆形,附壁性减弱;药物作用后的ACC细胞PCNA的表达率明显弱于对照组(P<0.001)。结论:槲寄生碱可以抑制ACC细胞生长、增殖,有望成为临床治疗ACC的辅助药物。 展开更多
关键词 槲寄生碱 腺样囊性癌细胞 免疫组织化学
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nm23-h1转染腺样囊性癌细胞及其增殖能力的实验研究 被引量:2
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作者 李文 温玉明 +2 位作者 王力红 杨湛 张瑞林 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期109-111,共3页
目的 考察nm2 3_h1导入腺样囊性癌细胞 (ACC_M)后对其体内、外增殖的影响。方法 以阳离子脂质体(lipofectamine)介导nm2 3_h1转染ACC_M细胞 ,体外培养并用G4 18培养基筛选 ,体外观察转染组生长情况 ,并用细胞爬片免疫组化ABC法染色Ki... 目的 考察nm2 3_h1导入腺样囊性癌细胞 (ACC_M)后对其体内、外增殖的影响。方法 以阳离子脂质体(lipofectamine)介导nm2 3_h1转染ACC_M细胞 ,体外培养并用G4 18培养基筛选 ,体外观察转染组生长情况 ,并用细胞爬片免疫组化ABC法染色Ki6 7单克隆抗体 ;将nm2 3_h1阳性表达的ACC_M植入 10只裸鼠皮下 ,同时以未转染的ACC_M作对照 ,观察肿瘤大小。 4周后处死动物 ,获取标本 ,常规固定、包埋、切片后采用免疫组化LsAB法研究Ki6 7的表达并用流式细胞仪对转染组和非转染组的移植瘤进行细胞周期时相分析。结果 体外培养转染组细胞生长较未转染组慢 ,这种趋势随着转染组传代次数的增加而更加明显 ,Ki6 7呈阳性表达 ,未转染组Ki6 7呈部分阳性表达 ;转染组ACC_M体内移植瘤早期 (2周 )生长缓慢 ,2周后生长无统计学差异 (P >0 .0 5 ) ,细胞周期时相分析结果与之一致。组织切片显示瘤体Ki6 7,nm2 3_h1表达均为阴性。结论 nm2 3_h1的导入可能对ACC_M细胞增殖具有短时间的抑制作用。 展开更多
关键词 nm23-h1转染 腺样囊性癌细胞 增殖能力 ACC-M 基因治疗
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多药耐药口腔腺样囊性癌细胞株(Acc-3/CDDP)的建立及其细胞中相关耐药基因表达的变化 被引量:2
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作者 张福军 季平 +1 位作者 杨凯 李雅冬 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期54-56,共3页
目的:采用细胞毒性化疗药物顺铂(Cisplatin,CDDP)诱导口腔腺样囊性癌Acc-3细胞系,得到耐药表型的细胞亚系Acc-3/CDDP,检测其多药耐药性、探讨与其亲代Acc-3细胞系的耐药相关基因变化。方法:用浓度递增法建立Acc-3/CDDP耐药细胞系;用MTT... 目的:采用细胞毒性化疗药物顺铂(Cisplatin,CDDP)诱导口腔腺样囊性癌Acc-3细胞系,得到耐药表型的细胞亚系Acc-3/CDDP,检测其多药耐药性、探讨与其亲代Acc-3细胞系的耐药相关基因变化。方法:用浓度递增法建立Acc-3/CDDP耐药细胞系;用MTT法检测Acc-3/CDDP细胞的耐药指数,RT-PCR检测多药耐药基因MDR-1、MRP-1、GST-π和Bcl-2基因的mRNA表达水平。结果:Acc-3/CDDP对CDDP、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、长春新碱(VCR)、氨甲喋呤(MTX)和平阳霉素(PYM)的耐药指数(Resistancefactor,RF)分别为8.9、1.97、2.83、2.42、1.1;RT-PCR显示:Acc-3/CDDP中MRP-1、GST-π、Bcl-2较Acc-3升高,Acc-3/CDDP中有MDR-1基因表达,而Acc-3中无MDR-1基因表达。结论:MRP-1、GST-π、Bcl-2基因的表达水平在多药耐药口腔腺样囊性癌Acc-3/CDDP细胞中显著升高,这为进一步探讨肿瘤多药耐药的形成机制提供了科学基础。 展开更多
关键词 口腔 腺样囊性癌细胞 多药耐药 基因
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乙肝病毒X蛋白结合蛋白对腺样囊性癌细胞株ACC-2生物学行为的影响
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作者 孟雪 齐晓宇 +2 位作者 刘维贤 王瑶 王秋旭 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1082-1086,共5页
