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荧光定量PCR与半定量PCR检测猕猴不同器官组织中黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因的mRNA表达差异的比较 被引量:4
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作者 唐东红 叶尤松 +4 位作者 李哲丽 彭波 李桂珍 李润萍 杨光蕊 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第12期47-53,共7页
目的比较荧光定量PCR与半定量PCR检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤脱氢酶氧化酶(XDH/XO)的mRNA的相对表达量的差异,为改进实验研究方法学提供参考依据。方法提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、... 目的比较荧光定量PCR与半定量PCR检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤脱氢酶氧化酶(XDH/XO)的mRNA的相对表达量的差异,为改进实验研究方法学提供参考依据。方法提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中总RNA,使用相同的引物序列及内参基因,分别用荧光定量PCR与半定量PCR进行相对定量检测,结果做比对分析。结果两种检测方法均能检测到健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中XDH/XO的mRNA表达,荧光定量PCR灵敏度可检测到肝脏组织0.4ng总RNA中的XDH/XO的mRNA表达,半定量PCR灵敏度可检测到肝脏组织15.625 ng总RNA中的XDH/XO的mRNA表达,荧光定量PCR较半定量灵敏度高39倍。两种方法检测结果均显示猕猴不同组织XDH/XO的mRNA表达在肝脏组织中表达水平最高,对于表达量较低的其他组织,荧光定量PCR与半定量PCR检测结果存在有一定差异。结论两种方法均可用于检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶(XDH/XO)的mRNA的相对表达量,荧光实时定量PCR灵敏度较高于半定量PCR法。 展开更多
关键词 荧光定量PCR 半定量PCR 黄嘌呤氧化酶 MRNA表达 猕猴 睾丸 皮肤
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芬太尼对C6胶质瘤细胞黄嘌呤氧化还原酶基因表达的影响 被引量:1
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作者 赵小冬 刘剑凯 洪敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期719-720,共2页
芬太尼同吗啡是较强的μ受体激动剂,许多实验已经表明μ受体介导了吗啡的依赖、耐受作用[1].芬太尼是常用于心脑血管外科手术的麻醉镇痛剂.芬太尼在细胞水平对核苷酸代谢相关酶的基因表达还不清楚.本文采用了高度灵敏的RT-PCR-Southern... 芬太尼同吗啡是较强的μ受体激动剂,许多实验已经表明μ受体介导了吗啡的依赖、耐受作用[1].芬太尼是常用于心脑血管外科手术的麻醉镇痛剂.芬太尼在细胞水平对核苷酸代谢相关酶的基因表达还不清楚.本文采用了高度灵敏的RT-PCR-Southern 杂交方法检测芬太尼对C6胶质瘤细胞黄嘌呤脱氢酶(Xanthine dehydrogenase,XD)/黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase, XO)基因表达的影响. 展开更多
关键词 C6胶质瘤细胞 芬太尼 黄嘌呤酶/黄嘌呤氧化酶 RT—PCR—Southern杂交
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利用pHDE-Cas9构建巨桉CTX基因家族CRISPR载体 被引量:2
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作者 李莉梅 张婷婷 +5 位作者 欧阳乐军 陈自银 陈凯钊 刘雅丽 尹爱国 布良灏 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期411-417,共7页
【目的】利用高效基因编辑系统(p HDE-Cas9)构建巨桉细胞分裂素氧化酶/脱氢酶(CTX)基因家族规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)载体,为开展巨桉CTX基因家族功能验证研究打下基础。【方法】设计巨桉CTX基因靶位点和引物,扩增p CBC质粒上... 【目的】利用高效基因编辑系统(p HDE-Cas9)构建巨桉细胞分裂素氧化酶/脱氢酶(CTX)基因家族规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)载体,为开展巨桉CTX基因家族功能验证研究打下基础。【方法】设计巨桉CTX基因靶位点和引物,扩增p CBC质粒上的目的片段,BsaⅠ酶切p HDE载体并与目的片段连接形成重组质粒,转化DH5α感受态细胞。提取单克隆进行菌液PCR初步验证、重组质粒PCR验证,挑选阳性克隆质粒进行测序分析,构建CTX基因家族CRISPR载体。【结果】重组质粒PCR鉴定及测序结果表明,重组载体序列无突变,与预期序列高度一致。成功构建了巨桉CTX基因家族p HDE-CTXA、p HDE-CTXB和p HDE-CTXC同源表达载体。【结论】利用p HDE-Cas9成功构建了巨桉CTX基因家族CRISPR载体,构建过程快速、高效,为桉树基因组定点编辑打下了基础,也可为其他桉树CRISPR/Cas9表达载体的构建提供借鉴。 展开更多
