重组脑膜炎球菌PorB蛋白对猪伪狂犬弱毒疫苗的免疫增强效力

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作者 石晓玉 张元鹏 +5 位作者 乔绪稳 于晓明 陈瑾 姜平 郑其升 侯继波 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期-,共8页

探讨原核表达的重组脑膜炎球菌外膜蛋白PorB对猪伪狂犬弱毒活疫苗免疫的增强效果。将Gen Bank公布的脑膜炎球菌外膜蛋白PorB基因克隆到原核表达载体pQZⅢ中,命名为pQZ-PorB质粒,转入大肠杆菌BL21中表达重组蛋白。采用SDS-PAGE、Western-... 探讨原核表达的重组脑膜炎球菌外膜蛋白PorB对猪伪狂犬弱毒活疫苗免疫的增强效果。将Gen Bank公布的脑膜炎球菌外膜蛋白PorB基因克隆到原核表达载体pQZⅢ中,命名为pQZ-PorB质粒,转入大肠杆菌BL21中表达重组蛋白。采用SDS-PAGE、Western-blot技术和Ni^(2+)-NTA柱鉴定并纯化重组蛋白。将每份含100μg剂量的重组PorB蛋白与猪伪狂犬弱毒疫苗混合后分别滴鼻免疫3日龄仔猪和肌肉注射免疫50日龄猪,同时设PBS对照组和免疫前对照组。免疫28 d后测定IgG和IgA抗体水平、猪外周血淋巴细胞增殖情况以及细胞因子(IFN-γ、IL-10、IL-6)的表达水平。SDS-PAGE和Western-blot结果表明,PorB基因在大肠杆菌中表达,表达的重组PorB蛋白是可溶性的,Ni^(2+)-NTA柱能够有效纯化重组蛋白。重组PorB蛋白不但能够刺激免疫猪在较短时间内产生的较高血清IgG抗体、黏膜IgA抗体和中和抗体,而且可以通过诱导机体产生IFN-γ和IL-6来促进细胞免疫反应。在猪伪狂犬弱毒疫苗免疫中,重组PorB蛋白可以作为一种优良的免疫增强剂。 展开更多

关键词 脑膜炎球菌porb蛋白 猪伪狂犬弱毒疫苗 免疫增强

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糖皮质激素对肺炎链球菌脑膜炎大鼠脑保护作用及脑脊液免疫球蛋白水平的影响研究 被引量：3

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作者 肖林婷 周少珑 +2 位作者 周辉 蔡奕秋 陈薇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1172-1177,共6页

目的:探究糖皮质激素对肺炎链球菌(SP)脑膜炎模型大鼠脑损伤的影响,以及该作用下脑脊液免疫球蛋白水平的变化。方法:将40只SD大鼠按数字随机表法分为对照组、模型组、低剂量甲泼尼龙琥珀酸钠组(Low-MSS)、高剂量甲泼尼龙琥珀酸钠组(High... 目的:探究糖皮质激素对肺炎链球菌(SP)脑膜炎模型大鼠脑损伤的影响,以及该作用下脑脊液免疫球蛋白水平的变化。方法:将40只SD大鼠按数字随机表法分为对照组、模型组、低剂量甲泼尼龙琥珀酸钠组(Low-MSS)、高剂量甲泼尼龙琥珀酸钠组(High-MSS),每组10只。除对照组外,其余各组大鼠构建SP脑膜炎模型,Low-MSS组和High-MSS组大鼠分别以5 mg/kg、10 mg/kg剂量尾静脉注射甲泼尼龙琥珀酸钠,1次/d,持续21 d。采用Loeffler法对造模后的大鼠进行神经行为学评分;免疫比浊法检测大鼠脑脊液免疫球蛋白IgA、IgM及IgG含量;ELISA测定大鼠脑匀浆上清中炎症细胞因子TNF-α、IL-6及IFN-γ水平;HE染色检测大鼠脑组织病理学形态变化;Nissl染色检测大鼠脑组织神经元细胞数目;TUNEL染色检测大鼠脑组织细胞凋亡数目;免疫荧光染色检测大鼠脑组织损伤标志蛋白GFAP与S-100b表达。结果:注射SP前,对照组和模型组大鼠神经行为学评分差异无统计学意义(P>0.05),注射SP后24 h、48 h、72 h,模型组大鼠神经行为学评分显著低于对照组(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠脑脊液中IgA、IgM及IgG含量均升高,脑匀浆上清中TNF-α、IL-6及IFN-γ含量也均升高,脑组织发生明显病变损伤,伴随大量炎症细胞浸润,神经元细胞减少,凋亡细胞数增加,S-100b与GFAP的荧光密度值升高(P<0.05);与模型组比较,Low-MSS组和High-MSS组大鼠脑脊液中IgA、IgM及IgG含量均降低,脑匀浆上清中TNF-α、IL-6、IFN-γ含量也均降低(P<0.05),脑组织损伤现象得到缓解,炎症细胞浸润明显减少,神经元细胞增多,凋亡细胞数目减少,S-100b与GFAP的荧光密度值也均下降(P<0.05)。此外,High-MSS组对各项指标及脑组织损伤的改善效果要优于Low-MSS组(P<0.05)。结论:糖皮质激素甲泼尼龙琥珀酸钠可有效改善SP脑膜炎大鼠的脑组织损伤,并能够调节免疫球蛋白IgA、IgM及IgG水平,对SP脑膜炎大鼠起到保护作用。 展开更多

