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黄葵胶囊预处理人脐带间充质干细胞外泌体改善肾脏缺血-再灌注损伤的作用及机制 被引量：1
1
作者 姚雅韡 贺佳辉 +5 位作者 王浩 王誉潼 王睿妍 万幸雨 刘雨佳 吕兴华 《器官移植》 北大核心 2025年第2期237-245,共9页
目的 探讨黄葵胶囊预处理的人脐带间充质干细胞(HUC-MSC)来源外泌体(Exo)对肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)的影响及机制。方法 将HUC-MSC分别置于含有不同浓度的黄葵胶囊培养基中培养24 h,测定细胞活力,选取适宜浓度进行后续实验。选取50μg... 目的 探讨黄葵胶囊预处理的人脐带间充质干细胞(HUC-MSC)来源外泌体(Exo)对肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)的影响及机制。方法 将HUC-MSC分别置于含有不同浓度的黄葵胶囊培养基中培养24 h,测定细胞活力,选取适宜浓度进行后续实验。选取50μg/mL的黄葵胶囊预处理HUC-MSC 24 h,使用Exo提取试剂盒提取Exo,透射电镜观察其形态、纳米粒径分析检测粒径大小、蛋白质印迹法检测Exo膜表面标记蛋白表达。将人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)随机分为缺氧/复氧组(M组)、缺氧/复氧+Exo组(E组)和缺氧/复氧+黄葵胶囊预处理Exo组(H组)。蛋白质印迹法测定内质网应激(ERS)相关蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链反应测定ERS相关基因信使RNA(mRNA)表达。将小鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(I/R组)、缺血-再灌注+Exo组(E组)和缺血-再灌注+黄葵胶囊预处理Exo组(H组)。24 h后行肾脏组织学评估,血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)测定及炎症因子检测。结果 Exo和黄葵胶囊预处理Exo均具有双层膜结构,呈杯状形态;二者平均粒径大小分别为116.8 nm和81.3 nm;两者均表达CD9、CD63、TSG101。与M组比较,E组转录激活因子6(ATF6)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)蛋白相对表达量下降,m RNA相对表达量升高,C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白相对表达量升高,mRNA相对表达量下降;与E组相比,H组ATF6、PERK、CHOP蛋白相对表达量均降低,ATF6、PERK mRNA相对表达量下降(均为P<0.05)。动物实验结果显示,与Sham组相比,I/R组肾小管损伤评分升高,Scr、BUN、白细胞介素(IL)-1β、IL-10、IL-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平升高;与I/R组比较,E组和H组肾小管损伤评分降低,Scr、BUN、IL-1β、IL-10、IL-18、TNF-α水平下降;与E组比较,H组肾小管损伤评分下降,Scr、BUN、IL-1β、IL-10、IL-18、TNF-α水平下降(均为P<0.05)。结论 黄葵胶囊预处理HUC-MSC来源的Exo可通过抑制ERS,改善肾脏IRI。 展开更多
关键词 肾移植 缺血-再灌注损伤 黄葵胶囊 人脐带间充质干细胞 外泌体 内质网应激 急性肾损伤 炎症因子
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负载人脐带间充质干细胞外泌体的壳聚糖水凝胶促进慢性糖尿病大鼠的伤口愈合
2
作者 邱晓慧 王檬 +2 位作者 唐江解 周建大 金晨 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第10期2082-2091,共10页
