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具有良好细胞相容性的脱细胞血管支架的制备 被引量:3
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作者 方宁涛 潘銮凤 +1 位作者 谢尚喆 吴春根 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期547-551,共5页
目的制备具有良好细胞相容性的脱细胞血管支架材料,为构建组织工程血管奠定基础。方法用含有脱氧胆酸钠、SDS、EDTA的低渗液和等渗液以及核酸酶对猪的胸主动脉进行脱细胞处理,使用HE、Movat五色法、DAPI染色及电镜观察处理结果。以MTT... 目的制备具有良好细胞相容性的脱细胞血管支架材料,为构建组织工程血管奠定基础。方法用含有脱氧胆酸钠、SDS、EDTA的低渗液和等渗液以及核酸酶对猪的胸主动脉进行脱细胞处理,使用HE、Movat五色法、DAPI染色及电镜观察处理结果。以MTT法分析脱细胞溶液的细胞毒性,通过种植内皮和平滑肌细胞,分析支架的细胞相容性。结果上述方法使用的脱细胞溶液细胞毒性低;经该法处理后,血管的细胞成分完全去除,胶原纤维、弹性纤维、糖蛋白等主要基质成分充分保留,组织结构完整,内皮细胞和平滑肌细胞可以在上面黏附生长,形成完整的细胞层。结论利用脱氧胆酸钠、SDS、EDTA和核酸酶联合消化的方法,可制备出基质成分充分保留、细胞相容性优良的脱细胞血管支架,适于构建组织工程血管。 展开更多
关键词 血管组织工程 脱细胞血管基质 生物材料 生物相容性
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肝素包被对异种脱细胞血管移植后内膜增生的影响
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作者 蔡巍巍 陈勇兵 +2 位作者 王亚宏 唐韵 陈长志 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1420-1424,共5页
目的探讨肝素包被对异种脱细胞血管移植后内膜增生的影响。方法将截取的犬双侧颈动脉进行脱细胞处理,对其中部分颈动脉进一步实施肝素包被处理。18只新西兰大白兔随机分为肝素包被组(移植经肝素包被处理的脱细胞血管,n=9)和无肝素包被组... 目的探讨肝素包被对异种脱细胞血管移植后内膜增生的影响。方法将截取的犬双侧颈动脉进行脱细胞处理,对其中部分颈动脉进一步实施肝素包被处理。18只新西兰大白兔随机分为肝素包被组(移植经肝素包被处理的脱细胞血管,n=9)和无肝素包被组(移植未经肝素包被处理的脱细胞血管,n=9)。两组动物均接受双侧颈动脉移植,血管吻合后结扎左侧两吻合口间颈动脉(结扎侧),右侧则不结扎(未结扎侧)。于术后第1、3、12周分别进行血管多普勒超声检查,观察移植血管通畅情况并测量血管内径,同时计算血流峰值速度(PSV)、阻力指数(RI)和搏动指数(PI)等血流动力学参数。术后12周末处死所有动物,取双侧移植物血管,制备标本观察组织形态学改变,计算内膜厚度/(内膜厚度十中膜厚度)[I/(I+M)],同时进行统计学分析。结果无肝素包被组术后血管内径,除结扎侧术后第1周外均较术前明显缩小;各时间点未结扎侧均较结扎侧明显缩小;以上差异均有统计学意义(P<0.05)。肝素包被组术后血管内径,仅未结扎侧于术后第3、12周时较术前明显缩小,差异有统计学意义(P<0.05)。术后第3周,肝素包被组RI明显小于未肝素包被组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。无肝素包被组未结扎侧内膜增生明显,I/(I+M)值较结扎侧明显增大,差异有统计学意义(P<0.001);肝素包被组结扎侧与未结扎侧I/(I+M)比较差异无统计学意义。结论脱细胞血管移植物在不同剪切力作用下内膜增生情况也不相同,低流速对移植物血管内膜增生具有促进作用;肝素包被处理可有效抑制内膜增生的发生。 展开更多
关键词 肝素 脱细胞血管 小口径血管 内膜增生 多普勒超声
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CD34抗体修饰的脱细胞血管支架的体内内皮化
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作者 张蔓菁 刘宾 +2 位作者 杨阳 李杨 鲁开化 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期369-373,共5页