关键词 肺炎链球菌脑膜炎 糖皮质激素 免疫球蛋白

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金属蛋白酶9在隐球菌性脑膜炎小鼠模型脑组织中的表达 被引量：2

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作者 徐赤宇 温海 朱红梅 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期778-780,共3页

目的:观察基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在鼠脑组织中的表达并探讨其意义。方法:雌性C57BL/6小鼠行股静脉插管后实验各组分别注入新生隐球菌菌悬液以及菌悬液加抑肽酶,8h后应用免疫组织化学技术检测MMP-9在小鼠脑组织中的表达情况;同时观测... 目的:观察基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在鼠脑组织中的表达并探讨其意义。方法:雌性C57BL/6小鼠行股静脉插管后实验各组分别注入新生隐球菌菌悬液以及菌悬液加抑肽酶,8h后应用免疫组织化学技术检测MMP-9在小鼠脑组织中的表达情况;同时观测小鼠脑组织匀浆后菌落计数(CFU),并与免疫组织化学结果进行对照分析。结果:注入新生隐球菌菌悬液小鼠脑组织中的MMP-9显著升高,与正常对照组比较,有显著统计学差异(P<0.01);菌悬液加抑肽酶小鼠脑组织中MMP-9与正常对照组比较无明显统计学差异(P>0.05);MMP-9的染色强度与小鼠脑组织中的菌体负荷量正相关。结论:隐球菌性脑膜炎小鼠脑组织中存在MMP-9过表达,MMP-9可能导致血脑屏障开放程度提高。 展开更多

关键词 隐球菌性脑膜炎 基质金属蛋白酶-9 抑肽酶 免疫组织化学

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隐球菌性脑膜炎患者脑脊液蛋白质含量测定 被引量：1

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作者 杭小锋 温海 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期448-449,共2页

关键词 脑膜炎 隐球菌性 蛋白质 脑脊液

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B群脑膜炎球菌外膜蛋白0315不同形式疫苗免疫效果比较 被引量：1

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作者 李振宇 宋迎春 +3 位作者 吴晓霞 唐双阳 余敏君 胡四海 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1502-1508,共7页

目的:初步探讨和评价NMB0315核酸疫苗、重组蛋白疫苗及核酸疫苗+重组蛋白疫苗联合免疫诱导小鼠产生的特异性体液/细胞免疫应答水平及其免疫保护效果,为进一步探索NMB0315疫苗有效的免疫方法和途径提供实验依据。方法:大量制备核酸疫苗[p... 目的:初步探讨和评价NMB0315核酸疫苗、重组蛋白疫苗及核酸疫苗+重组蛋白疫苗联合免疫诱导小鼠产生的特异性体液/细胞免疫应答水平及其免疫保护效果,为进一步探索NMB0315疫苗有效的免疫方法和途径提供实验依据。方法:大量制备核酸疫苗[pc DNA3.1(+)/NMB0315]和重组蛋白疫苗(p ET-30a/NMB0315),采用核酸初免-蛋白加强的方法联合免疫或分别免疫雌性BALB/c小鼠,测定特异性体液/细胞免疫应答水平、免疫血清体外杀菌效价,观察疫苗对感染B群脑膜炎球菌小鼠的免疫保护效果。结果:NMB0315核酸疫苗组(p NMB0315-Cp G)、蛋白疫苗组(r NMB0315-FA)及联合免疫疫苗组(p NMB0315-Cp G+r NMB0315-FA)诱导的血清特异性Ig G、Ig G1、Ig G2a及生殖道灌洗液中特异性s Ig A水平在第八周达到峰值,A450值分别为(0.505±0.042、0.513±0.022、0.342±0.017、0.250±0.015)、(0.823±0.061、0.807±0.045、0.596±0.027、0.450±0.028)和(0.694±0.053、0.711±0.032、0.455±0.021、0.386±0.024),明显高于PBS对照组(P<0.01);其中,蛋白疫苗组的抗体水平明显高于联合免疫疫苗组和核酸疫苗组(P<0.05)。小鼠脾淋巴细胞刺激指数及IFN-γ水平,联合免疫疫苗组明显高于蛋白疫苗组和核酸疫苗组(P<0.05);核酸疫苗组、蛋白疫苗组和联合免疫疫苗组免疫血清在补体介导下的体外杀菌抗体效价分别为1∶64、1∶128和1∶128,对实验小鼠的免疫保护率分别为70%、95%和80%。免疫2、4、6、8周时,核酸疫苗组、重组蛋白疫苗组和联合免疫疫苗组Ig G2a/Ig G1比值均小于1。结论:NMB0315疫苗诱导的体液免疫(包括黏膜免疫)效果从高到低为:重组蛋白疫苗组、联合免疫疫苗组、核酸疫苗组;诱导细胞免疫的效果从高到低为:联合免疫疫苗组、核酸疫苗组、重组蛋白疫苗组;NMB0315疫苗对实验小鼠的免疫保护效果从高到低为:重组蛋白疫苗组、联合免疫疫苗组、核酸疫苗组。 展开更多

