小鼠脾集落形成期基质细胞在体外扩增脐带血CD34^+细胞中的作用 被引量：1

1

作者 傅晋翔 张学光 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期523-527,共5页

目的研究来源于小鼠脾脏的基质细胞在体外扩增脐血CD34+细胞中的作用;方法取γ射线照射后小鼠脾集落形成期的脾细胞经人重组单核细胞集落刺激因子(rhM-CSF)的激发培养,获得贴壁脾基质细胞,经丝裂霉素处理后作为滋养细胞,与多种造血细胞... 目的研究来源于小鼠脾脏的基质细胞在体外扩增脐血CD34+细胞中的作用;方法取γ射线照射后小鼠脾集落形成期的脾细胞经人重组单核细胞集落刺激因子(rhM-CSF)的激发培养,获得贴壁脾基质细胞,经丝裂霉素处理后作为滋养细胞,与多种造血细胞生长因子共同应用,体外扩增经免疫磁珠阳性选择法纯化的人脐血CD34+细胞,用体外集落形成及流式细胞仪分析扩增细胞的集落形成能力和表型。结果1)rhM-CSF能有效地刺激小鼠脾基质细胞的生长;2)所获的小鼠脾基质细胞具有支持脐血CD34+细胞的集落形成能力,与多种造血细胞生长因子共同应用后,能有效地扩增CD34+细胞,扩增2周后的细胞数达100倍,且仍具有多向分化能力。结论rhM-CSF能刺激小鼠脾集落形成期基质细胞的增殖,该类基质细胞具有有效支持人脐血CD34+细胞的体外扩增作用。 展开更多

关键词 脾集落形成期基质细胞 CD34^+细胞 体外扩增

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同培养条件对小鼠脾脏成克隆基质祖细胞（CFU一F）集落形成的影响

2

作者 于洪臣 凌翎 +3 位作者 刘方颖 王跃宇 刘及 于志强 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1995年第5期451-453,共3页

本文观察到脾脏ＣＦＵ一Ｆ集落形成受滋养骨髓细胞数、血清浓度及脾细胞数的影响。优选脾ＣＦＵ一Ｆ最佳培养条件为２０％小牛血清、滋养骨髓细胞数为每孔３×ｌ０６，脾细胞数为每孔４×１０５。

关键词 基质祖细胞 骨髓细胞 脾 培养条件

在线阅读 下载PDF 职称材料

联合应用粒细胞集落刺激因子和骨髓基质干细胞治疗急性心肌缺血的实验研究 被引量：8

3

作者 张勇 梁家立 +4 位作者 王胜 王惠 郑晓舟 杨哲 张波 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期43-45,48,共4页

目的探讨粒细胞集落刺激因子和自体骨髓基质干细胞(MSCs)移植共同应用对心肌缺血的治疗作用。方法采用MSCs在体外培养扩增。在结扎冠状动脉造成急性心肌缺血后,把被5溴-2脱氧尿苷(BrdU)标记后的MSCs移植到自体的缺血心肌中,同时腹腔注... 目的探讨粒细胞集落刺激因子和自体骨髓基质干细胞(MSCs)移植共同应用对心肌缺血的治疗作用。方法采用MSCs在体外培养扩增。在结扎冠状动脉造成急性心肌缺血后,把被5溴-2脱氧尿苷(BrdU)标记后的MSCs移植到自体的缺血心肌中,同时腹腔注射粒细胞集落刺激因子5d。4周后通过激光共聚焦显微镜验证移植后的MSCs是否向心肌细胞分化,通过心脏彩超和多导生理记录仪测定缺血心肌在移植自体MSCs后是否能提高心功能。另外,用Masson氏三色染色法从左室中断面切片量化心肌梗死范围。结果移植4周后,MSCs向心肌细胞分化,表达出α-横纹肌肌动蛋白和存在于心肌闰盘中的connexin43,联合应用粒细胞集落刺激因子和MSCs的治疗组左心室收缩功能恢复较好,心肌梗死面积最小,单独应用MSCs移植的治疗组次之,对照组心肌左室收缩功能恢复较差,心肌梗死面积最大。结论MSCs移植后可以向心肌细胞分化,粒细胞集落刺激因子可以动员机体内自体MSCs到心肌缺血区域,二者联合应用对于缺血心肌有协同治疗作用。 展开更多

