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脱细胞膀胱基质复合大鼠骨髓间充质干细胞体外构建组织工程化吊带治疗压力性尿失禁的初步研究 被引量:4
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作者 王颖楠 范雪梅 +1 位作者 赵敏 徐惠成 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期2269-2273,共5页
目的探讨脱细胞膀胱基质(urinary bladder matrix,UBM)复合大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesen-chymal stem cells,BMSCs)构建组织工程化吊带治疗压力性尿失禁的可行性。方法采用密度梯度离心法结合贴壁培养法体外分离、培养和扩增... 目的探讨脱细胞膀胱基质(urinary bladder matrix,UBM)复合大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesen-chymal stem cells,BMSCs)构建组织工程化吊带治疗压力性尿失禁的可行性。方法采用密度梯度离心法结合贴壁培养法体外分离、培养和扩增BMSCs,流式细胞术检测BMSCs免疫表型,将第3代BMSCs与UBM复合培养,7 d后通过光镜和电镜观察细胞在材料上的生长情况,进一步应用万能力学测试仪检测所构建吊带的最大负荷、杨氏模量、伸展性等机械特性,另以UBM负载大鼠膀胱平滑肌细胞株(smooth muscle cells,SMCs)构建SMCs吊带、单纯UBM及聚丙烯材料行效果比较。结果分离培养的BMSCs呈长梭形,折光性好,增殖旺盛,具有成体干细胞特性,细胞表面标志物CD29阳性,CD45和CD31阴性。UBM去细胞彻底,复合BMSCs或SMCs均可获得生长良好的细胞。机械性状检测表明,单纯UBM和复合BMSCs的UBM吊带与SMCs吊带及聚丙烯材料相比,最大负荷下降[(0.025±0.003)、(0.018±0.004)kN vs(0.030±0.003)、(0.143±0.034)kN,P<0.01];杨氏模量下降[(170.820±61.735)、(103.624±52.779)MPa vs(490.730±80.969)、(900.100±192.402)MPa,P<0.01];伸展性提高[(16.418±1.014)、(22.684±6.848)mm vs(9.498±1.384)、(2.975±0.401)mm,P<0.01]。结论成功分离、培养了大鼠BMSCs,并鉴定了其干性。构建的干细胞吊带与SMCs吊带及聚丙烯材料相比,其伸展性良好。 展开更多
关键词 骨髓间充细胞 脱细胞膀胱基质 形态学特性 机械特性
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负载抗sca-1抗体和碱性成纤维细胞生长因子的脱细胞膀胱基质的生物性能研究 被引量:1
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作者 李建奎 梁志清 徐惠成 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第22期2176-2181,共6页
目的观察负载抗sca-1抗体(anti-sca-1)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)-脱细胞膀胱基质(urinary bladder matrix,UBM)生物支架的生物学性能,探讨其作为新型盆底修复材料的可能性。方法通过双特异性化... 目的观察负载抗sca-1抗体(anti-sca-1)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)-脱细胞膀胱基质(urinary bladder matrix,UBM)生物支架的生物学性能,探讨其作为新型盆底修复材料的可能性。方法通过双特异性化学交联试剂4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐(sulfosuccinimidyl 4-[N-maleimidomethyl]cyclohexane-1-carboxylate,sulfosmcc)将anti-sca-1和b FGF特异性结合到UBM上,得到anti-sca-1/b FGF-UBM生物支架。通过扫描电子显微镜观察生物支架表面结构,CCK-8(cell counting kit-8)间接检测体外富集sca-1阳性细胞情况,免疫荧光观察支架诱导小鼠骨髓间充质干细胞(mouse mesenchymal stem cells,m MSCs)分化成熟情况。结果扫描电子显微镜显示anti-sca-1和b FGF能特异性的结合到UBM上。anti-sca-1和b FGF组荧光强度明显高于对照组(P<0.05)。anti-sca-1/b FGF-UBM生物支架富集的sca-1阳性细胞明显较对照组多(P<0.05)。免疫荧光观察结果提示anti-sca-1/b FGF-UBM生物支架可以促进m MSCs向平滑肌细胞分化。结论 anti-sca-1/b FGF-UBM生物支架显示出了良好的生物性能,既能富集sca-1阳性细胞,又能进一步促进细胞分化成熟。 展开更多