目的探讨乙肝病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)对腺样囊性癌细胞株ACC-2生物学行为的影响及其机制。方法采用siRNA转染法抑制腺样囊性癌细胞株ACC-2中HBXIP的表达;实时PCR和Western blotting检测HBXIP基因及蛋白表达水平;MTT法检测HBXIP-siRNA... 目的探讨乙肝病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)对腺样囊性癌细胞株ACC-2生物学行为的影响及其机制。方法采用siRNA转染法抑制腺样囊性癌细胞株ACC-2中HBXIP的表达;实时PCR和Western blotting检测HBXIP基因及蛋白表达水平;MTT法检测HBXIP-siRNA对细胞增殖的影响;transwell法检测HBXIP-siRNA对细胞侵袭的影响;划痕实验检测HBXIP-siRNA对细胞迁移的影响;蛋白印迹方法检测HBXIP-siRNA对PI3K/Akt信号通路中Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K及对S100A4蛋白表达量的影响。结果HBXIP在ACC-2中高表达,HBXIP-siRNA成功转染细胞株。MTT结果显示,48、72、96 h时实验组中存活的细胞数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);划痕实验结果显示,实验组细胞迁移率明显低于对照组(P<0.01);transwell小室实验结果显示,实验组中细胞侵袭个数明显低于对照组(P<0.01);蛋白印迹结果显示,相对于对照组,实验组细胞中p-Akt、p-PI3K及S100A4的表达量随着HBXIP基因沉默而相对降低。结论 HBXIP可促进腺样囊性癌细胞株ACC-2增殖、迁移和侵袭,其机制可能与促进Akt、PI3K磷酸化及增加S100A4蛋白表达量有关。 展开更多
关键词 乙肝病毒X蛋白结合蛋白 腺样囊性癌细胞株ACC-2 唾液 生物学功能 PI3K/AKT信号通路
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siRNA干扰Mcl-1对唾液腺腺样囊性癌SACC-2细胞生物活性的影响 被引量:1
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作者 张瑞智 张萍 +2 位作者 余波 罗锐 龚正林 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期809-812,共4页
目的:探讨siRNA干扰髓样细胞白血病-1分子(Mcl-1)对唾液腺腺样囊性癌细胞生物活性的影响。方法:构建Mcl-1-siRNA,转染入SACC-2细胞。应用real-time PCR法检测Mcl-1 mRNA表达水平及Western blotting检测Mcl-1蛋白表达水平。分别采用MTT法... 目的:探讨siRNA干扰髓样细胞白血病-1分子(Mcl-1)对唾液腺腺样囊性癌细胞生物活性的影响。方法:构建Mcl-1-siRNA,转染入SACC-2细胞。应用real-time PCR法检测Mcl-1 mRNA表达水平及Western blotting检测Mcl-1蛋白表达水平。分别采用MTT法、Transwell小室法、流式细胞法观察Mcl-1对SACC-2细胞增殖、迁移及凋亡能力的影响。结果:与空白对照组、脂质体组和NC-siRNA组相比,Mcl-1-siRNA组SACC-2细胞的增殖速度明显减缓;转染48 h后,Mcl-1-siRNA组SACC-2细胞迁移数为(39±9.0)个,明显低于对照组(69±6.0)个;Mcl-1-siRNA组SACC-2细胞凋亡细胞百分率为8.6%(对照组为1.9%)。结论:沉默Mcl-1显著抑制唾液腺腺样囊性癌SACC-2细胞增殖和迁移能力,促进其凋亡。 展开更多
关键词 MCL-1 唾液腺样囊性癌细胞 增殖 迁移 凋亡
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《华西口腔医学杂志》2007年(第25卷)主题索引
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《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期619-626,共8页
关键词 腺样囊性癌细胞 福赛斯坦纳菌 牙齿移动 巢永烈 牙周炎 牙龈卟啉单胞菌 附着体 龈下菌斑 下颌第一前磨牙 下颌骨骨折 主题索引 《华西口腔医学杂志》
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