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题名大鼠骨髓间充质干细胞与脱细胞脊髓支架体外共培养
被引量：1
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作者
王开见
任先军
蒋涛
周长立
阴洪
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机构
第三军医大学新桥医院骨科
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出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期1062-1066,共5页
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基金
国家自然科学基金面上项目(81271362)
国家自然科学基金青年项目(31000438)
全军医学科技"十二五"科研重点项目(BWS11C040)~~
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文摘
目的评价脱细胞脊髓支架在大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)体外培养中的作用,探索最佳接种浓度。方法分离、培养及鉴定SD大鼠BMSCs,诱导BMSCs向神经元样细胞分化。制备脱细胞脊髓支架,将第3代BMSCs同脱细胞脊髓支架共培养,MTT法检测细胞增殖活性,比较与普通培养的差异;取第3代BMSCs以不同浓度[(0.5、1、2、3、4)×106/mL]接种于支架(脊髓支架修整0.5cm小段),检测细胞在支架上的粘附率及上架细胞数,建立接种浓度与细胞粘附率、上架细胞数的关系回归方程;扫描电镜观察脱细胞脊髓支架形态以及细胞与支架的粘附情况。结果成功实现BMSCs的分离及培养,BMSCs流式鉴定CD29、CD90阳性表达,向神经元诱导胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、巢蛋白(Nestin)呈阳性表达;与普通培养相比,BMSCs在支架上细胞增殖活力显著提高(P<0.05);细胞与支架的粘附率在接种浓度为2×106/mL最高,达到(79.6±2.7)%,单位体积上架细胞数达到(1.364±0.047)×106/cm3;扫描电镜观察支架空间结构良好,细胞与支架粘附良好,共培养第3天较第1天细胞数量明显增加。结论脱细胞脊髓支架具有多通道的空间结构,适合BMSCs粘附、存活、增殖,该支架是良好的天然脊髓组织工程材料。当粘附率及细胞上架数基本达到最大时的最佳接种浓度为2×106/mL。
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关键词
骨髓间充质干细胞
脱细胞脊髓支架
细胞共培养
组织工程
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Keywords
bone marrow mesenchymal stem cells
acellular scaffold of spinal cord
cell co-culture
tissue engineering
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分类号
R318.08
[医药卫生—生物医学工程]
R322.71
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名神经干细胞与脊髓脱细胞支架体外共培养的可行性
被引量：2
- 2
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作者
漆国栋
江琼
伍亚民
申开琴
杨琴
漆伟
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机构
重庆市中医骨科医院骨科
重庆医科大学中医药防治代谢性疾病重庆市重点实验室
陆军军医大学大坪医院野战外科研究所
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出处
《中国康复理论与实践》
CSCD
北大核心
2021年第1期71-78,共8页
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基金
重庆市卫健委中医药科技项目(No.ZY201702134)
重庆市科卫联合科技项目(No.2019ZY023495
No.2019ZY023292)。
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文摘
目的观察大鼠神经干细胞(NSCs)在脊髓脱细胞支架(SCAS)上黏附、生长和分化情况,评价其构建脊髓组织工程的可行性。方法新生Sprague-Dawley大鼠大脑皮质来源NSCs传代培养并鉴定;Sprague-Dawley雌性大鼠脊髓组织改良物理振荡结合化学萃取法制备SCAS,并行基础评估;将第三代NSCs种植在SCAS上,体外共培养,免疫荧光、免疫组化和扫描电镜观察支架上细胞形态。结果共培养的细胞为能增殖、分化的NSCs。制备的SCAS孔隙率、含水率、酶解率都明显高于正常脊髓(|t|>4.679,P<0.01);SCAS基质结构呈疏松网络状,基质上可见极少量残留细胞核。NSCs在SCAS上黏附、生长良好,可分化为神经元和神经胶质细胞。结论制备的SCAS脱细胞较彻底,具有多通道空间结构,适合NSCs黏附、生长和分化,可用于脊髓组织工程。
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关键词
脊髓损伤
神经干细胞
脊髓脱细胞支架
体外共培养
脊髓组织工程
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Keywords
spinal cord injury
neural stem cells
spinal cord acellular scaffold
co-culture in vitro
spinal cord tissue engineering
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分类号
R318.5
[医药卫生—生物医学工程]
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题名大鼠脱细胞脊髓的形态学观察
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作者
李宏波
李万里
池永龙
李玉丽
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机构
温州医学院附属第二医院脊柱外科
浙江大学医学院附属第二医院骨科
温州医学院生物医学工程研究院
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出处
《中国脊柱脊髓杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第9期754-758,共5页
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基金
浙江省自然基金项目(编号:Y2080507)
浙江省卫生厅课题(编号:2007A140)
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文摘
目的:观察大鼠脱细胞脊髓的形态特点,探讨其作为脊髓组织工程支架的可行性。方法:取11条SD大鼠脊髓,采用冻融+化学萃取法进行脱细胞处理,其中2条采用HE染色观察脱细胞情况,立春红2R-亮绿SF染色观察脱髓鞘情况;3条取颈、胸、腰段横切片行Mallory三色胶原染色和透射电镜检查,3条取颈、胸、腰段纵切片行Mallory三色胶原染色,3条取颈、胸、腰段贴片行扫描电镜检查,观察其形态构成等参数,比较不同部位材料内部结构的差异。结果:经脱细胞处理的脊髓呈乳白色扁长条状,干燥,体积较处理前略变小,韧性及强度增加,表面脊膜包裹完好,无异味。HE染色显示脊髓内未见细胞残留;丽春红2R-亮绿SF染色证实神经细胞轴突脱髓鞘完全。颈、胸及腰段脊髓横断面均呈网格状结构,纵断面均呈平行管状结构。颈、胸及腰段横断面网格大小及纵断面平行管状结构间距行统计学两两比较,颈段网格长径明显大于胸段(P<0.05),胸段网格短径明显小于腰段(P=0.05),其余均无统计学差异(P>0.05)。结论:SD大鼠脊髓经脱细胞处理后颈、胸和腰段脱细胞彻底,保留了原脊髓的主体结构,可作为脊髓组织工程的支架。
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关键词
脊髓损伤
组织工程
脱细胞脊髓支架
大鼠
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Keywords
Spinal cord injury
Tissue engineering
Decellularized spinal cord
Rat
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分类号
R318.5
[医药卫生—生物医学工程]
R683.2
[医药卫生—骨科学]
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