目的探讨负载人脐带间充质干细胞(hUCMSC)外泌体(hUCMSC-exos)的壳聚糖(CS)水凝胶(Exos@CS-Gel)改善糖尿病伤口愈合的机制。方法提取hUCMSC外泌体并制备Exos@CS-Gel,通过细胞划痕和CCK-8实验评估其对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖与迁移... 目的探讨负载人脐带间充质干细胞(hUCMSC)外泌体(hUCMSC-exos)的壳聚糖(CS)水凝胶(Exos@CS-Gel)改善糖尿病伤口愈合的机制。方法提取hUCMSC外泌体并制备Exos@CS-Gel,通过细胞划痕和CCK-8实验评估其对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖与迁移的影响。采用链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠全层皮肤伤口模型,将24只大鼠随机分为4组:Exos@CS-Gel组(100μg hUCMSC-exos溶于100μL 24%CS水凝胶)、hUCMSC-exos组(100μg hUCMSC-exos溶于100μL PBS)、CS水凝胶组(100μL 24%CS水凝胶)和对照组(100μL PBS),局部注射覆盖伤口后,通过免疫组化、HE染色、免疫荧光及qRT-PCR评估伤口愈合效果及机制。结果成功提取hUCMSC-exos并制备Exos@CS-Gel。体外实验显示,Exos@CS-Gel促进HUVEC增殖与迁移(P<0.05)。体内实验结果显示,术后14 d Exos@CS-Gel组伤口愈合率达92.7%,高于hUCMSC-exos组(9.12%)、CS水凝胶组(16.28%)和对照组(25.98%)(P<0.05),微血管密度、血管内皮生长因子和转化生长因子β-1表达水平均升高。结论Exos@CS-Gel可提高外泌体体外生存能力,通过促进血管生成与细胞增殖等机制加速糖尿病伤口愈合。 展开更多
关键词 血管生成 糖尿病 外泌体 人脐带间充质干细胞 壳聚糖 水凝胶
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脐带间充质干细胞外泌体转运miR-21-5p促进子宫内膜间质细胞增殖的作用机制 被引量：7
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作者 吕承晓 段华 +2 位作者 汪沙 甘露 徐倩 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第12期1262-1268,共7页
目的脐带间充质干细胞(UCMSC)已被证实通过其外泌体发挥加速损伤子宫内膜修复的作用,但其具体作用机制仍不明确。文中旨在探索UCMSC外泌体所携带的miR-21-5p对于子宫内膜间质细胞增殖的影响。方法增殖期子宫内膜标本取自2018年1月至6月... 目的脐带间充质干细胞(UCMSC)已被证实通过其外泌体发挥加速损伤子宫内膜修复的作用,但其具体作用机制仍不明确。文中旨在探索UCMSC外泌体所携带的miR-21-5p对于子宫内膜间质细胞增殖的影响。方法增殖期子宫内膜标本取自2018年1月至6月首都医科大学附属北京妇产医院妇科微创中心,因宫颈上皮内瘤变III级、子宫肌瘤等行开腹或腹腔镜下全子宫切除的3例患者。通过胶原酶消化法原代分离培养子宫内膜间质细胞并鉴定。采用差速离心法提取UCMSC外泌体并鉴定。荧光定量PCR检测UCMSC外泌体及其处理后的子宫内膜间质细胞内的miR-21-5p的表达水平后,并通过CCK8和EdU染色检测抑制组(转染miR-21-5p inhibitor)、对照组(转染miR inhibitor NC)、空白组(未转染)子宫内膜间质细胞的增殖活性。此外,采用生物信息学分析预测外泌体miR-21-5p在子宫内膜间质细胞内的潜在靶mRNA及其所参与的主要细胞生物学进程。结果 CCK8结果显示,24、48、72 h,抑制组的吸光度显著低于对照组和空白组(P<0.01)。EdU染色结果显示,转染后48 h后,抑制组的外泌体增殖活性[(7.47±0.44)%]显著低于对照组和空白组[(13.47±0.47)%、(14.60±1.08)%],差异有统计学意义(P<0.01)。通过GO分析和KEGG通路富集分析,发现miR-21-5p的潜在靶基因参与2162种生物学进程(P<0.05)、300种分子生物学功能(P<0.05)和214种细胞学组分(P<0.05),并富集到3条细胞信号通路(P<0.05),推测miR-21-5p可能通过这些途径促进外泌体增殖和损伤子宫内膜损伤修复。结论 UCMSC外泌体通过转运miR-21-5p能够参与调控多种与子宫内膜再生修复相关的基因表达及信号通路,从而有效促进子宫内膜间质细胞增殖,加速损伤子宫内膜修复进程。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞外泌体 miR-21-5p 子宫内膜间质细胞 增殖 再生修复
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脐带间充质干细胞外泌体携载miR-4465抑制食管癌细胞的侵袭及迁移 被引量：2
4
作者 孙峰 谢玮 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第12期1252-1258,共7页
