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Eupatilin通过Sesn2-Nrf2保护线粒体功能在脓毒症脑损伤中的作用 被引量：1
1
作者 王加栋 黄方舟 +3 位作者 黄艳 陈管雄 刘军 黄佩琦 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期601-607,共7页
目的 探讨Sestrin2(Sesn2)的保护线粒体功能在减轻脓毒症脑损伤(SAE)小鼠的认知功能障碍中的作用研究。方法 120只6周大的雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组,每组40只:假手术(Sham)组、CLP组、CLP+Eupatilin组。建立由盲肠结扎和穿孔(CLP)手... 目的 探讨Sestrin2(Sesn2)的保护线粒体功能在减轻脓毒症脑损伤(SAE)小鼠的认知功能障碍中的作用研究。方法 120只6周大的雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组,每组40只:假手术(Sham)组、CLP组、CLP+Eupatilin组。建立由盲肠结扎和穿孔(CLP)手术诱导脓毒症模型。CLP+Eupatilin组小鼠采用Eupatilin治疗。通过神经行为测试、Morris水迷宫(MWM)来确定小鼠神经行为、空间学习和记忆功能。通过尼氏染色法计数海马CA1区的神经元数目。将HT22细胞随机分为对照组(Con)、脂多糖组(LPS)、LPS+Eupatilin组、LPS+Eupatilin+si-Nrf2组。通过TUNEL染色分析细胞凋亡,和线粒体膜电位(MMP)分析线粒体损伤。结果 在CLP手术后7 d,与Sham小鼠相比,CLP小鼠的海马和皮质中Sesn2显著下调(P <0.01)。与CLP组相比,CLP+Eupatilin组的存活率显著增加(P <0.05)。与Sham组相比,CLP组小鼠表现出相对较高的神经损伤评分(P <0.05),和具有更少的平台穿越次数和更短的目标停留时间,而CLP+Eupatilin组中小鼠神经损伤评分较CLP组显著降低(P <0.05),并且停留在目标区域时间和平台穿越次数显著高于CLP组(P <0.05)。与Sham组相比,CLP组小鼠海马组织中神经元、Sesn2和Nrf2的共定位率明显减少(P <0.05),和CD68/Iba-1阳性小胶质细胞数量显著增加(P <0.05),而CLP+Eupatilin组逆转了这些变化。与Con组相比,LPS组细胞凋亡和MMP水平显著增加(P <0.01),而LPS+Eupatilin组细胞凋亡和MMP水平显著低于LPS组(P <0.05)。然而,Nrf2敲低(LPS+Eupatilin+si-Nrf2组)逆转了Eupatilin的抗细胞凋亡作用和线粒体保护作用。结论 Eupatilin通过激活Sesn2-Nrf2通路减轻SAE小鼠的认知功能障碍、神经功能缺损,并且通过减轻线粒体功能障碍来改善炎症微环境。 展开更多
关键词 Sestrin2 脓毒症脑损伤 线粒体 认知功能障碍 核因子红系-2相关因子2
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神经营养因子3通过激活自噬抑制焦亡促进脓毒症脑损伤后神经功能恢复
2
作者 丛岩 王培 +1 位作者 孙志德 于健 《中国医科大学学报》 2025年第8期684-689,共6页
目的探讨神经营养因子3(NT-3)促进脓毒症脑损伤(SAE)后神经功能恢复的作用及机制。方法将24只SD大鼠随机分成Sham组、SAE组和SAE+NT-3组,每组8只。采用大鼠脑损伤行为学评分评估脑损伤情况;采用Western blotting检测各组NT-3、s100β、... 目的探讨神经营养因子3(NT-3)促进脓毒症脑损伤(SAE)后神经功能恢复的作用及机制。方法将24只SD大鼠随机分成Sham组、SAE组和SAE+NT-3组,每组8只。采用大鼠脑损伤行为学评分评估脑损伤情况;采用Western blotting检测各组NT-3、s100β、胱天蛋白酶1(caspase-1)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)表达,采用免疫组织化学检测各组白细胞介素-1β(IL-1β)表达。将小鼠海马神经元HT22细胞分成Normal组、脂多糖(LPS)组、LPS+NT-3组、LPS+NT-3+3-MA组和LPS+NT-3+Compound C组。采用Western blotting检测各组LC3B、NLRP3、ASC、AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR表达;采用免疫荧光检测细胞caspase-1表达。