关键词 抗sca-1抗体 碱性成纤维细胞生长因子 脱细胞膀胱基质 生物支架 生物性能
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猪脱细胞膀胱基质的研究现状
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作者 邵彬 焦海燕 +1 位作者 李前勇 葛良鹏 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期133-138,共6页
猪脱细胞膀胱基质(urinary bladder matrix,UBM)是细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的一种,目前研究发现其是盆底高分子补片的理想替代材料,具有无侵蚀性、组织相容性好、能诱导组织再生、减少瘢痕形成等优点,但也有易被人体吸收... 猪脱细胞膀胱基质(urinary bladder matrix,UBM)是细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的一种,目前研究发现其是盆底高分子补片的理想替代材料,具有无侵蚀性、组织相容性好、能诱导组织再生、减少瘢痕形成等优点,但也有易被人体吸收等缺点。通过使用一些合理的方法可以有效改善UBM的生物性能和力学性能,使其更有利于患者疾病的康复。本文从UBM的结构和功能、制作方法、实际应用等方面介绍UBM的研究发展现状。 展开更多
关键词 脱细胞膀胱基质 材料 方法
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膀胱脱细胞基质片的制备及其与尿路上皮细胞的联合培养 被引量:1
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作者 杨海超 杨新妹 +2 位作者 许汉标 杨中华 王行环 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第19期3207-3209,共3页
目的:将培养扩增的猪膀胱移行上皮细胞接种到自制的膀胱脱细胞基质(BAM)片上,探讨此法体外构建用于新膀胱黏膜移行上皮化改造的组织工程复合物的可行性。方法:取新鲜猪膀胱制备BAM片,将原代猪膀胱移行上皮细胞进行体外培养、扩增后接种... 目的:将培养扩增的猪膀胱移行上皮细胞接种到自制的膀胱脱细胞基质(BAM)片上,探讨此法体外构建用于新膀胱黏膜移行上皮化改造的组织工程复合物的可行性。方法:取新鲜猪膀胱制备BAM片,将原代猪膀胱移行上皮细胞进行体外培养、扩增后接种到BAM片上,培养成多层细胞结构的组织工程复合物。通过组织学观察,了解所制备的BAM结构及细胞在BAM片支架上的黏附及生长情况。结果:此法制备的BAM片具有较完整的胶原结构。细胞在BAM片上黏附、生长和增殖良好,可形成多层细胞的组织工程复合物。结论:该方法可成功培养猪膀胱移行上皮细胞。制备的BAM片生物相容性良好。膀胱移行上皮细胞与BAM片联合培养构建成具有多层细胞的组织工程膀胱黏膜替代物,有望用于新膀胱的移行上皮重建。 展开更多
关键词 上皮细胞 膀胱细胞 组织工程 膀胱黏膜 生物相容性
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丝素蛋白/膀胱脱细胞基质/透明质酸复合纤维支架的制备及生物学性能研究 被引量:4
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作者 蒋丹 黄建文 +3 位作者 邵惠丽 胡学超 宋鲁杰 张耀鹏 《功能材料》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第6期6124-6128,共5页
以丝素蛋白(RSF)/膀胱脱细胞基质(BAM)/透明质酸(HA)水溶液为纺丝液,通过静电纺丝法制备RSF/BAM/HA复合纤维支架。通过扫描电子显微镜、ELISA、MTT以及荧光显微镜对支架的形貌和体外生物学性能进行表征。结果表明,3组分比例不变时,纺丝... 以丝素蛋白(RSF)/膀胱脱细胞基质(BAM)/透明质酸(HA)水溶液为纺丝液,通过静电纺丝法制备RSF/BAM/HA复合纤维支架。通过扫描电子显微镜、ELISA、MTT以及荧光显微镜对支架的形貌和体外生物学性能进行表征。结果表明,3组分比例不变时,纺丝液浓度对纤维支架形貌影响不明显;从支架中成功检测出血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍化生长因子(PDGF-BB)和角化细胞生长因子(KGF)及其缓释行为曲线;这些生物活性因子使RSF/BAM/HA复合纤维支架比纯RSF支架更有利于细胞的粘附与增殖。 展开更多