关键词 B群脑膜炎球菌 外膜蛋白0315 疫苗 免疫效果

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脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗研究进展 被引量：15

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作者 张营营 李智华 徐维明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1143-1149,共7页

流行性脑膜炎是细菌性脑脊髓膜炎中唯一能造成流行的疾病,可引起相当高的病死率和致残率。流脑从病原体的发现至今已超过100年,呈世界范围分布,全世界每年流脑病例可达30万到35万,是世界范围的一个严重公共健康问题。

关键词 多糖蛋白结合疫苗 脑膜炎球菌 流行性脑膜炎 世界范围 脑脊髓膜炎 健康问题 细菌性 致残率

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氟氯西林治疗甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌所致脑膜炎1例并文献复习

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作者 林志强 吴娜梅 蔡莉莉 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期56-61,共6页

目的探讨氟氯西林治疗甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)所致脑膜炎的疗效和安全性。方法分析氟氯西林治疗1例MSSA所致脑膜炎作用,并检索国内外报道的氟氯西林治疗MSSA所致脑膜炎的病例,综合进行分析。结果该患者采用氟氯西林2 g,1次/6 ... 目的探讨氟氯西林治疗甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)所致脑膜炎的疗效和安全性。方法分析氟氯西林治疗1例MSSA所致脑膜炎作用,并检索国内外报道的氟氯西林治疗MSSA所致脑膜炎的病例,综合进行分析。结果该患者采用氟氯西林2 g,1次/6 h静脉滴注,治疗23 d,患者最后痊愈出院,用药期间出现低钾血症。文献检索到32例病例报道,其中社区获得性脑膜炎9例,医院获得性脑膜炎23例,治愈率81.2%。2例患者同时监测氟氯西林的血药浓度和脑脊液浓度,其中1例合并低蛋白血症的危重成人患者的血和脑脊液药物浓度不能达到治疗水平,1例3月龄患儿的血和脑脊液浓度能达到足够的治疗水平,2例患者最终都治疗成功。结论氟氯西林可用于治疗MSSA所致细菌性脑膜炎,但需要积累更多的循证证据。低蛋白血症可降低氟氯西林的体内药物浓度。当用于治疗成人细菌性脑膜炎等危重感染时,宜采用8~12 g/d持续静脉滴注给药。对于年龄小于1岁的儿童,脑脊液药物浓度更易达到治疗水平。接受大剂量氟氯西林的患者需要注意监测血钾。 展开更多

关键词 氟氯西林 脑膜炎 金黄色葡萄球菌 低蛋白血症 低钾血症

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分离和鉴别脑膜炎球菌的培养基

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作者 钱伯钦 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1990年第Z1期108-109,共2页