目的间质干细胞分泌的外泌体(MSC-ex)是MSC旁分泌的活性成分,在多种疾病包括肿瘤的治疗中有着重要的应用文章拟探讨人脐带间充质干细胞(MSC)外泌体携载miK-4465抑制食管癌细胞EC109侵袭、迁移的作用及机制方法分离、培养脐带MSCs并提取M... 目的间质干细胞分泌的外泌体(MSC-ex)是MSC旁分泌的活性成分,在多种疾病包括肿瘤的治疗中有着重要的应用文章拟探讨人脐带间充质干细胞(MSC)外泌体携载miK-4465抑制食管癌细胞EC109侵袭、迁移的作用及机制方法分离、培养脐带MSCs并提取MSC-ex,透射电镜、纳米颗粒分析观察外泌体的结构.Western blot检测外泌体标志蛋白CD9和CD81表达。超声法将miRNA mimics NC及miR-4465 mimics导入MSC-ex,获得miRNA mimics NC修饰MSC-ex(NC miR-ex)及miR-4465 mimics修饰MSC-ex(miR-4465-ex)。PBS、MSC-ex、miR-4465-ex分别与ECIO9共培养,采用激光共聚焦显微镜观察MSC-ex在细胞内分布,qRT-PCR检测ECl09的miR-4465水平,Transwell和划痕实验观察miR-4465 mimics转染及miR-4465-ex作用后EC109的迁移及侵袭能力,免疫印迹法检测EC109的上皮-间质化相关蛋白的表达。结果与NC miR-ex组(1.00±0.09)比较,miR-4465-ex 25 nmol/L、miR-4465-ex50nmol/L组EC109细胞中miR-4465表达水平(20_26±2.75、34.71±5.26)显著升高(P<0.01),且具有剂量依赖性。与mimicsNC组(84.67±4.60)相比,miR-4465 mimics25 nmol/L(23.67±4.14)转染组EC109细胞的迁移率明显降低(P<0.01),且miR-4465 mimics50nM(10.27±1.32)转染组EC109细胞的迁移率更加明显(P<0.01):与NC miR-ex组(82.35±4.52)比较,miR-4465-ex组(23.12±2.22)EC109细胞的迁移率明显降低(P<0.01),Westem blot结果表明,与PBS和NC miK-ex组相比,miK-4465-ex作用后EC109细胞M-Cadherin(P<0.05)、p-Smad1/2(P<O.Ol)和Vim-entin(P<0.01)表达下调,E-Cadherin表达上调(P<0.01)。结论MSC-ex作为载体携载高水平miR-4465,可能通过下调TGFp/Smadl/2通路抑制食管癌细胞EC109的侵袭、迁移。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 外泌体 食管癌细胞 miR-4465 迁移 侵袭
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人脐带间充质干细胞外泌体的分离鉴定及其溶血性能研究 被引量：8
5
作者 杨玮杰 李佳曌 +5 位作者 陈良键 张婧 刘凯鲁 张驰 肖月 李晶 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期165-170,共6页
目的:分离并鉴定人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSC)分泌的外泌体,研究其对人血的溶血性能。方法:通过超速离心法从脐带干细胞培养上清中分离外泌体,采用蛋白免疫印迹法、透射电镜和纳米颗粒跟踪... 目的:分离并鉴定人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSC)分泌的外泌体,研究其对人血的溶血性能。方法:通过超速离心法从脐带干细胞培养上清中分离外泌体,采用蛋白免疫印迹法、透射电镜和纳米颗粒跟踪分析法进行鉴定;制备人红细胞悬液,加入不同浓度外泌体,进行溶血试验,用试管法观察并用紫外分光光度法测定计算溶血度。结果:分离获得的外泌体特异富集蛋白CD9、CD81、Alix,不含有高尔基体蛋白Gm130;透射电镜下可见其呈杯盘状结构,粒径直径为40～120 nm;脐带干细胞外泌体对人血的溶血率小于5%。结论:HUCMSC分泌的外泌体具有外泌体的经典结构及典型特征,不引起人血溶血反应,为未来脐带干细胞外泌体作为载体进行药物递送提供了实验依据。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 外泌体 溶血试验
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大熊猫脐带间充质干细胞外泌体的分离鉴定及miRNAs富集分析 被引量：1
6
作者 安俊辉 李媛 +8 位作者 王东辉 陈佳松 李红艳 梁小虎 封同英 蔡志刚 侯蓉 曾长军 刘玉良 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期33-40,共8页
