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定量RT-PCR法检测脯氨酰4-羟化酶mRNA的表达被引量：2: 1; 作者李舰李石 +2 位作者傅卫军杨秀疆沈健伟《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期810-811,共2页; 关键词脯氨酸4-羟化酶 MRNA RT-PCR 肝纤维化; 在线阅读下载PDF 职称材料

无外源脯氨酸发酵产反式-4-羟脯氨酸重组大肠杆菌的构建及发酵优化被引量：1: 2; 作者胡丹丹王付才 +2 位作者张震宇孙付保周邦炜《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第20期168-174,共7页; 为实现无外源脯氨酸的条件下直接从葡萄糖转化生成反式-4-羟脯氨酸,本实验采用定点突变和基因共表达的方法构建重组大肠杆菌:首先对L-脯氨酸生物合成途径中的关键酶谷氨酸激酶进行定点突变E143A、K145A,以增强L-脯氨酸生物合成能力;然... 展开更多; 关键词脯氨酸4-羟化酶反式-4-羟脯氨酸 L-脯氨酸谷氨酸激酶共表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

1株产顺式-4-羟基-L-脯氨酸基因工程菌的构建及发酵初步优化被引量：1: 3; 作者王付才张震宇 +2 位作者孙付保姚动邦周杨《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期7-12,共6页; 顺式-4-羟基-L-脯氨酸是一种可用于合成多种药物和香料的手性结构物质。通过对L-脯氨酸顺式-4-羟化酶基因的优化设计,并引入色氨酸串联启动子,构建出1株能表达L-脯氨酸顺式-4-羟化酶的重组大肠杆菌JM109/p EHC4,从而可以将游离的L-脯氨... 展开更多; 关键词 L-脯氨酸顺式-4-羟化酶密码子优化重组大肠杆菌微生物转化发酵优化; 在线阅读下载PDF 职称材料

产顺式-4-羟脯氨酸枯草芽孢杆菌工程菌的构建及发酵优化被引量：1: 4; 作者张博文陈可泉 +1 位作者曹伟佳王昕《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第13期101-106,共6页; 顺式-4-羟脯氨酸(CHOP)是一种重要的手性结构物质,可广泛用于药物以及香料制造。本研究为开发CHOP的生物合成方法,将来源于中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)的L-脯氨酸-4-羟化酶在枯草芽孢杆菌WB800N中实现了成功表达,构建获得了能够... 展开更多; 关键词 L-脯氨酸顺式-4-羟化酶枯草杆菌WB800N 发酵顺式-4-羟脯氨酸; 在线阅读下载PDF 职称材料

P4HB在胶质母细胞瘤中的表达及其对临床预后和肿瘤细胞增殖与迁移的影响被引量：1: 5; 作者黄冠又侯小红 +3 位作者葛学成甘鸿川郝淑煜吴震《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期459-467,共9页; 目的探讨脯氨酸4-羟化酶β多肽(P4HB)在多形性胶质母细胞瘤(GBM)中的表达及其对临床预后和肿瘤细胞增殖与迁移的影响。方法(1)根据癌症基因组图谱(TCGA)、GTEx数据库和GEPIA2数据库,应用R软件分析P4HB基因在GBM与正常脑组织的表达差异。... 展开更多; 关键词脯氨酸4-羟化酶β多肽胶质母细胞瘤预后增殖迁移; 在线阅读下载PDF 职称材料

P4HA2通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路促进肝癌的发生和发展被引量：5: 6; 作者商玲姜雯迪 +1 位作者张俊丽武文娟《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期665-672,共8页; 目的探讨脯氨酸4-羟化酶Ⅱ(P4HA2)在肝癌细胞发生发展中的作用及相关机制。方法利用GEPIA、Human Protein Atlas数据库预测P4HA2在肝癌中的表达情况,利用K-M plotter在线数据库分析P4HA2的表达情况与肝癌预后的关系,采用qRT-PCR和West... 