关键词 丝素蛋白 膀胱细胞 透明 静电纺丝 生长因子
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人骨髓间充质干细胞在兔膀胱脱细胞基质微环境中的生物学特性 被引量:1
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作者 谭云鹤 邢俊平 郭子宽 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期55-59,共5页
目的利用兔膀胱脱细胞基质(bladder acellular matrix graft,BAMG)构建微环境,从细胞增殖能力、表面标记物及分子蛋白水平探讨其对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow-derived stem cells,hBMSCs)的影响。方法制备BAMG浸泡液培养基,... 目的利用兔膀胱脱细胞基质(bladder acellular matrix graft,BAMG)构建微环境,从细胞增殖能力、表面标记物及分子蛋白水平探讨其对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow-derived stem cells,hBMSCs)的影响。方法制备BAMG浸泡液培养基,MTT法检测其对hBMSCs增殖的影响;流式细胞仪检测hBMSCs表面标志物CD44、CD45、CD73及PDGFRβ的表达;RT-PCR检测BAMG微环境对PPAR、OCN、α-SMA等基因表达的影响,Western blot检测不同处理方法 OCT-4蛋白的表达情况。结果 hBMSCs与BAMG有良好的相容性;实验组与对照组细胞曲线均呈"S"型增殖,于第3天进入快速增殖期,第7天趋于平稳;两组细胞CD44、CD45、CD73、PDGFRβ的表达量基本一致,差异不具有统计学意义;OCN、PPAR、α-SMA两组均表达目的基因;Western blot法检测亦显示OCT-4阳性表达。结论 hBMSCs在兔BAMG的微环境中仍能良好保持原有的生物学特性,将该种子细胞与基质材料结合可构建需要的组织材料,为泌尿系统组织工程修复提供可能。 展开更多
关键词 人骨髓间充细胞 膀胱细胞 RT-PCR 生物学特性 OCT-4
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网膜包裹对骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质管状移植物的促血管化作用 被引量:1
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作者 李欣慧 喻雄杰 +2 位作者 俞远东 张军 吴光 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期706-712,共7页
目的探讨网膜包裹对骨髓间充质干细胞-膀胱脱细胞基质(BMSCs-BAM)管状移植物的血管化作用。方法将体外培养的BMSCs种植于已制备的BAM支架上,进而制作成管状移植物。选取30只健康新西兰白兔,随机分为3组,每组10只,实验组:网膜包裹BMSCs-... 目的探讨网膜包裹对骨髓间充质干细胞-膀胱脱细胞基质(BMSCs-BAM)管状移植物的血管化作用。方法将体外培养的BMSCs种植于已制备的BAM支架上,进而制作成管状移植物。选取30只健康新西兰白兔,随机分为3组,每组10只,实验组:网膜包裹BMSCs-BAM管状移植物;对照组:网膜包裹BAM管状移植物;空白组:网膜包裹硅胶导管。分别于移植后的第4周和第8周取材,Western blotting和免疫组化技术检测移植物的血管内皮生长因子(VEGF)蛋白、CD34表达及微血管密度。结果①实验组VEGF蛋白表达高于对照组和空白组,对照组VEGF蛋白表达高于空白组,三组间差异均具有统计学意义[F(2,15)=5.314,P=0.017];②实验组CD34表达阳性的微血管数量高于对照组和空白组,且血管之间连接更紧密,同时对照组CD34表达阳性的微血管数量也较空白组多;③实验组的微血管密度高于对照组和空白组,对照组的微血管密度高于空白组,三组间差异均具有统计学意义[F(2,12)=6.172,P=0.021]。结论本研究证实网膜包裹可促进BAM的血管化,且将BMSCs种植于BAM上行网膜包裹培养,更有利于移植物的血管化。 展开更多
关键词 骨髓间充细胞 膀胱细胞 网膜包裹 血管化
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