大熊猫脐带间充质干细胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)通过旁分泌所释放的外泌体在大熊猫保健与疾病治疗方面具有一定的应用前景。本研究旨在建立大熊猫UC-MSCs外泌体分离方法,开展生物学特征分析和分子鉴定,并研究U... 大熊猫脐带间充质干细胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)通过旁分泌所释放的外泌体在大熊猫保健与疾病治疗方面具有一定的应用前景。本研究旨在建立大熊猫UC-MSCs外泌体分离方法,开展生物学特征分析和分子鉴定,并研究UC-MSCs外泌体中miRNAs的种类与功能。采用超速离心法从大熊猫UCMSCs培养上清中成功分离外泌体,通过透射电子显微镜进行形态学观察,纳米颗粒跟踪分析仪检测粒径大小,蛋白免疫印迹法检测特异性分子标记表达。采用Small RNA测序技术对UC-MSCs外泌体中的miRNAs进行鉴定,并对其靶基因进行了预测与功能分析。结果显示,大熊猫UC-MSCs外泌体呈圆形杯托状结构,直径为(79.15±4.81)nm,外泌体标志蛋白CD81与TSG101呈阳性表达而CALNEXIN呈阴性表达。大熊猫UC-MSCs外泌体中的miRNA主要为miR-148-3p(30.28%)与miR-21-5p(21.72%)。本研究首次从大熊猫UC-MSCs培养上清中分离出外泌体,并对其所含的miRNAs进行富集分析及功能预测,为大熊猫UC-MSCs外泌体后续的功能研究及应用奠定基础。 展开更多
关键词 大熊猫 脐带间充质干细胞 外泌体 MIRNA
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miR-486基因修饰的脐带间充质干细胞外泌体对心肌细胞生物学特性影响 被引量：4
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作者 方玲 石雪峰 +4 位作者 孙慧燕 李宇翔 肖凤君 王华 王立生 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1531-1537,共7页
目的:观察miR-486基因修饰脐带间充质干细胞外泌体的生物学特性,评价其对大鼠H9c-2心肌细胞生物学特性的影响。方法:分离并扩增人脐带间充质干细胞(UC-MSC),并鉴定其免疫表型和成骨及成脂分化能力;用电子显微镜观测外泌体的形态结构;应... 目的:观察miR-486基因修饰脐带间充质干细胞外泌体的生物学特性,评价其对大鼠H9c-2心肌细胞生物学特性的影响。方法:分离并扩增人脐带间充质干细胞(UC-MSC),并鉴定其免疫表型和成骨及成脂分化能力;用电子显微镜观测外泌体的形态结构;应用Transwell细胞迁移实验观察外泌体对细胞迁移特性的影响。用重组腺病毒载体介导间充质干细胞高表达miR-486,应用qRT-PCR确定高表达miR-486的UC-MSC。收集培养上清,通过超速离心获得外泌体,应用qRT-PCR检测UC-MSC外泌体miR-486表达量。用Dye670标记评价外泌体对心肌细胞增殖的影响;在H2O2诱导的心肌细胞凋亡模型中通过AnnexinV/PI双标记流式细胞术检测外泌体对心肌细胞凋亡的影响。结果:UC-MSC分泌外泌体直径均在40-100 nm之间,且具有双膜结构。重组腺病毒能够有效介导miR-486在间充质干细胞表达,miR-486基因修饰UC-MSC分泌的外泌体中miR-486的表达显著增高。高表达miR-486的外泌体对心肌细胞有促增殖、促迁移作用及抑制心肌细胞凋亡的作用。结论:脐带间充质干细胞来源的且高表达miR-486的外泌体对心肌细胞有促增殖及抑制细胞凋亡作用。 展开更多
关键词 miR-486 脐带间充质干细胞 外泌体 基因治疗
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脐带间充质干细胞外泌体修复骨质疏松大鼠颅骨缺损的研究 被引量：2
8
作者 刘耘佟 李汶洋 向学熔 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期18-23,共6页
目的:探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HucMSCs)来源外泌体对骨质疏松大鼠颅骨缺损的修复作用。方法:提取HucMSCs来源外泌体,使用透射电镜及纳米颗粒追踪分析鉴定其形态及大小,使用Western blot鉴... 目的:探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HucMSCs)来源外泌体对骨质疏松大鼠颅骨缺损的修复作用。