展开更多; 关键词肝癌脯氨酸4-羟化酶II 迁移侵袭 PI3K/AKT/MTOR; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名定量RT-PCR法检测脯氨酰4-羟化酶mRNA的表达被引量：2: 1; 作者李舰李石傅卫军杨秀疆沈健伟; 机构第二军医大学长征医院消化内科; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期810-811,共2页; 基金国家自然科学基金; 关键词脯氨酸4-羟化酶 MRNA RT-PCR 肝纤维化; 分类号 R575.2 [医药卫生—消化系统] Q550.3 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名无外源脯氨酸发酵产反式-4-羟脯氨酸重组大肠杆菌的构建及发酵优化被引量：1: 2; 作者胡丹丹王付才张震宇孙付保周邦炜; 机构江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室和糖化学与生物技术教育部重点实验室; 出处《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第20期168-174,共7页; 基金高等学校博士学科点专项科研基金(200802951036) 国家自然科学基金(30800018 +1 种基金 30970058) 江苏省自然科学基金(BK2012554); 文摘为实现无外源脯氨酸的条件下直接从葡萄糖转化生成反式-4-羟脯氨酸,本实验采用定点突变和基因共表达的方法构建重组大肠杆菌:首先对L-脯氨酸生物合成途径中的关键酶谷氨酸激酶进行定点突变E143A、K145A,以增强L-脯氨酸生物合成能力;然后引入脯氨酸4-羟化酶基因,通过两个基因的共表达可以实现从葡萄糖到反式-4-羟脯氨酸的连续转化,而不再需要添加外源L-脯氨酸。得到的L-脯氨酸生物合成能力增强的菌株在摇瓶阶段L-脯氨酸的产量可达到1.4 g/L;pro BA2与hyp双基因共表达菌株的反式-4-羟脯氨酸产量为98.9 mg/L,比原始菌株提高了一倍,经发酵优化后得到培养基为:葡萄糖10 g/L,胰蛋白胨15 g/L,硫酸亚铁3 mmol/L,硫酸镁1 g/L,磷酸氢二钾3 g/L,氯化钙0.015 g/L,在这个培养条件下反式-4-羟脯氨酸的产量为220.0 mg/L,比优化前提高1.2倍。; 关键词脯氨酸4-羟化酶反式-4-羟脯氨酸 L-脯氨酸谷氨酸激酶共表达; Keywords proline 4-hydroxylase trans-4-hydroxyproline L-proline glutamate kinase co-expression; 分类号 TS201.1 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名1株产顺式-4-羟基-L-脯氨酸基因工程菌的构建及发酵初步优化被引量：1: 3; 作者王付才张震宇孙付保姚动邦周杨; 机构江南大学工业生物技术教育部重点实验室; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期7-12,共6页; 基金国家自然科学基金(30970058) 江苏省自然科学基金(BK2012554) 工业生物技术教育部重点实验室(江南大学)开放课题基金(KLIB-ZR200801); 文摘顺式-4-羟基-L-脯氨酸是一种可用于合成多种药物和香料的手性结构物质。通过对L-脯氨酸顺式-4-羟化酶基因的优化设计,并引入色氨酸串联启动子,构建出1株能表达L-脯氨酸顺式-4-羟化酶的重组大肠杆菌JM109/p EHC4,从而可以将游离的L-脯氨酸转化为顺式-4-羟基-L-脯氨酸。对该菌株进行摇瓶发酵优化,得出优选培养基为(g/L):葡萄糖10,甘油10,蛋白胨10,NaCl 6,FeSO_4·7H_2O 0.278,L-抗坏血酸0.528,(NH_4)_2SO_45,K_2HPO41,MgSO_40.2,CaCl_20.015,L-脯氨酸4。在该条件下发酵12 h,顺式-4-羟基-L-脯氨酸的产量达到657.08mg/L,比优化前提高了3.76倍;在24 h时产量达到1 582.75 mg/L。研究结果为顺式-4-羟基-L-脯氨酸的微生物转化法生产提供了基础。; 关键词 L-脯氨酸顺式-4-羟化酶密码子优化重组大肠杆菌微生物转化发酵优化; Keywords L-proline cis-4-hydroxylases codon optimization recombinant Escherichia coli microbial transformation fermentation optimization; 分类号 TQ922 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名产顺式-4-羟脯氨酸枯草芽孢杆菌工程菌的构建及发酵优化被引量：1: 4; 作者张博文陈可泉曹伟佳王昕; 机构南京工业大学生物与制药工程学院; 出处《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第13期101-106,共6页; 基金国家自然科学基金(21576134); 文摘顺式-4-羟脯氨酸(CHOP)是一种重要的手性结构物质,可广泛用于药物以及香料制造。