目的研究CD34抗体修饰的脱细胞血管支架植入动物体内后募集循环中的内皮祖细胞参与再内皮化过程的性能。方法新鲜的羊前肢动脉经反复冻融和超高压处理,SDS彻底去除细胞,通过光交联法将CD34抗体固定于脱细胞血管内腔面。20只新西兰大白... 目的研究CD34抗体修饰的脱细胞血管支架植入动物体内后募集循环中的内皮祖细胞参与再内皮化过程的性能。方法新鲜的羊前肢动脉经反复冻融和超高压处理,SDS彻底去除细胞,通过光交联法将CD34抗体固定于脱细胞血管内腔面。20只新西兰大白兔右下腹做一带蒂皮瓣,皮瓣供血动脉为股动脉的分支血管,血管移植部位选取股动脉,做1cm长的全段缺损,随机分为2组(n=10),实验组选用CD34抗体修饰的脱细胞血管支架,对照组用未修饰的脱细胞血管支架,显微外科端端吻合替代缺损的兔股动脉。术后通过对皮瓣色泽质地的观察,了解皮瓣的血供情况;行彩色多普勒、数字减影血管造影检查和病理切片观察移植血管的通畅情况及细胞黏附情况。结果实验组皮瓣术后血运较好,对照组皮瓣术后肿胀坏死。彩色多普勒、数字减影血管造影检查显示,实验组移植术后1周有3只动物发生血管闭塞,另7只动物在术后4周血管仍通畅、无明显狭窄;对照组术后1周无1只动物血管通畅。实验组术后4周解剖移植血管,H-E染色显示脱细胞血管支架表面形成连续融合单层细胞,管腔无明显狭窄;对照组术后1周解剖移植血管可见血栓形成,H-E染色显示血管腔内表面缺乏细胞覆盖。结论CD34抗体修饰的脱细胞血管支架在早期抗凝及通畅率上均优于未经修饰的脱细胞血管支架。 展开更多
关键词 脱细胞血管支架 CD34抗体 交联试剂 血管内皮
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应用Triton-x100加丹参酚酸B制备脱细胞血管支架及其血液相容性研究 被引量:4
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作者 赵亮 李霞飞 +2 位作者 李成成 闫欢欢 张其清 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期201-207,共7页
应用传统的Triton-x100法与应用Triton-x100和丹参酚酸B法制备脱细胞血管支架,比较这两种支架的理化性质及其血液相容性,展望应用丹参酚酸B后处理脱细胞血管支架在临床上治疗心脑血管疾病方面的应用前景,以及在组织工程血管材料方面的... 应用传统的Triton-x100法与应用Triton-x100和丹参酚酸B法制备脱细胞血管支架,比较这两种支架的理化性质及其血液相容性,展望应用丹参酚酸B后处理脱细胞血管支架在临床上治疗心脑血管疾病方面的应用前景,以及在组织工程血管材料方面的开发空间。选择SD大鼠16只,雄性,鼠龄7周,体质量250 g左右。解剖大鼠,取腹主动脉;随机分为2组,每组8个。用Triton-x100法(Tx组)、Triton-x100加入丹参酚酸B法(Tx-sal组),加工制成两种脱细胞血管支架。观察脱细胞血管支架的宏观形貌;亲水性实验测定亲水性;体外溶血实验计算体外溶血率;复钙化凝血时间实验测定复钙化凝血时间;血小板黏附实验测定动态凝血时间,以及体外血小板的黏附;补体激活实验测定补体激活程度情况;比较两组脱细胞血管支架的血液相容性。Tx组接触角为76.36°±4.65°,Tx-sal组接触角为71.26°±3.55°,Tx组接触角度数略高于Tx-sal组,差异无显著统计学意义。Tx-sal组溶血率为1.5%,Tx组溶血率为2.1%。Tx组复钙化凝血时间为(212±11.32)s,Tx-sal组复钙化凝血时间为(231±13.53)s,Tx组与Tx-sal组的复钙化凝血时间差异有显著统计学意义。Tx-sal组相比Tx组延缓了凝血时间,抗凝血性更加优良。Tx-sal组黏附的血小板数目低于Tx组的相应数目。Tx-sal组补体激活水平低。与传统的Triton-x100法制备的脱细胞血管支架相比,加入丹参酚酸B后处理的脱细胞血管支架具有更加优良的血液相容性,更适合作为组织工程材料应用于心脑血管疾病的治疗,在临床医学上的应用前景更加广阔。 展开更多
关键词 丹参酚酸B Triton-x100 脱细胞血管支架 血液相容性
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聚电解质多层膜修饰脱细胞组织工程血管的实验研究 被引量:1
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作者 刘俊 张晓膺 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1713-1718,共6页
目的·寻找制备组织工程血管的最佳脱细胞试剂,用肝素-SDF-1α聚电解质多层膜修饰脱细胞血管支架,评估其组织相容性。方法·分别用含有0.25%Triton-X100+0.25%SD(TS组)、1%SDS(SDS组)和0.5%Triton-X100+0.5%SD+0.5%SDS(STS组)的... 目的·寻找制备组织工程血管的最佳脱细胞试剂,用肝素-SDF-1α聚电解质多层膜修饰脱细胞血管支架,评估其组织相容性。方法·分别用含有0.25%Triton-X100+0.25%SD(TS组)、1%SDS(SDS组)和0.5%Triton-X100+0.5%SD+0.5%SDS(STS组)的PBS对大鼠主动脉进行脱细胞处理;以未脱细胞的大鼠主动脉作为对照组。通过苏木精-伊红染色、DNA定量和扫描电子显微镜验证最佳脱细胞试剂。用肝素-SDF-1α聚电解质多层膜修饰脱细胞血管表面,采用免疫荧光法明确聚电解质多层膜在血管表面的结合;同时,通过血小板激活测定及大鼠骨髓间充质干细胞黏附、迁移实验在体外验证其生物相容性。结果·STS组大鼠主动脉脱细胞效果最完全,同时血管的三维结构得到了很好的保留。肝素-SDF1α聚电解质多层膜能牢固结合在脱细胞血管管壁上,肝素-SDF1α修饰后的脱细胞血管明显减少了血小板在血管表面的黏附激活,增强了大鼠骨髓间充质干细胞在血管表面的黏附增殖和迁移能力。结论·含有0.5%Triton-X100+0.5%SD+0.5%SDS的PBS是最佳脱细胞试剂。肝素-SDF-1α聚电解质多层膜能很好地结合在脱细胞血管表面,其修饰的脱细胞血管具有较好的生物相容性。 展开更多