关键词 粒细胞集落刺激因子 骨髓基质干细胞 心肌缺血 干细胞移植

在线阅读 下载PDF 职称材料

银屑病患者骨髓基质细胞白介素-8、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子分泌水平的实验研究 被引量：4

4

作者 邓起 刘瑞风 +2 位作者 王丽 张开明 尹国华 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期545-547,共3页

目的:通过比较银屑病患者与正常对照组骨髓基质细胞分泌白介素(IL)-8和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)水平的差异,揭示银屑病患者骨髓造血微环境的异常。方法:采用密度梯度离心法分离患者与对照组骨髓单一核细胞,通过贴壁法培养... 目的:通过比较银屑病患者与正常对照组骨髓基质细胞分泌白介素(IL)-8和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)水平的差异,揭示银屑病患者骨髓造血微环境的异常。方法:采用密度梯度离心法分离患者与对照组骨髓单一核细胞,通过贴壁法培养骨髓基质细胞,收集传至3代后又培养72 h的骨髓基质细胞及培养上清,用流式细胞仪鉴定细胞表面标志物,并用ELISA法检测上清液中IL-8和GM-CSF的水平。结果:90%以上分离培养的细胞表面高表达CD29,而CD34、CD45及人白细胞抗原(HLA)-DR表达阴性,即骨髓基质细胞纯度在90%以上;患者组骨髓基质细胞分泌IL-8显著低于对照组(P<0.05),而GM-CSF的分泌水平两组间无统计学差异(P>0.05)。结论:银屑病患者骨髓基质细胞分泌的IL-8存在异常,表明患者骨髓造血微环境可能存在异常。 展开更多

关键词 银屑病 骨髓基质细胞 白介素-8 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子

在线阅读 下载PDF 职称材料

联合应用粒细胞集落刺激因子和骨髓基质干细胞治疗急性心肌缺血的实验研究 被引量：1

5

作者 张勇 梁家立 +4 位作者 王胜 王惠 郑晓舟 杨哲 张波 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期2137-2140,共4页

目的:探讨粒细胞集落刺激因子和自体骨髓基质干细胞移植共同应用对心肌缺血的治疗作用。方法:采用自体骨髓基质干细胞(MSCs)在体外培养扩增。在结扎冠状动脉造成急性心肌缺血后,把被5溴-2脱氧尿苷(BrdU)标记后的MSCs移植到自体的缺血心... 目的:探讨粒细胞集落刺激因子和自体骨髓基质干细胞移植共同应用对心肌缺血的治疗作用。方法:采用自体骨髓基质干细胞(MSCs)在体外培养扩增。在结扎冠状动脉造成急性心肌缺血后,把被5溴-2脱氧尿苷(BrdU)标记后的MSCs移植到自体的缺血心肌中,同时腹腔注射粒细胞集落刺激因子5d。4周后通过激光共聚焦显微镜验证移植后的MSCs是否向心肌细胞分化,通过心脏彩超和多导生理记录仪测定缺血心肌在移植自体MSCs后是否能提高心功能。另外,用Masson氏3色染色法从左室中断面切片量化心肌梗死范围。结果:移植4周后,MSCs向肌细胞分化,表达出α-横纹肌肌动蛋白(α-sarcomeric actin)和存在于心肌闰盘中的connexin43,粒细胞集落刺激因子和自体骨髓基质干细胞移植结合应用的治疗组,左心室收缩功能明显强于单独应用自体骨髓基质干细胞移植的治疗组,移植后心肌左室收缩功能明显强于对照组,并且心肌梗死范围最小。结论:MSCs移植后可以向心肌细胞分化,粒细胞集落刺激因子可以动员机体内自体MSCs到心肌缺血区域,两者共同应用对于缺血心肌有协同治疗作用。 展开更多