本研究为开发CHOP的生物合成方法,将来源于中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)的L-脯氨酸-4-羟化酶在枯草芽孢杆菌WB800N中实现了成功表达,构建获得了能够以L-脯氨酸为底物合成CHOP的工程菌株,进而对该菌株的发酵条件以及发酵组分进行了优化研究。结果表明:工程菌株的最适发酵温度为25℃,最适诱导剂浓度为1 mmol/L,最适发酵p H为5;在发酵体系中加入5 mmol/L硫酸亚铁和2.5 g/L L-脯氨酸时最有利于合成CHOP。在最优发酵体系下发酵60 h后,顺式-4-羟脯氨酸的产量可以达到120.2 mg/L。本文成功的构建了羟脯氨酸生产菌株枯草杆菌WB800 p HT-P4H,而研究结果为枯草杆菌工程菌发酵生产顺式-4-羟铺氨酸提供了基础。; 关键词 L-脯氨酸顺式-4-羟化酶枯草杆菌WB800N 发酵顺式-4-羟脯氨酸; Keywords L-proline-4-hydroxylase Bacillus s ubtilis WB800N fermentation cis-4-hydroxyproline; 分类号 TS [轻工技术与工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名P4HB在胶质母细胞瘤中的表达及其对临床预后和肿瘤细胞增殖与迁移的影响被引量：1: 5; 作者黄冠又侯小红葛学成甘鸿川郝淑煜吴震; 机构贵阳市第二人民医院神经外科首都医科大学附属北京天坛医院神经外科; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期459-467,共9页; 基金国家自然科学基金(81802683,81872052) 贵州省卫健委科学技术基金(gzwkj2022-348)。; 文摘目的探讨脯氨酸4-羟化酶β多肽(P4HB)在多形性胶质母细胞瘤(GBM)中的表达及其对临床预后和肿瘤细胞增殖与迁移的影响。方法(1)根据癌症基因组图谱(TCGA)、GTEx数据库和GEPIA2数据库,应用R软件分析P4HB基因在GBM与正常脑组织的表达差异。(2)选取2017年2月-2019年12月在贵阳市第二人民医院神经外科接受手术治疗的52例GBM肿瘤标本,另选取10例正常脑组织作为对照。应用免疫组织化学方法检测GMB组织和正常脑组织中P4HB的表达水平。采用log-rank检验的Kaplan-Meier法进行生存分析;受试者工作特征(ROC)曲线分析P4HB对GBM患者生存率的预测价值。采用Cox回归模型分析P4HB表达水平及相关临床病理因素与患者预后的关系。(3)将人源性GBM U87细胞随机分为对照组、NC-siRNA组和P4HB-siRNA组。P4HB-siRNA组转染siRNA干扰P4HB表达。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测U87细胞中P4HB mRNA含量;CCK-8法和免疫荧光染色检测P4HB对U87细胞增殖活力的影响;划痕实验检测P4HB对U87细胞迁移能力的影响。结果与正常脑组织比较,P4HB在GBM组织中表达明显上调(P<0.05);γδT细胞(r=-0.227)和滤泡辅助性T细胞(r=-0.226)与P4HB表达呈负相关,而自然杀伤(NK)细胞(r=0.417)、巨噬细胞(r=0.374)、中性粒细胞(r=0.344)和未成熟树突状细胞(r=0.263)与P4HB表达呈正相关。Kaplan-Meier生存分析结果显示,P4HB高表达组GBM患者中位生存期和中位疾病特异生存期均短于低表达组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,P4HB预测GBM患者总生存率的曲线下面积(AUC)为0.982,预测其1、3、5年生存率的AUC分别为0.655、0.724和0.861。免疫组化结果显示,P4HB蛋白在GBM组织中呈高表达。多因素Cox回归分析结果显示,P4HB高表达和TERT启动子突变是GBM患者预后的独立危险因素(P<0.05)。与对照组和NC-siRNA组比较,P4HB-siRNA组U87细胞转染siRNA后P4HB表达减少(P<0.01),细胞增殖能力和细胞划痕愈合率降低(P<0.001)。结论P4HB在GBM中高表达并提示患者预后不良;敲除P4HB可抑制GBM U87细胞的增殖和迁移。P4HB可能成为GBM的相关预测标志物和潜在治疗靶点。; 关键词脯氨酸4-羟化酶β多肽胶质母细胞瘤预后增殖迁移; Keywords P4HB glioblastoma prognosis proliferation migration; 分类号 R742.5 [医药卫生—神经病学与精神病学] R285 [医药卫生—中药学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名P4HA2通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路促进肝癌的发生和发展被引量：5: 6; 作者商玲姜雯迪张俊丽武文娟; 机构蚌埠医学院肿瘤基础研究与临床检验诊断重点实验室蚌埠医学院检验医学院生物化学与分子生物学教研室; 出处《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期665-672,共8页; 基金安徽省教育厅自然科学研究项目(KJ2017A234) 蚌埠医学院科技项目(2020byzd023)。