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B群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白NMB0315核酸疫苗的免疫活性和免疫保护作用初步研究 被引量:4
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作者 李开铭 谢梅花 +4 位作者 余敏君 唐双阳 张璐思 邓苏宏 胡四海 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1648-1653,1658,共7页
目的:构建B群脑膜炎奈瑟菌pc DNA3.1(+)/NMB0315真核表达重组质粒,检测其诱导小鼠产生的特异性体液免疫和细胞免疫应答水平、免疫血清体外杀菌效果及免疫保护作用,初步探讨NMB0315核酸疫苗的免疫活性和免疫保护效果,为研制一种新的预防... 目的:构建B群脑膜炎奈瑟菌pc DNA3.1(+)/NMB0315真核表达重组质粒,检测其诱导小鼠产生的特异性体液免疫和细胞免疫应答水平、免疫血清体外杀菌效果及免疫保护作用,初步探讨NMB0315核酸疫苗的免疫活性和免疫保护效果,为研制一种新的预防B群流脑的核酸疫苗提供实验依据。方法:以B群脑膜炎奈瑟菌标准株MC58基因组DNA为模板设计引物,PCR扩增NMB0315基因,克隆至pc DNA3.1(+)真核表达载体中,经Bam HⅠ和XhoⅠ双酶切及测序鉴定重组质粒。构建成功的pc DNA3.1(+)/NMB0315重组质粒转染COS-7细胞和RAW264.7细胞,免疫细胞化学染色法和Western blot法检测重组蛋白在真核细胞中的表达。大量提取重组质粒,肌注免疫BALB/c小鼠,检测小鼠体内抗NMB0315的特异性体液免疫和细胞免疫水平;测定免疫血清体外杀菌滴度,观察核酸疫苗对实验小鼠的免疫保护效果。结果:构建的核酸疫苗pc DNA3.1(+)/NMB0315能够在真核细胞中有效转录和表达;免疫小鼠后能诱导产生特异性体液免疫应答和细胞免疫应答。在疫苗免疫后的2、4、6周,pc DNA3.1(+)/NMB0315组和pc DNA3.1(+)/NMB0315+Cp G组血清总Ig G及Ig G1、Ig G2a、Ig G2b和Ig G3亚类抗体水平呈递增趋势,均明显高于PBS、pc DNA3.1(+)、Cp G对照组(P<0.001);小鼠血清Ig G2a/Ig G1比值均小于1;生殖道灌洗液中特异性s Ig A水平均明显高于PBS、pc DNA3.1(+)、Cp G对照组(P<0.01)。免疫第6周,脾淋巴细胞刺激指数(SI)均明显高于对照组(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。pc DNA3.1(+)/NMB0315+Cp G、pc DNA3.1(+)/NMB0315疫苗组免疫血清补体介导的体外杀菌效价分别为1∶128和1∶64;在致死量B群脑膜炎奈瑟菌MC58攻击后72 h存活率分别为70%和65%,对照组[PBS,pc DNA3.1(+),Cp G]72 h存活率为0。结论:NMB0315核酸疫苗能够诱导小鼠产生较高水平的体液免疫(包括黏膜免疫)和细胞免疫应答;免疫血清补体介导的体外杀菌活性较高;NMB0315核酸疫苗对感染B群脑膜炎奈瑟菌小鼠具有较强的免疫保护作用。 展开更多
关键词 B群脑膜炎奈瑟 B群脑膜炎奈瑟外膜蛋白0315 核酸疫苗 免疫活性 免疫保护
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2017-2019年济宁市健康人群脑膜炎奈瑟菌流行病学和基因组学分析 被引量:4
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作者 王珊 杜照中 +5 位作者 尹强 韩淑琪 赵剑 江亚娟 王胜男 温红玲 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期879-886,共8页
目的了解济宁市健康人群脑膜炎奈瑟菌流行情况及其基因组特征。方法采集2017-2019年流行前期、流行期、流行后期不同年龄组健康人群的咽拭子标本,进行菌株分离培养、生化试验、血清凝集试验,分离到的菌株进行基因测序,利用PubMLST数据... 目的了解济宁市健康人群脑膜炎奈瑟菌流行情况及其基因组特征。方法采集2017-2019年流行前期、流行期、流行后期不同年龄组健康人群的咽拭子标本,进行菌株分离培养、生化试验、血清凝集试验,分离到的菌株进行基因测序,利用PubMLST数据库进行多位点序列分型(MLST)、核心基因组多位点序列分型(cgMLST)、疫苗抗原分析,利用IQ-TREE和Splits Tree构建系统发育树。结果2017-2019年共检测1086份健康人群咽拭子标本,分离出21株脑膜炎奈瑟菌,健康人群平均带菌率为1.93%。其中流行前期带菌率为0.93%,流行期带菌率为2.30%,流行后期带菌率为1.83%。17~19岁人群带菌率较高,3~5岁儿童及≥20岁成人中未检出阳性菌株。检出的21株菌株中,B群15株,C群1株,不可分群5株。通过基因组分析,主要的ST型为ST-12301和ST-14655,ST-17464、ST-17465、ST-17466、ST-17467和ST-17468为本研究新发现的ST型。进行基因测序的19株菌株中,有8株属于4821克隆群,其余菌株不属于确定的克隆群,有3株血清型为不可分群的菌株但其基因型为B型。结论济宁市2017-2019年健康人群中脑膜炎奈瑟菌血清群以B群为主。本研究新发现5种MLST序列型,提示近几年菌株基因组存在微进化。MLST序列型的变迁有可能导致流行模式发生改变,有必要开展持续监测。17~20岁人群带菌率高,应密切关注菌株在人群中的扩散传播,以防引起流脑病例。 展开更多