关键词 粒细胞集落刺激因子 骨髓基质干细胞移植 心肌缺血

在线阅读 下载PDF 职称材料

迟发型超敏反应中小鼠脾淋巴细胞与细胞外基质粘附能力的变化 被引量：2

6

作者 刘建礼 徐强 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期325-327,共3页

目的 :探讨迟发型超敏反应中淋巴细胞与细胞外基质粘附能力的变化及细胞因子的调节作用。方法 :以 2 ,4,6-三硝基氯苯 (picrylchloride ,PCl)两次致敏小鼠后 ,在耳部攻击造成超敏反应。取攻击后不同时间点的脾淋巴细胞 ,以Mn2 + 为诱发... 目的 :探讨迟发型超敏反应中淋巴细胞与细胞外基质粘附能力的变化及细胞因子的调节作用。方法 :以 2 ,4,6-三硝基氯苯 (picrylchloride ,PCl)两次致敏小鼠后 ,在耳部攻击造成超敏反应。取攻击后不同时间点的脾淋巴细胞 ,以Mn2 + 为诱发剂 ,检测细胞与细胞外基质蛋白的粘附活性变化 ;或取攻击后 18h的脾淋巴细胞 ,分别在体外与IL - 2 ,IFN -γ ,TNF -α单独或联合培养 4h后 ,检测细胞与细胞外基质的粘附作用 ;将脾淋巴细胞纯化为T细胞后 ,检测TNF -α对其粘附能力的影响。结果 :脾淋巴细胞与细胞外基质的粘附能力在攻击后 6h时开始上升 ,18h达到高峰 ,之后下降 ,在 3 6h基本恢复正常水平。IL - 2在 10× 10 4 U/L显著促进脾淋巴细胞的粘附 ,TNF -α剂量依赖性地促进脾淋巴细胞的粘附 ,IFN -γ对TNF -α的作用具有明显的协同效应。TNF -α对脾T细胞粘附能力的促进作用强于对总脾淋巴细胞的作用。结论 :迟发型超敏反应中 ,T淋巴细胞与细胞外基质的粘附随炎症的进展发生相应的变化 。 展开更多

关键词 迟发型超敏反应 小鼠 脾淋巴细胞 细胞外基质 粘附能力

在线阅读 下载PDF 职称材料

人参皂苷Rg_1对培养猪骨髓基质细胞增殖的影响 被引量：4

7

作者 卢新政 张晓文 +2 位作者 黄峻 马根山 侯麦花 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期353-354,共2页

关键词 人参皂苷RG1 骨髓基质细胞 细胞增殖 集落形成 [^3H]TdR 四甲基偶氮唑盐法

在线阅读 下载PDF 职称材料

骨髓基质细胞体外诱导分化为内皮细胞的超微结构研究 被引量：6

8

作者 王春雪 王拥军 +5 位作者 赵性泉 万虹 孙异临 历俊华 毛淑静 刘丽萍 《首都医科大学学报》 CAS 2005年第3期326-329,共4页

目的采用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)体外诱导骨髓基质细胞(BMSC)的方法,探讨BMSC向内皮细胞分化的可行性.方法在无菌条件下采集SD大鼠(雄性,体质量150～160 g,10只)的长骨骨髓,获得骨髓细胞.实验组细胞以高质量浓度rhG... 目的采用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)体外诱导骨髓基质细胞(BMSC)的方法,探讨BMSC向内皮细胞分化的可行性.方法在无菌条件下采集SD大鼠(雄性,体质量150～160 g,10只)的长骨骨髓,获得骨髓细胞.实验组细胞以高质量浓度rhGM-CSF(400 μg/L)为诱导剂,进行体外诱导分化;对照组培养基为常规1640培养液.培养至第8天,收集细胞后分别应用扫描电镜和透射电镜观察实验组分化后细胞的超微结构,并对分化后的细胞进行内皮细胞的鉴定.结果实验组细胞在透射电镜下可见内皮细胞结构特征及特征性的W-P小体结构,扫描电镜下可见细胞呈多边形,细胞膜表面有大量的细长丝状伪足及短小的微绒毛,符合内皮细胞的特点.结论 BMSC在高浓度的rhGM-CSF诱导作用下分化的细胞具有内皮细胞的形态学特征. 展开更多