结果与第1天相比,脓毒症大鼠脑组织NT-3表达在第2~3天逐渐增多(P<0.05);与SAE组相比,SAE+NT-3组神经功能评分上升,IL-1β、S100β、caspase-1在第1~2天表达水平下降,自噬水平表达水平升高(均P<0.05)。与LPS组相比,LPS+NT-3组caspase-1在1~3 h表达水平下降,自噬水平升高(均P<0.05);与LPS+NT-3相比,LPS+NT-3+3-MA组NLRP3、ASC表达水平升高,caspase-1阳性细胞增多(均P<0.05),LPS+NT-3+Compound C组p-AMPK减少,p-mTOR增多,自噬水平降低(均P<0.05)。结论NT-3经AMPK/mTOR信号通路在SAE早期激活自噬,清除焦亡激活蛋白NLRP3、ASC,从而促进神经功能恢复。 展开更多
关键词 脓毒症脑损伤 自噬 焦亡 神经营养因子3 神经元 焦亡激活蛋白
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免疫相关GTP酶M1在脓毒症诱导脑损伤小鼠皮质神经元细胞自噬中的作用 被引量：5
3
作者 黄群 陈斌 +1 位作者 李雅斐 李熙鸿 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1353-1360,共8页
目的:探讨免疫相关GTP酶M1(immune-related GTPase M1,IRGM1)在脓毒症诱导脑损伤(sepsis-induced brain injury,SIBI)小鼠皮质神经元细胞自噬中的作用。方法:将野生型和IRGM1基因敲除小鼠各60只分为野生型假手术(sham-operated wild-typ... 目的:探讨免疫相关GTP酶M1(immune-related GTPase M1,IRGM1)在脓毒症诱导脑损伤(sepsis-induced brain injury,SIBI)小鼠皮质神经元细胞自噬中的作用。方法:将野生型和IRGM1基因敲除小鼠各60只分为野生型假手术(sham-operated wild-type,SWT)组、野生型模型(model wild-type,MWT)组、基因敲除假手术(sham-operated knockout,SKO)组和基因敲除模型(model knockout,MKO)组。模型组行小鼠盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP),CLP后6 h行神经行为学评分,如神经生物学低于6分,诊断为SIBI;假手术组只打开腹腔,未行CLP。采用HE染色观察小鼠大脑皮质区病理学改变;电子显微镜下观察小鼠皮质神经元细胞自噬的超微结构;实时定量PCR检测IRGM1和INF-γm RNA在小鼠大脑皮质组织中的表达;Western印迹检测小鼠大脑皮质组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)-II,LC3-I,SQSTM1,IRGM1的蛋白相对表达量;免疫荧光法观察IRGM1在小鼠大脑皮质神经元中的表达。结果:电子显微镜显示,与SWT组比较,MWT组在CLP后12或24 h小鼠皮质神经元内质网扩张、线粒体肿胀、自噬体数量增加。Western印迹结果显示,CLP后6 h小鼠大脑皮质组织LC3-II表达开始增加,高表达维持至CLP后96 h,相反,SQSTM1在CLP后6 h开始下降。与SWT组比较,MWT组在CLP后12 h小鼠大脑皮质组织中IRGM1的m RNA和蛋白表达水平明显上调,同时,IFN-γ的m RNA表达也明显增加(P<0.05)。双色免疫荧光检测结果显示,CLP后24 h,与SWT组比较,MWT组小鼠皮质神经元中IRGM1表达明显上调。SWT组和SKO组小鼠大脑皮质细胞中自噬活性的基线水平相当低,几乎无LC3-II的表达,而SQSTM1表达均很高。但是,CLP后12 h,MWT组LC3-II表达明显升高,SQSTM1表达下调(P<0.05),而IRGM1基因敲除的MKO组小鼠大脑皮质组织中几乎无LC3-II,SQSTM1的表达明显上调。CLP后6 h,MWT组SIBI发生率90%(27/30),MKO组发生率96.67%(29/30)。CLP后12 h,MKO组小鼠神经生物学评分明显低于MWT组(4.97±0.71 vs 5.43±0.86;t=2.284,P=0.026)。小鼠大脑皮质HE染色显示,与MWT比较,MKO组小鼠脑皮质损伤严重,神经细胞数量明显减少。结论:SIBI时IRGM1表达对小鼠大脑皮质神经元损伤具有一定的保护作用,其机制可能与其调节小鼠大脑皮质神经元细胞自噬有关。 展开更多
关键词 脓毒症诱导脑损伤 大脑皮质 自噬 免疫相关GTP酶M1 小鼠
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