方法:提取HucMSCs来源外泌体,使用透射电镜及纳米颗粒追踪分析鉴定其形态及大小,使用Western blot鉴定其表面标志物;分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)并使用流式细胞术鉴定其表面标志物;将外泌体(空白对照、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL)与BMSCs共培养,检测不同浓度的外泌体对BMSCs增殖及成骨向分化的影响;选取SD大鼠通过卵巢切除术(ovariectomy,OVX)构建骨质疏松模型,在颅骨缺损模型建立的同时注射外泌体悬液,术后8周处死大鼠,取术区组织进行micro-CT扫描并进行骨量分析,HE染色后显微镜下观察骨缺损愈合情况,评价HucMSCs来源外泌体对骨质疏松大鼠颅骨缺损的修复潜能。结果:透射电镜及纳米颗粒追踪分析结果显示,提取的HucMSCs来源外泌体形态及大小符合要求,表面蛋白标志物CD63及CD81表达均呈阳性。大鼠BMSCs表面标志物CD29高表达(99.86%)、CD90高表达(99.50%),CD45低表达(4.12%),符合间充质干细胞特征。将60μg/mL的外泌体与BMSCs共培养5 d后细胞活力为对照组的(127.782±7.184)%(P=0.001),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达为对照组的(2.715±0.095)倍(P=0.003),Runx家族转录因子2(Runx family transcription factor 2,Runx2)的表达为对照组的(2.175±0.731)倍(P=0.140)。在OVX诱导的骨质疏松SD大鼠颅骨缺损模型的修复中,micro-CT显示外泌体组相对于对照组出现了明显的骨愈合增加,骨量分析结果显示外泌体组骨组织比例为(11.000±1.708)%(P=0.008),骨小梁数目为(0.742±0.112)mm-1(P=0.014),骨小梁厚度为(0.175±0.008)mm(P=0.005),骨小梁间隙为(1.402±0.507)mm(P=0.022)。组织学结果显示新生骨的结构完整、层次清晰,为致密的板层样骨,有均匀的骨基质和骨陷窝。结论:HucMSCs来源的外泌体能够促进BMSCs的增殖活性及成骨向分化,具有修复骨质疏松骨缺损的能力。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 外泌体 骨质疏松 颅骨缺损 骨再生
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间充质干细胞外泌体的研究进展与临床应用 被引量：3
9
作者 付学奇 曾琳琳 刘洋 《吉林大学学报(理学版)》 北大核心 2025年第1期207-215,共9页
间充质干细胞外泌体(MSC-Exos)是一类在实验研究及临床应用中具有巨大潜力的纳米级囊泡,含有多种生物分子,包括miRNA、mRNA、蛋白质和脂质等,具有介导细胞信号传导和参与调控受体细胞的功能.基于MSC-Exos的重要作用,从研究进展及临床应... 间充质干细胞外泌体(MSC-Exos)是一类在实验研究及临床应用中具有巨大潜力的纳米级囊泡,含有多种生物分子,包括miRNA、mRNA、蛋白质和脂质等,具有介导细胞信号传导和参与调控受体细胞的功能.基于MSC-Exos的重要作用,从研究进展及临床应用等方面综述MSC-Exos在促进组织修复、免疫调节和神经保护方面的显著效果,尤其在自身免疫性疾病、神经退行性疾病、心血管疾病及肿瘤方面的治疗中发挥重要作用,并分析其临床应用面临一系列尚未解决的问题及应用普及的挑战,包括阐明作用机制、分离提取纯化技术、制订标准化生产规则、确定剂量和给药途径、增强稳定性和降低免疫原性等,为解决这些局限性,实现MSC-Exos在临床上的广泛应用提供依据. 展开更多
关键词 间充质干细胞 外泌体 免疫疾病 神经疾病 临床应用
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人脐带间充质干细胞衍生的外泌体对新生大鼠脑白质损伤小胶质细胞极化的影响
10
作者 王超 徐倩倩 +1 位作者 张书绢 朱艳萍 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第16期2447-2454,共8页
目的观察人脐带间充质干细胞衍生的外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cellderived exosomes,HUC-MSC-Exo)对新生大鼠脑白质损伤(white matter injury,WMI)小胶质细胞极化的影响。方法将3日龄Sprague-Dawley大鼠随机分成假... 目的观察人脐带间充质干细胞衍生的外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cellderived exosomes,HUC-MSC-Exo)对新生大鼠脑白质损伤(white matter injury,WMI)小胶质细胞极化的影响。