关键词 巨桉 规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR) 细胞分裂素氧化酶/酶(CTX) 载体构建
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用臭氧防治畜禽疫病效果好 被引量:1
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作者 王升学 《农村科技》 2000年第2期21-21,共1页
臭氧在常温下为蓝色气体,因其气味如同夏季打雷后释放的气体一样,略带臭味,故俗称臭氧。臭氧是已知的强氧化剂,它能氧化分解细菌的葡萄糖氧化酶、脱氢氧化酶,还可直接与细菌发生作用,使细菌代谢过程破坏,从而终止细菌的生长繁殖,导致细... 臭氧在常温下为蓝色气体,因其气味如同夏季打雷后释放的气体一样,略带臭味,故俗称臭氧。臭氧是已知的强氧化剂,它能氧化分解细菌的葡萄糖氧化酶、脱氢氧化酶,还可直接与细菌发生作用,使细菌代谢过程破坏,从而终止细菌的生长繁殖,导致细菌死亡。臭氧是一种广谱杀菌剂,对细菌繁殖体、芽孢、病毒、原虫包囊等均有杀灭作用,并可破坏肉毒杆菌毒素。臭氧在水中杀菌速度是氯的300~6000倍,例如,对大肠杆菌,用0.1毫克/升活性氧,需作用4小时。 展开更多
关键词 臭氧 细菌繁殖体 肉毒杆菌毒素 脱氢氧化酶 杀灭作用 大肠杆菌 活性氧 氧化分解 氧化 生长繁殖
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Inhibitory effect of Cr(Ⅵ) on activities of soil enzymes
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作者 彭兵 黄顺红 +3 位作者 杨志辉 柴立元 许友泽 苏长青 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS 2009年第4期594-598,共5页
To evaluate the influence of various Cr(Ⅵ) concentrations (0.05, 0.25, 0.50, 1.00 and 2.00 g/kg) on the activity of soil enzymes, the activities of catalase, polyphenol oxidase, dehydrogenase, alkaline phosphatase in... To evaluate the influence of various Cr(Ⅵ) concentrations (0.05, 0.25, 0.50, 1.00 and 2.00 g/kg) on the activity of soil enzymes, the activities of catalase, polyphenol oxidase, dehydrogenase, alkaline phosphatase in soils were investigated in the incubation experiment with a period of 35 d. The results indicate that all the tested Cr(Ⅵ) concentrations significantly inhibit dehydrogenase activity by over 70% after 35 d. The activity of alkaline phosphatase is slightly inhibited during the whole experiment except for on the day 7. Cr(Ⅵ) has no obvious effect on the activity of catalase in soil. On the contrary, Cr(Ⅵ) stimulates the activity of polyphenol oxidase. The results suggest that dehydrogenase activity can be used as an indicator for assessing the severity of chromium pollution. 展开更多
关键词 Cr(Ⅵ) SOIL POLLUTION enzyme activity INHIBITION
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番茄CKX基因家族生物信息学分析
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作者 李伟 范胜男 +2 位作者 王星 贾兵国 王丽萍 《现代农业科技》 2023年第12期56-59,62,共5页
植物细胞内的细胞分裂素受到细胞分裂素脱氢酶/氧化酶(CKX)的调节,维持植物体内细胞分裂素动态平衡。为探究番茄基因组中CKX基因(SlCKX)家族成员的信息,本研究通过现代生物信息学分析,对番茄中CKX基因家族进行鉴定和分析。结果表明,在... 植物细胞内的细胞分裂素受到细胞分裂素脱氢酶/氧化酶(CKX)的调节,维持植物体内细胞分裂素动态平衡。为探究番茄基因组中CKX基因(SlCKX)家族成员的信息,本研究通过现代生物信息学分析,对番茄中CKX基因家族进行鉴定和分析。结果表明,在番茄全基因组中鉴定出9个CKX基因家族成员,蛋白长度在453~553个氨基酸之间,编码蛋白分子量在51 660.72~52 493.64 kD之间,为亲水性蛋白;番茄CKX基因分在4个亚族内,且SlCKX家族成员中含有3~5个内含子以及4~6个外显子;9个番茄CKX家族基因不均匀地分布在5条染色体上,番茄CKX基因家族包含11种顺式作用元件,其中脱落酸响应元件分布最广。本研究可为番茄CKX基因家族的功能和应用研究提供一定参考。 展开更多
关键词 番茄 生长素氧化酶/ 基因家族 生物信息学
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