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迭代饱和突变提高卤醇脱卤酶HheA_(AM)催化制备6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯的酶活
被引量：
2
1
作者
王露
徐刚
+1 位作者
杨立荣
吴坚平
《高校化学工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期1127-1133,共7页
(3R,5R)-6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯(A7)是合成降血脂药物阿托伐他汀钙的关键手性中间体,利用卤醇脱卤酶催化(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯(D3)的脱卤氰化反应制备A7是很有潜力的合成方法。现有研究存在的主要问题是卤醇脱卤酶...
(3R,5R)-6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯(A7)是合成降血脂药物阿托伐他汀钙的关键手性中间体,利用卤醇脱卤酶催化(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯(D3)的脱卤氰化反应制备A7是很有潜力的合成方法。现有研究存在的主要问题是卤醇脱卤酶种类少,对底物D3的催化活性很低,且鲜见有关脱卤酶分子改造提高其对D3催化活性的报道。本研究利用基因挖掘技术获得了一个对D3表现出较高催化活力的卤醇脱卤酶HheA_(AM) (来源于Agromycesmediolanus sp.),运用定向进化和半理性设计方法确定了4个影响酶活的关键位点(84、88、136、144位),然后使用迭代饱和突变(ISM)策略对这4个位点进行组合突变,突变株M4-HheA_(AM)(84S-88L-136T-144C)的比酶活为0.89U·mg-1,是野生型HheA_(AM)(Wt-HheA_(AM))的13倍,对D3的催化活性得到了显著的提高。
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关键词
卤醇
脱卤
酶
脱卤氰化反应
酶活
迭代饱和突变
(3R
5R)-6-氰基-3
5-二羟基己酸叔丁酯
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职称材料
题名
迭代饱和突变提高卤醇脱卤酶HheA_(AM)催化制备6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯的酶活
被引量：
2
1
作者
王露
徐刚
杨立荣
吴坚平
机构
浙江大学化学工程与生物工程学院
出处
《高校化学工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期1127-1133,共7页
基金
国家自然科学基金(21076187)
国家"973"计划资助项目(2011CB710800)
文摘
(3R,5R)-6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯(A7)是合成降血脂药物阿托伐他汀钙的关键手性中间体,利用卤醇脱卤酶催化(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯(D3)的脱卤氰化反应制备A7是很有潜力的合成方法。现有研究存在的主要问题是卤醇脱卤酶种类少,对底物D3的催化活性很低,且鲜见有关脱卤酶分子改造提高其对D3催化活性的报道。本研究利用基因挖掘技术获得了一个对D3表现出较高催化活力的卤醇脱卤酶HheA_(AM) (来源于Agromycesmediolanus sp.),运用定向进化和半理性设计方法确定了4个影响酶活的关键位点(84、88、136、144位),然后使用迭代饱和突变(ISM)策略对这4个位点进行组合突变,突变株M4-HheA_(AM)(84S-88L-136T-144C)的比酶活为0.89U·mg-1,是野生型HheA_(AM)(Wt-HheA_(AM))的13倍,对D3的催化活性得到了显著的提高。
关键词
卤醇
脱卤
酶
脱卤氰化反应
酶活
迭代饱和突变
(3R
5R)-6-氰基-3
5-二羟基己酸叔丁酯
Keywords
halohydrin dehalogenase
dehalo-cyanogenation
enzyme activity
iterative saturation mutagenesis
tert-butyl （3R,5R）-6-cyano-3,5-dihydroxyhexanoate
分类号
TQ465.92 [化学工程—制药化工]
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出处
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1
迭代饱和突变提高卤醇脱卤酶HheA_(AM)催化制备6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯的酶活
王露
徐刚
杨立荣
吴坚平
《高校化学工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
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