方法将3日龄Sprague-Dawley大鼠随机分成假手术(Sham)组、缺氧缺血(hypoxia-ischemia,HI)组和HUC-MSC-Exo组纳入研究,每组12只大鼠。采用单侧颈总动脉结扎联合缺氧(8%氧气和92%氮气)构建WMI大鼠模型;超高速离心法提取外泌体(exosomes,Exo)并通过纳米流式、免疫印迹实验和透射电镜进行表征;脑立体定位仪辅助下侧脑室移植Exo(2×10^(8)粒子/μL)并于HI后14 d进行脑组织样本获取。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察脑组织形态学改变;尼氏染色观察脑组织尼氏小体形成;劳克坚劳蓝(luxol fast blue,LFB)染色观察脑组织髓鞘的形成;免疫荧光染色观察离子钙结合适配器分子1(ionic calcium binds adaptor molecule 1,Iba1)的定位表达;免疫印迹实验检测分化簇86(cluster of differentiation86,CD86)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和CD206、精氨酸酶1(arginase-1,Arg-1)、IL-10、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)蛋白表达水平。结果纳米流式、免疫印迹实验和透射电镜结果显示,HUC-MSC-Exo粒子直径处于30~150 nm之间,呈现类椭圆形态并可见膜状结构,Exo标志物CD9、CD63、TSG101阳性而calnexin阴性表达。HE染色、尼氏染色和LFB染色显示,与Sham组相比,HI组出现脑组织结构破坏,表现为细胞形态改变、神经纤维排列紊乱及空泡化,尼氏小体溶解甚至消失,髓鞘形成受阻;HUC-MSC-Exo明显逆转了HI组病理学改变。免疫荧光染色和免疫印迹实验结果显示,小胶质细胞标志物Iba1主要表达于脑室下区(subventricular zone,SVZ),与Sham组相比,HI后SVZ区Iba1蛋白表达增加(t=15.95、20.31,P<0.01);HUC-MSC-Exo明显降低了HI组Iba1蛋白表达(t=10.35、11.01,P<0.01)。免疫印迹实验结果显示,与Sham组相比,HI后M1小胶质细胞标志物(CD86和i NOS)和促炎细胞因子(TNF-α和IL-1β)的表达均明显增加(t=10.98、7.68、15.13、13.13,均P<0.01),M2小胶质细胞标志物(CD206和Arg-1)和抗炎细胞因子(IL-10和TGF-β)的表达亦增加(t=14.26、9.38、8.82、7.42,均为P<0.01);与HI组相比,HUC-MSC-Exo降低了CD86、iNOS、TNF-α和IL-1β的蛋白表达(t=9.79、5.81、8.06、7.03,均P<0.01)而增加了CD206、Arg-1、IL-10和TGF-β的蛋白表达水平(t=12.90、8.16、8.98、9.49,均P<0.01)。结论HUC-MSC-Exo通过调控小胶质细胞极化减轻新生大鼠WMI。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 外泌体 白质损伤 小胶质细胞
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间充质干细胞及其外泌体治疗早发性卵巢功能不全的研究进展
11
作者 张耀东 李佳林 +2 位作者 娄艳茹 徐慧玉 杨蕊 《重庆医科大学学报》 北大核心 2025年第6期758-764,共7页
早发性卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency,POI)是一种严重影响女性生理和生殖功能的复杂内分泌疾病,已成为育龄期女性不孕的主要原因之一,其临床特征为闭经或月经稀发、低雌激素或雌激素缺乏以及促性腺激素水平升高。POI的... 早发性卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency,POI)是一种严重影响女性生理和生殖功能的复杂内分泌疾病,已成为育龄期女性不孕的主要原因之一,其临床特征为闭经或月经稀发、低雌激素或雌激素缺乏以及促性腺激素水平升高。POI的发病率呈上升趋势,且病因及发病机制尚不明确。目前临床上针对POI的常规治疗方法仍无法从根本上改善卵巢功能和解决生育问题。随着再生医学的发展,间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)已成为POI治疗的研究热点之一,其外泌体也作为一种新型的“无细胞治疗”方法而备受关注。多项动物研究显示,MSCs及其外泌体通过调控颗粒细胞增殖与凋亡、促进卵巢血管新生、增强抗氧化应激能力、抑制卵巢组织纤维化、促进卵泡发育与成熟以及调节卵巢局部免疫微环境等多重机制,发挥对POI的治疗作用。此外,相关临床研究也已取得一定进展。本文对MSCs及其外泌体治疗POI的相关机制及临床疗效进行综述,旨在为POI的深入研究及临床转化提供参考和依据。 展开更多