关键词 体外诱导分化 骨髓基质细胞 内皮细胞 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 结构研究 rhGM-CSF 透射电镜观察 BMSC 形态学特征 细胞分化 SD大鼠 骨髓细胞 质量浓度 超微结构 扫描电镜 结构特征 胞膜表面 诱导作用 组细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

氟脲嘧啶促进Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞GM-CSF的表达 被引量：1

9

作者 杜楠 裴雪涛 +3 位作者 孙君重 付艳 赵晖 王希良 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第5期428-432,共5页

目的:探索氟脲嘧啶(5-FU)对Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞造血因子GM-CSF表达的促进作用,以寻找促进化疗所致造血损伤恢复的方法。方法:构建携带Egr-1调控序列启动的GM-CSF和EGFP双顺反子基因的重组真核表达载体(pCIneo-Egr-1-EGFP-IRE... 目的:探索氟脲嘧啶(5-FU)对Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞造血因子GM-CSF表达的促进作用,以寻找促进化疗所致造血损伤恢复的方法。方法:构建携带Egr-1调控序列启动的GM-CSF和EGFP双顺反子基因的重组真核表达载体(pCIneo-Egr-1-EGFP-IRES-GM-CSF,Egr-EG),通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL,挑出G418抗性的阳性克隆(HFCL/EG)。采用RT-PCR检测5-FU处理的HFCL/EG细胞GM-CSFmRNA表达,用FACS和倒置荧光显微镜观察5-FU诱导HFCL/EG细胞EGFP表达的阳性细胞。在加入5-FU的HFCL/EG细胞培养体系中,用ELISA方法检测GM-CSF的含量;将从脐血中分离的单个核细胞接种于5-FU处理后的HFCL/EG培养上清液培养基中,观察其对GM-CFU的增殖作用;采用活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸检测5-FU通过活性氧诱导Egr-1启动子CArG序列调控下游基因表达的特异性。结果:构建了Egr-1调控序列启动的双顺反子基因表达载体Egr-EG,获得其转染细胞HFCL/EG。在5-FU处理的HFCL/EG细胞中,RT-PCR显示其GM-CSFmRNA表达增强,流式细胞术证实有EGFP的显著表达。在5-FU处理后,HFCL/EG细胞培养上清液GM-CSF含量和GM-CFU形成数量分别较未处理细胞能明显增高(P<0.01);在5-FU处理的HFCL/EG细胞中,N-乙酰半胱氨酸能明显减少GM-CSF含量(P<0.01)。结论:5-FU能促进Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞GM-CSF基因的表达,从而对化疗后的造血损伤产生一定的恢复作用。 展开更多

关键词 EGR-1 5-氟脲嘧啶 粒-巨噬细胞集落刺激因子 骨髓基质细胞 活性氧中间物

在线阅读 下载PDF 职称材料

大鼠骨髓基质细胞体外诱导分化为内皮细胞实验研究 被引量：2

10

作者 王春雪 万虹 +4 位作者 历俊华 王拥军 毛淑静 刘丽萍 翟晶 《中国康复理论与实践》 CSCD 2004年第8期458-460,i001,共4页

目的探讨骨髓基质细胞 (BMSC)向内皮细胞分化的可行性。方法无菌条件下获取BMSC ,实验组以 40 0ng/ml重组人粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)为诱导剂 ,进行体外诱导分化 ;对照组用 164 0培养液培养。 8d后进行免疫组化染色进... 目的探讨骨髓基质细胞 (BMSC)向内皮细胞分化的可行性。方法无菌条件下获取BMSC ,实验组以 40 0ng/ml重组人粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)为诱导剂 ,进行体外诱导分化 ;对照组用 164 0培养液培养。 8d后进行免疫组化染色进行特异性内皮细胞标志物鉴定。结果分化后的细胞在光镜下具有内皮细胞的形态学特征 ;免疫组化染色证实实验组诱导后的细胞为内皮细胞。结论BMSC在高浓度rhGM CSF作用下 。 展开更多

关键词 重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM—CSF) 骨髓基质细胞(BMSC) 内皮细胞 冯威勒不兰特因子 (vWF) 因子Ⅷ相关抗原(FⅧ-R Ag)