关键词 脑膜炎奈瑟 健康人群 血清群 核心基因组多位点序列分型 系统发育树 4821克隆群
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无锡地区淋病患者产青霉素酶淋球菌基因检测 被引量:2
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作者 谢平 李琴 +1 位作者 张稷 肖琛月 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期576-577,共2页
为了解无锡地区淋病患者产青霉素酶淋球菌(PPNG)的流行情况,采用套式聚合酶链反应技术(nPCR)对本地区2000年4月~9月来无锡市第一人民医院就诊的217例淋病患者泌尿生殖道拭子标本进行了PPNG种特异β-内酰胺酶基因检测,并随机抽样对1例PP... 为了解无锡地区淋病患者产青霉素酶淋球菌(PPNG)的流行情况,采用套式聚合酶链反应技术(nPCR)对本地区2000年4月~9月来无锡市第一人民医院就诊的217例淋病患者泌尿生殖道拭子标本进行了PPNG种特异β-内酰胺酶基因检测,并随机抽样对1例PPNGnPCR阳性产物进行了全自动DNA序列测定。结果∶217例淋病患者PPNGnPCR总的检出率为27.65%(60/217),其中男性尿道拭子标本中的检出率为33.87%(42/124),女性宫颈拭子标本中的检出率为19.35%(18/93),男女淋病患者中PPNG的检出率有显著性差异(P<0.05)。nPCR阳性产物DNA测序结果显示其序列与Sanchez-Pescador等报道的PPNG典型株(DIS282)的序列高度同源(99.2%)。结果表明无锡地区淋病患者PPNG的感染率较高,nPCR不失为早期诊断PPNG感染及开展PPNG分子流行病学研究的良好手段。 展开更多
关键词 无锡地区 基因检测 淋病 奈瑟 产青霉素酶淋球 套式聚合酶链反应技术
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美国《Emerging Infectious Diseases》2015年第21卷第6期有关人兽共患病论文摘译 被引量:1
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作者 林丽 潘蕴蛟 陈亮 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期782-782,F0003,共2页
P925 1978-2013年中国ST-4821克隆群B群脑膜炎奈瑟菌的研究分析//Bingqing Zhu,Zheng Xu,Pengcheng Du,等在中国,B群脑膜炎奈瑟菌分离株数量正在逐年增加,它与2003年首次报告的高侵袭性C群脑膜炎奈瑟菌同属于ST-4821克隆群(CC4821)。... P925 1978-2013年中国ST-4821克隆群B群脑膜炎奈瑟菌的研究分析//Bingqing Zhu,Zheng Xu,Pengcheng Du,等在中国,B群脑膜炎奈瑟菌分离株数量正在逐年增加,它与2003年首次报告的高侵袭性C群脑膜炎奈瑟菌同属于ST-4821克隆群(CC4821)。我们鉴定了CC4821中48株B群和214株C群菌株的外膜蛋白基因。 展开更多
关键词 Diseases 人兽共患病 C群脑膜炎奈瑟 论文摘译 美国 外膜蛋白基因 B群 侵袭性
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C群流行性脑脊髓膜炎3例临床分析
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作者 高素香 王芳 曹海秀 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期F0003-F0003,共1页
目的了解近年流行性脑脊髓膜炎奈瑟菌群变迁、临床表现及特点、对抗生素的敏感性。方法对流脑疑似病例,通过脑脊液及急性期血液分离脑膜炎奈瑟菌、PCR检测急性期血清或脑脊液中脑膜炎奈瑟菌的DNA特异片断进行确诊。对临床确诊及病原确... 目的了解近年流行性脑脊髓膜炎奈瑟菌群变迁、临床表现及特点、对抗生素的敏感性。方法对流脑疑似病例,通过脑脊液及急性期血液分离脑膜炎奈瑟菌、PCR检测急性期血清或脑脊液中脑膜炎奈瑟菌的DNA特异片断进行确诊。对临床确诊及病原确诊的病例进行临床分型,观察病情变化及治疗效果,尤其对抗生素的疗效。结果7例流行性脑脊髓膜炎(临床确诊),其中3例脑脊液经江西省疾病预防控制中心检出C群脑膜炎奈瑟菌基因核酸片断,而同时送检的血清标本,则未检出脑膜炎奈瑟菌基因片断。脑脊液及血液细菌培养均未培养出脑膜炎奈瑟菌。结论九江地区有C群流行性脑脊髓膜炎散在发生。脑膜炎奈瑟菌基因核酸检测方法可以对流行性脑脊髓膜炎的确诊提供可靠依据。 展开更多
关键词 C群流行性脑脊髓膜炎 脑膜炎奈瑟菌基因核酸检测
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疫苗
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《生物技术通报》 CAS CSCD 1996年第5期66-68,共3页
961792 脑膜炎奈瑟氏球菌P64k外膜蛋白的克隆、表达及鉴别[英]/Guillen, G.…//Biotechnol.Apl.-1995,12(2).-72[译自DBA,1995,14(25),95-15046]
关键词 脑膜炎奈瑟氏球 环状糊精 融合蛋白 WESTERN印迹 狂犬病病毒 结核分枝杆 恶性疟原虫 融合基因 弗氏志贺氏 肠杆
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