一般认为脑膜炎球菌必须在含有天然动物蛋白(血液、血清、腹水及鸡蛋)的培养基上才能生长。而我们用黄豆代替动物蛋白用于脑膜炎球菌培养和鉴别,结果满意。培养基制备方法分离用培养基(黄豆—玉米淀粉抗菌素培养基):(1)基础培养基(g):胰... 一般认为脑膜炎球菌必须在含有天然动物蛋白(血液、血清、腹水及鸡蛋)的培养基上才能生长。而我们用黄豆代替动物蛋白用于脑膜炎球菌培养和鉴别,结果满意。培养基制备方法分离用培养基(黄豆—玉米淀粉抗菌素培养基):(1)基础培养基(g):胰胨6、胨6、牛肉膏3、氯化钠3、葡萄糖1、琼脂25、蒸馏水800ml,加热溶化。(2)玉米淀粉液:玉米淀粉3g(或玉米粉5g),用10ml蒸馏水拌成糊状,再用90ml煮沸的蒸馏水边倒边搅拌。 展开更多

关键词 脑膜炎球菌 玉米淀粉 胰胨 牛肉膏 半固体 淀粉液 发酵糖 动物蛋白 玉米粉 糖发酵管

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牛细菌性脑膜脑炎的流行、诊断与防治 被引量：1

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作者 冯勇 《现代畜牧科技》 2015年第2期124-124,共1页

细菌性脑膜脑炎多发于3~8日龄的犊牛,与机体免疫球蛋白低下和环境中高浓度细菌的威胁有关。早期临床症状为嗜睡,精神沉郁,无法吮吸,迅速发展为感觉过敏,角弓反张并死亡。据报道,病牛有强制性的走动和头部低垂的现象,但不常见。尽管应用... 细菌性脑膜脑炎多发于3~8日龄的犊牛,与机体免疫球蛋白低下和环境中高浓度细菌的威胁有关。早期临床症状为嗜睡,精神沉郁,无法吮吸,迅速发展为感觉过敏,角弓反张并死亡。据报道,病牛有强制性的走动和头部低垂的现象,但不常见。尽管应用大剂量的抗生素和支持疗法,预后仍然不良。1病原学被动抗体转移失败和犊牛生活环境中高水平细菌的威胁导致菌血症,局部并发于脑膜。 展开更多

关键词 脑膜脑炎 菌血症 中高浓度 早期临床症状 免疫球蛋白 感觉过敏 支持疗法 化脓性脑膜炎 革兰氏阴性杆菌 链球菌属

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疟疾疫苗佐剂能改进rDNA疫苗

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作者 金人一 《生物技术通报》 CAS CSCD 1989年第1期18-19,共2页

设在美国首都华盛顿的Walter Reed陆军研究所(为纪念陆军军医W.Reed而设——译者注)的研究人员正在研究一种自己研制的,可提高对疟疾抗原免疫应答的佐剂。你如果需要提高rDNA的免疫原性,不妨一试。此佐剂不仅能提高小鼠抗体水平达10至10... 设在美国首都华盛顿的Walter Reed陆军研究所(为纪念陆军军医W.Reed而设——译者注)的研究人员正在研究一种自己研制的,可提高对疟疾抗原免疫应答的佐剂。你如果需要提高rDNA的免疫原性,不妨一试。此佐剂不仅能提高小鼠抗体水平达10至100倍,还可用来提高其它疫苗的免疫应答。该所研究人员特意为疟疾CS(环子孢子)抗原和由脑膜炎球菌外膜蛋白制备的高纯度蛋白体进行了疏水性复合。 展开更多

关键词 疫苗佐剂 rDNA疫苗 脑膜炎球菌 抗原免疫 免疫应答 免疫原性 蛋白体 子孢子 鼠抗体 蛋白制备

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疫苗

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《生物技术通报》 CAS CSCD 1996年第5期66-68,共3页

961792 脑膜炎奈瑟氏球菌P64k外膜蛋白的克隆、表达及鉴别[英]/Guillen, G.…//Biotechnol.Apl.-1995,12(2).-72[译自DBA,1995,14(25),95-15046]

关键词 脑膜炎奈瑟氏球菌 环状糊精 融合蛋白 WESTERN印迹 狂犬病病毒 结核分枝杆菌 恶性疟原虫 融合基因 弗氏志贺氏菌 肠杆菌

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疫苗

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《生物技术通报》 CAS CSCD 1996年第2期67-72,共6页

960592 脑膜炎奈瑟氏球菌5C外膜蛋白的克隆和表达[英]/Guillen, G.…∥Acta Biotechnol.-1995,15(1).-97～106[译自DBA,1995,14(12),95-06948]

关键词 融合蛋白 脑膜炎奈瑟氏球菌 结核分枝杆菌 内皮细胞 抗原决定簇 髓过氧物酶 毒素大肠杆菌 大肠杆菌热稳定肠毒素 重组杆状病毒 口服疫苗

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