在线阅读 下载PDF 职称材料

骨髓基质细胞输注对外周血干细胞移植造血恢复的影响

11

作者 宫立众 孙士红 +3 位作者 程天民 粟永萍 罗成基 郭朝华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期248-250,共3页

为观察骨髓基质细胞输注对外周血干细胞移植 (PBSCT)后造血恢复的影响 ,经放、化疗预处理的BALB/c小鼠 ,分别输入动员的外周血干细胞(PBSCT组 )、外周血干细胞联合扩增的骨髓基质细胞 (实验组 ) ,观察受体鼠 4周的生存率、骨髓有核细胞 ... 为观察骨髓基质细胞输注对外周血干细胞移植 (PBSCT)后造血恢复的影响 ,经放、化疗预处理的BALB/c小鼠 ,分别输入动员的外周血干细胞(PBSCT组 )、外周血干细胞联合扩增的骨髓基质细胞 (实验组 ) ,观察受体鼠 4周的生存率、骨髓有核细胞 (BMNC)、粒细胞巨噬细胞集落形成单位 (CFU GM)、成纤维细胞集落形成单位 (CFU F)、外周血白细胞计数等指标。结果显示 ,实验组的生存率、BMNC、CFU GM、CFU F较PBSCT组显著升高 (P <0 0 5 ) ;白细胞的最低值较PBSCT组高 (P <0 0 1) ,白细胞恢复较PBSCT组快 (P <0 0 1)。 展开更多

关键词 外周血干细胞移植 骨髓基质细胞 粒细胞集落刺激因子 小鼠 BMSC PBSCT 影响

在线阅读 下载PDF 职称材料

bFGF对造血基质细胞造血调节作用的影响 被引量：1

12

作者 谭鹤长 雷军 +1 位作者 蒋德昭 王绮如 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期83-84,共2页

关键词 碱性成纤维细胞生长因子 造血基质细胞 粒-巨噬系集落形成单位

在线阅读 下载PDF 职称材料

逆转录病毒介导的GM-CSF在骨髓基质细胞中基因转移与表达 被引量：1

13

作者 杜楠 王庆余 +2 位作者 刘昕 罗成基 章波 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期384-388,共5页

为了探索逆转录病毒介导的GM-CSF在骨髓基质细胞(BMSC)中的基因转移与表达,采用电穿孔法将重组质粒pLXSN/GM和空载体pLXSN转染PA317细胞,经G418筛选,用抗性克隆培养上清液成功地感染了BMSC。经PCR和Southern blot分析证实BMSC基因组中... 为了探索逆转录病毒介导的GM-CSF在骨髓基质细胞(BMSC)中的基因转移与表达,采用电穿孔法将重组质粒pLXSN/GM和空载体pLXSN转染PA317细胞,经G418筛选,用抗性克隆培养上清液成功地感染了BMSC。经PCR和Southern blot分析证实BMSC基因组中整合有外源NeoR和GM-CSF cDNA,原位杂交显示有较强的GM-CSFmRNA的表达,经增殖法和集落形成法表明转染的BMSC分泌较多的GM-CSF。据此表明,转染的BMSC较未转染BMSC具有更强的支持造血功能,提示BMSC可作为造血功能障碍基因治疗的靶细胞,为GM-CSF基因治疗血液病奠定基础。 展开更多

关键词 逆转录病毒载体 骨髓基质细胞 粒-巨噬细胞集落刺激因子 基因转移 基因表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

TC-1基质细胞系对造血干、祖细胞的刺激作用

14

作者 高春记 何一心 +1 位作者 任红光 宋增璇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1994年第1期57-62,共6页

TC-1基质细胞系是从小鼠骨髓细胞长期液体培养中分离出来的细胞系,其条件培养液中具有多种生物活性物质,被认为多因子分泌的细胞系。TC-1条件培养液与正常小鼠骨髓细胞共同孵育,然后通过粒、单系祖细胞(CFU-GM)半固体培养试验,脾结节形... TC-1基质细胞系是从小鼠骨髓细胞长期液体培养中分离出来的细胞系,其条件培养液中具有多种生物活性物质,被认为多因子分泌的细胞系。TC-1条件培养液与正常小鼠骨髓细胞共同孵育,然后通过粒、单系祖细胞(CFU-GM)半固体培养试验,脾结节形成试验,放射保护试验及流式细胞仪测定骨髓细胞的周期特点,证实了TC-1细胞系能分泌粒、单系集落刺激活性物质(GM-CSA)及体外对多能造血干细胞具有保存作用。 展开更多