; 文摘目的探讨脯氨酸4-羟化酶Ⅱ(P4HA2)在肝癌细胞发生发展中的作用及相关机制。方法利用GEPIA、Human Protein Atlas数据库预测P4HA2在肝癌中的表达情况,利用K-M plotter在线数据库分析P4HA2的表达情况与肝癌预后的关系,采用qRT-PCR和Western blot检测肝癌细胞和正常肝细胞中P4HA2的表达。构建慢病毒载体,用携带P4HA2 shRNA和Con shRNA的慢病毒载体分别转染肝癌SNU-449和Hep-3B细胞系,建立沉默表达P4HA2的细胞株(shP4HA2组)和对照组细胞株(NC组)。采用CCK-8、集落形成试验、划痕实验和Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。采用Western blot实验检测上皮-间质转化和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达情况。结果在线数据库分析结果显示,肝癌组织中P4HA2表达高于正常肝组织(P<0.05)。同时,肝癌细胞系中P4HA2 mRNA和蛋白表达水平也高于正常肝细胞(P<0.01)。慢病毒干扰后,与NC组相比,shP4HA2组中mRNA和蛋白表达水平下降(P<0.05)。P4HA2基因表达沉默后,细胞的增殖、迁移和侵袭受到抑制。Western blot显示,相对于NC组,shP4HA2组的E-cadherin蛋白表达上升,N-cadherin、Snail蛋白表达下降(P<0.05),在PI3K/AKT/mTOR通路中,磷酸化的PI3K(P-PI3K)、AKT(P-AKT)和m TOR(P-mTOR)显示出较低的水平(P<0.05)。结论 P4HA2通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路影响肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭,促进肝癌的发生发展。; 关键词肝癌脯氨酸4-羟化酶II 迁移侵袭 PI3K/AKT/MTOR; Keywords hepatocellular carcinoma prolyl-4-hydroxylase alpha polypeptide II invasion and migration PI3K/AKT/mTOR pathway; 分类号 R735.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	定量RT-PCR法检测脯氨酰4-羟化酶mRNA的表达	李舰李石傅卫军杨秀疆沈健伟	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	1999	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	无外源脯氨酸发酵产反式-4-羟脯氨酸重组大肠杆菌的构建及发酵优化	胡丹丹王付才张震宇孙付保周邦炜	《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心	2015	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	1株产顺式-4-羟基-L-脯氨酸基因工程菌的构建及发酵初步优化	王付才张震宇孙付保姚动邦周杨	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	产顺式-4-羟脯氨酸枯草芽孢杆菌工程菌的构建及发酵优化	张博文陈可泉曹伟佳王昕	《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	P4HB在胶质母细胞瘤中的表达及其对临床预后和肿瘤细胞增殖与迁移的影响	黄冠又侯小红葛学成甘鸿川郝淑煜吴震	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2024	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	P4HA2通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路促进肝癌的发生和发展	商玲姜雯迪张俊丽武文娟	《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2022	5	在线阅读下载PDF 职称材料