目的:探讨不同交联剂处理对脱细胞小肠黏膜下层(decellularized small intestinal submucosa,SIS)多孔支架理化性能及生物相容性的影响。方法:(1)将新鲜SIS塑形为三维多孔支架并采用戊二醛(glutaraldehyde,GA)、碳二亚胺[1-ethyl-3-(3-d...目的:探讨不同交联剂处理对脱细胞小肠黏膜下层(decellularized small intestinal submucosa,SIS)多孔支架理化性能及生物相容性的影响。方法:(1)将新鲜SIS塑形为三维多孔支架并采用戊二醛(glutaraldehyde,GA)、碳二亚胺[1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide,EDC]和原花青素(procyanidine,PA)3种交联剂进行交联,获得3组交联后支架,分别为GA组、EDC组和PA组。(2)理化性能评价:对3组多孔支架进行宏观形貌观察,使用场发射环境扫描电镜进行微观形貌观察并测定孔径及孔隙率,使用茚三酮法测定交联度,使用酶促降解法评价抗降解性能,使用万能力学测试机测定应力应变曲线及压缩强度。(3)生物相容性评价:使用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测交联处理对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)增殖的影响,使用Calcein-AM/PI活死细胞染色法评价交联处理后支架的细胞毒性。结果:宏观形貌观察可见交联修饰未破坏支架三维结构;微观形貌观察可见各组多孔支架具有大小均匀、相互连通的孔隙结构。EDC组孔径最大,与另两组差异具有统计学意义(P<0.05);PA组孔隙率最低,与另两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。PA组交联度最高而溶胀率最低,EDC组溶胀率最高。EDC组和GA组的体外降解速率均高于PA组,其中GA组降解速度最快,PA组抗降解能力最佳,降解至第15天时3组质量丧失率间的差异有统计学意义(P<0.05)。EDC组和GA组压缩强度近似,PA组压缩强度最高,与另两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。GA组支架的细胞毒性最大,hBMSCs在EDC组和PA组支架上具有更好的增殖能力,在GA组增殖较慢。结论:3种交联剂处理均可达到较高的交联度,经EDC和PA交联处理的SIS多孔支架在拥有较好理化性能的同时具有良好的生物相容性,相比于GA是更有应用前景的交联处理方法。展开更多
目的:设计不同pH值下螯合锶(strontium,Sr)的脱细胞小肠黏膜下层(decellularized small intestinal submucosa,dSIS)海绵支架(Sr/dSIS),以该支架的理化性能和生物相容性为评价指标,为制备Sr/dSIS选择合适的pH值。方法:(1)Sr/dSIS制备及...目的:设计不同pH值下螯合锶(strontium,Sr)的脱细胞小肠黏膜下层(decellularized small intestinal submucosa,dSIS)海绵支架(Sr/dSIS),以该支架的理化性能和生物相容性为评价指标,为制备Sr/dSIS选择合适的pH值。方法:(1)Sr/dSIS制备及分组:将dSIS溶液与氯化锶溶液等体积混合,调节溶液pH分别为3、5、7、9,于37℃下充分反应后经冷冻干燥制得多孔支架,分别命名为Sr/dSIS-3、-5、-7、-9,以dSIS支架为对照;(2)理化性能评价:观察支架大体形貌,采用扫描电镜分析微观形貌并测定孔隙率和孔径,能谱分析表面元素,红外光谱分析官能团结构,原子吸收分光光度法测定螯合率,比重法检测吸水率,万能力学测试机评价压缩强度;(3)生物相容性评价:采用Calcein-AM/PI活细胞/死细胞染色法评价各组支架的毒性和促骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖效果。结果:扫描电镜下各组支架具有三维多孔网络结构,孔径和孔隙率差异无统计学意义;能谱分析中Sr/dSIS-5、-7、-9组检测出锶元素的特征峰,且锶元素均匀分布于支架;官能团分析验证了Sr/dSIS-5、-7、-9组有螯合物形成;螯合率分析显示Sr/dSIS-7组锶离子螯合率最高,与其他组的差异有统计学意义(P<0.05);各组支架吸水性良好;Sr/dSIS-5、-7、-9组的压缩强度显著高于对照组(P<0.05);各组支架的生物相容性良好,Sr/dSIS-7组展现出最佳的促细胞增殖能力。结论:pH为7时,Sr/dSIS支架具有高锶离子螯合率以及更好的促BMSCs增殖效果,是制备Sr/dSIS支架的理想pH值。展开更多