关键词 TC-1基质细胞系 粒、单系集落形成单位 脾结节形成单位 放射保护试验 流式细胞仪

在线阅读 下载PDF 职称材料

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对结肠癌肝转移的促进作用及其可能机制 被引量：7

15

作者 丁欣 吕忠霖 +8 位作者 许可 侯春梅 肖鹤 王仁喜 韩根成 冯健男 黎燕 沈倍奋 陈国江 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期56-61,共6页

目的:探讨粒细胞-巨噬细胞集落因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)对结肠癌肝转移的促进作用及其可能机制。方法:采用稳定转染方法将GM-CSF基因以及靶向GM-CSF的sh RNA分别导入人结肠癌细胞系HCT116和SW480... 目的:探讨粒细胞-巨噬细胞集落因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)对结肠癌肝转移的促进作用及其可能机制。方法:采用稳定转染方法将GM-CSF基因以及靶向GM-CSF的sh RNA分别导入人结肠癌细胞系HCT116和SW480,用ELISA法检测GM-CSF表达水平。脾内注射结肠癌细胞建立结肠癌肝转移模型,部分模型小鼠隔天腹腔注射不同剂量(3、0.6μg)的重组人GM-CSF。模型建立后4周后观察肝大体及肿瘤转移灶,实时荧光定量PCR检测神经钙黏素(Ncadherin)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)的表达,Western blotting检测上皮钙黏素(E-cadherin)的表达。结果:根据GM-CSF表达量建立GM-CSF低、中、高表达细胞系(GMlo、GMint、GMhiHCT116)和GMKDSW480细胞系。大体和病理结果均显示,接种高表达GM-CSF的HCT116细胞或外源性给予GM-CSF明显增加小鼠结肠癌肝转移灶数量,而敲低GM-CSF的作用则相反。GM-CSF能够显著上调N-cadherin和MMP2的表达,同时下调E-cadherin的表达(P<0.05)。结论:GM-CSF能够促进结肠癌移植瘤的肝转移,该效应可能与E-cadherin表达的下调和N-cadherin以及MMP2表达的上调有关。 展开更多

关键词 粒细胞-巨噬细胞集落因子 结肠癌 肝转移 上皮钙黏素 神经钙黏素 基质金属蛋白酶2

在线阅读 下载PDF 职称材料

胞质M-CSF诱导HeLa细胞侵袭和迁移

16

作者 张蒙夏 刘琪 +2 位作者 吴海燕 李响 唐圣松 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1007-1015,共9页

为探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对人宫颈癌细胞(He La细胞)侵袭和迁移的影响及机制,采用胞质定位空载体p CMV/cyto/myc与重组载体p CMV/cyto/myc-M-CSF稳定转染He La细胞株,建立稳定高表达胞质M-CSF的细胞系(He La-M细胞).经Transw... 为探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对人宫颈癌细胞(He La细胞)侵袭和迁移的影响及机制,采用胞质定位空载体p CMV/cyto/myc与重组载体p CMV/cyto/myc-M-CSF稳定转染He La细胞株,建立稳定高表达胞质M-CSF的细胞系(He La-M细胞).经Transwell实验观察胞质M-CSF对He La细胞侵袭和迁移能力的影响,逆转录-聚合酶链式反应及蛋白质印迹检测细胞Rho三磷酸鸟苷酶(Rho GTPases)及基质金属酶的表达,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2的活性.结果显示,与转染空载体的He La细胞(He La-C细胞)和对照组He La细胞比较,胞质M-CSF的高表达可明显增强He La细胞在体外的侵袭和迁移能力,其机制与Rho GTPases的活化,以及MMP2表达上调及其活性增高密切相关. 展开更多

关键词 巨噬细胞集落刺激因子 宫颈癌 基质金属蛋白酶2 侵袭 迁移

在线阅读 下载PDF 职称材料

M-CSF促进RAW 264.7细胞MMP-9的分泌及其可能机制 被引量：6

17

作者 王春 许灿新 +3 位作者 彭翠英 秦旭平 李凯 廖端芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期947-951,共5页