关键词 聚电解质多层膜 组织工程血管 脱细胞血管
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组织工程血管脱细胞支架主要组织相容性复合体Ⅰ抗原性的免疫组化观察 被引量:6
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作者 刘太华 张炎 +3 位作者 姜宗来 李玉泉 刘波 张秀花 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期72-74,F004,共4页
目的 :探讨组织工程血管全生物支架的免疫原性的检测方法。 方法 :取猪颈总动脉 ,剥离外膜 ,剪成 2 cm长的血管段 ,随机分为 3组 :对照组、脱细胞组和脱细胞加碱处理组 ,每组 5段。以免疫组化方法检测血管脱细胞处理前后主要组织相容性... 目的 :探讨组织工程血管全生物支架的免疫原性的检测方法。 方法 :取猪颈总动脉 ,剥离外膜 ,剪成 2 cm长的血管段 ,随机分为 3组 :对照组、脱细胞组和脱细胞加碱处理组 ,每组 5段。以免疫组化方法检测血管脱细胞处理前后主要组织相容性复合体 (MHC )的变化情况 ,并将检测结果作图像分析。 结果 :对照组血管壁 MHC 高表达 ,脱细胞处理后 MHC 明显减少。图像分析得出阳性颗粒面积与视场面积比 :对照组为 (2 4 .0 9± 6 .0 9) % ,脱细胞组为 (6 .71± 2 .1 8) % ,脱细胞加碱处理组为 (1 .6 2± 0 .76 ) % ,组间比较差别均有显著意义 (P<0 .0 1 )。 结论 :MHC 展开更多
关键词 组织工程 血管细胞支架 免疫组织化学 免疫原性 主要组织相容性复合体I 免疫排斥反应
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天然血管基质/聚己内酯复合血管支架的制备与性能表征 被引量:1
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作者 陈国宝 董刚立 +2 位作者 杨欢 陈忠敏 王富平 《重庆理工大学学报(自然科学)》 CAS 北大核心 2023年第5期308-317,共10页
将脱细胞血管基质(decellularized vascular matrix,DVM)与聚己内酯(Polycaprolactone,PCL)相复合,得到的复合支架能保留天然血管基质的血管诱导再生特性,克服降解过快的不足,扩大其在组织工程领域的应用范围。将新鲜的猪主动脉经脱细... 将脱细胞血管基质(decellularized vascular matrix,DVM)与聚己内酯(Polycaprolactone,PCL)相复合,得到的复合支架能保留天然血管基质的血管诱导再生特性,克服降解过快的不足,扩大其在组织工程领域的应用范围。将新鲜的猪主动脉经脱细胞、脱脂等一系列处理后得到DVM粉末,再将其经酶解得到脱细胞血管基质凝胶(decellularized vascular matrix gel,DVMG),将用冰醋酸配置的PCL溶液与DVMG按照不同比例混合,将混合溶液反复包裹模具,室温中冷却后得到不同组的复合血管支架。共制备出4组DVMG/PCL的支架材料,通过扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)观察发现支架表面较为均匀,截面结构有明显孔隙,利于细胞黏附与迁移。通过力学拉伸实验检测PCL支架、DVMG∶PCL分别为1∶1,1.5∶1,5∶1的各组支架的拉伸模量值依次为49.00±9.52 MPa,46.29±3.08 MPa,38.77±2.07 MPa和31.18±2.80 MPa。体外降解实验显示:4组支架材料均有一定的降解能力,降解速率与DVMG的含量有关,说明改变DVMG与PCL的比例可以制备出不同力学性能、降解性能的复合血管支架。相较于单纯的PCL支架,复合支架中DVMG的含量越高,支架的刚度越低,降解速率越快,DVMG/PCL支架的整体性能得到一定改善。研究结果对于进一步扩大DVM和DVMG的应用范围,改善高分子材料的生物学响应性能具有参考价值。 展开更多
关键词 血管支架 脱细胞血管基质 聚己内酯 力学特征 组织工程
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