目的探讨巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)致动脉粥样硬化的作用是否与其影响基质金属蛋白酶(MMP)表达和活性改变有关及其可能机制。方法应用明胶酶图分析方法观察MCSF和(或)PD98059对体外培养的RAW264.7细胞MMP9活性的影响;Westerblot检测M... 目的探讨巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)致动脉粥样硬化的作用是否与其影响基质金属蛋白酶(MMP)表达和活性改变有关及其可能机制。方法应用明胶酶图分析方法观察MCSF和(或)PD98059对体外培养的RAW264.7细胞MMP9活性的影响;Westerblot检测MCSF和(或)PD98059对体外培养的RAW264.7细胞pERK1/2表达的影响。结果MCSF能增强RAW264.7细胞MMP9的活性,并呈一定的剂量依赖性;同时MCSF也呈时间、浓度依赖性促进pERK1/2的表达;PD98059不仅阻断了ERK1/2的磷酸化,而且也降低了MMP9的活性。结论MCSF可诱导RAW264.7细胞MMP9的活性增加,其机制可能与MCSF激活MAPKERK1/2通路有关。 展开更多

关键词 巨噬细胞集落刺激因子 基质金属蛋白酶 细胞外信号调节激酶1/2 动脉粥样硬化 巨噬细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

阿霉素诱导Egr-1启动子调控GM-CSF基因表达的实验研究 被引量：2

18

作者 杜楠 裴雪涛 +3 位作者 孙君重 付艳 赵晖 王希良 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期1165-1169,共5页

本研究探讨阿霉素(ADM)诱导Egr-1启动子调控造血生长因子基因表达对化疗后造血损伤的修复作用。构建携带Egr-1调控序列启动的GM-CSF和eGFP双顺反子基因pCIneo真核表达载体(Egr-EG);通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL,挑出G418抗性的阳... 本研究探讨阿霉素(ADM)诱导Egr-1启动子调控造血生长因子基因表达对化疗后造血损伤的修复作用。构建携带Egr-1调控序列启动的GM-CSF和eGFP双顺反子基因pCIneo真核表达载体(Egr-EG);通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL,挑出G418抗性的阳性克隆(HFCL/EG);采用流式细胞仪和倒置荧光显微镜观察eGFP绿色荧光表达的阳性细胞;在加入ADM的HFCL/EG细胞培养体系中,用ELISA方法检测GM-CSF的含量;将从脐血中分离的单个核细胞接种于含有ADM后的HFCL/EG上清培养液中,观察其对CFU-GM的增殖作用;采用活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸鉴定化疗通过活性氧诱导Egr-1启动子CArG序列调控下游基因表达的特异性。结果表明:成功地构建了Egr-1调控序列启动的双顺反子基因表达载体(Egr-EG);在HFCL/EG细胞中有外源性基因eGFP和GM-CSF的表达,在加入ADM后HFCL/EG细胞培养上清液中GM-CSF含量和CFU-GM形成数量较未加ADM组明显增高(p<0.01);在ADM处理的HFCL/EG细胞中,N-乙酰半胱氨酸明显降低GM-CSF水平。结论:ADM诱导Egr-1启动子调控的造血生长因子基因表达对化疗后的造血损伤具有一定的修复作用。 展开更多

关键词 EGR-1 阿霉素 粒-巨噬细胞集落刺激因子 骨髓基质细胞 活性氧中间物

在线阅读 下载PDF 职称材料

CD34阳性骨髓干细胞归巢兔栓塞肺组织 被引量：1

19

作者 顾俊 倪松石 黄华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1309-1314,共6页

目的观察骨髓干细胞(BMSCs)动员后向栓塞肺组织归巢的情况,初步探讨BMSCs归巢栓塞肺组织的可能机制。方法选取30只健康的中国大耳白兔,雌雄不拘,随机分成2组:肺血栓栓塞症(PTE)组(模型组)、PTE+粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员组(实验组)... 目的观察骨髓干细胞(BMSCs)动员后向栓塞肺组织归巢的情况,初步探讨BMSCs归巢栓塞肺组织的可能机制。方法选取30只健康的中国大耳白兔,雌雄不拘,随机分成2组:肺血栓栓塞症(PTE)组(模型组)、PTE+粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员组(实验组),每组15只。经股静脉穿刺置管注入自体血栓,建立兔急性PTE模型。其中,模型组仅建立PTE模型;实验组在建立模型前4d每天及建立模型后即刻按10μg/(kg·d)皮下注射G-CSF,共5d。两组均于建立模型后24h处死动物,观察大体标本,行HE染色进行病理检查,用免疫组化法检测肺组织栓塞区、边缘区、正常区CD34及SDF-1的表达,使用医用图像处理系统对肺组织CD34和SDF-1的免疫组化染色切片进行图像分析,计算其相对含量。结果 (1)大体标本观察:两组兔肺组织均存在损伤性改变,表现为片状出血灶、局部肺组织苍白区、肺组织膨胀不全等。(2)光镜下病理观察:两组兔肺组织栓塞区均表现为肺间质水肿充血、肺泡腔出血渗出,其中实验组栓塞区肺间质中可见较多体积较大的单个核细胞浸润。(3)肺组织CD34免疫组化染色与图像分析结果:CD34主要表达在栓塞区,边缘区少量表达,正常区很少表达。实验组栓塞区CD34的表达高于模型组(P<0.01),且实验组栓塞区内浸润的CD34阳性单个核细胞较多,而模型组少见。(4)肺组织SDF-1免疫组化染色与图像分析结果:SDF-1主要表达在栓塞区,边缘区、正常区均无表达。实验组栓塞区SDF-1的表达高于模型组(P<0.01)。结论 PTE发生后存在CD34阳性BMSCs向栓塞肺组织归巢现象;PTE发生后肺组织栓塞区SDF-1表达加强可能是吸引CD34阳性BMSCs归巢栓塞肺组织的机制之一;使用G-CSF动员后能加强PTE后肺组织栓塞区SDF-1的表达,从而吸引更多的CD34阳性BMSCs归巢到栓塞肺组织。 展开更多

关键词 肺栓塞 粒细胞集落刺激因子 骨髓干细胞 归巢 基质细胞衍生因子1 CD34抗原

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠胚胎成纤维细胞饲养层、Matrigel及贴附因子包被培养板培养小鼠胚胎干细胞的对比研究

20

作者 赵芳 陈坤琳 +9 位作者 邢光东 钱勇 曹少先 李隐侠 孟春花 张建丽 张俊 桂红兵 仲跻峰 王慧利 《黑龙江动物繁殖》 2020年第5期1-7,共7页

为进一步优化细胞外基质,建立胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)稳定的体外培养体系,试验分别采用小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)饲养层、基质胶(Matrigel)和贴附因子(attachment factor,AF)细胞培养板,以N... 为进一步优化细胞外基质,建立胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)稳定的体外培养体系,试验分别采用小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)饲养层、基质胶(Matrigel)和贴附因子(attachment factor,AF)细胞培养板,以N2B27为基础培养基,评估和比较不同处理对小鼠ESCs(mESCs)自我更新及多能性维持的影响。结果表明:在KSR浓度为5%的N2B27培养基中,MEFs饲养层的mESCs形态立体,边缘清晰,呈规则的圆顶状;Matrigel、AF细胞培养板培养的mESCs形态立体,呈集落样生长。MEFs饲养层培养的mESCs传代后黏附快,集落形成显著快于Matrigel、AF细胞培养板,AF细胞培养板培养的mESCs黏附少,集落形成慢。免疫荧光染色结果显示,3种处理的mESCs均表达Oct4和Sox2蛋白,但AF细胞培养板培养的mESCs中Oct4、Sox2和Nanog的转录表达水平低于Matrigel细胞培养板,其中Sox2和Nanog差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。说明AF可用于mESCs培养,但在细胞黏附、增殖速率及多能因子表达上与MEFs、Matrigel有差异。 展开更多

关键词 小鼠 胚胎干细胞 细胞外基质 克隆集落 多能性因子

在线阅读 下载PDF 职称材料