关键词 早发性卵巢功能不全 间充质干细胞 外泌体 再生医学
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脂肪间充质干细胞外泌体改善软骨损伤的研究进展
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作者 王琳 唐骜 彭博 《生理科学进展》 北大核心 2025年第4期395-400,共6页
关节软骨是人体重要的承重组织,其生物力学功能的维持依赖于结构的完整性。然而,由于缺乏血液供应,致使其损伤后难以自我修复,易导致骨关节炎和软骨退化性疾病。近年来,脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs... 关节软骨是人体重要的承重组织,其生物力学功能的维持依赖于结构的完整性。然而,由于缺乏血液供应,致使其损伤后难以自我修复,易导致骨关节炎和软骨退化性疾病。近年来,脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)凭借其来源丰富、分离便捷等优势,已被广泛应用于再生医学的研究中。由ADSCs旁分泌产生的外泌体不仅继承了亲本细胞的生物学特性,还具有低免疫原性、良好的生物屏障渗透性以及高稳定性,是细胞间信号传导的重要介质。ADSCs外泌体携带的RNA、蛋白质及生物因子能够调节免疫反应、促进软骨细胞增殖并增强其代谢活性。此外,外泌体还可通过上调成软骨基因的表达,抑制软骨降解基因,进而改善细胞外基质,促进软骨修复。作为一种优质的纳米药物载体,外泌体与生物工程相结合,可显著提高受损软骨的修复效率。本文对ADSCs来源的外泌体在软骨修复及相关疾病中的应用及其作用机制进行了综述,以期为外泌体疗法的标准化以及软骨损伤的临床治疗提供参考。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 外泌体 软骨修复 骨关节炎
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间充质干细胞源外泌体对动物急性肾损伤的治疗作用及机制研究进展 被引量：1
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作者 贺海洋 马保华 彭莎 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期115-125,共11页
急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)是一种发病迅速、病因复杂且致死率较高的肾脏疾病,对动物生命健康构成严重威胁。近年来,间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)作为治疗急性损伤的有效方法已被广泛认可。然而,由于细胞疗... 急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)是一种发病迅速、病因复杂且致死率较高的肾脏疾病,对动物生命健康构成严重威胁。近年来,间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)作为治疗急性损伤的有效方法已被广泛认可。然而,由于细胞疗法存在局限性,一种备受关注的新型无细胞治疗方法即间充质干细胞源外泌体(mesenchymal stem cell-derived exosomes, MSC-exos)在急性肾损伤治疗方面引起了极大关注。MSC-exos通过多种机制(如抑制炎症反应、减少凋亡以及调节自噬等方式)发挥着治愈急性肾损伤的作用。本文将总结MSC-exos在动物AKI治疗方面取得的相关进展,并旨在为基于干细胞来源外泌体进行动物临床治理和应用提供理论参考。 展开更多
关键词 急性肾损伤 间充质干细胞 外泌体
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骨髓间充质干细胞来源的外泌体抑制地塞米松诱导的C2C12肌管萎缩 被引量：1
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作者 柯义兵 丁永宏 +3 位作者 阿布都克热木·达吾提 郭浩然 兰志杰 王勇平 《中国药理学通报》 CAS 北大核心 2025年第1期50-56,共7页
目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)来源的外泌体(exsomes,EXOs)对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导的C2C12肌管萎缩的影响。方法(1)分离提取培养C57BL/6J小鼠BMSCs。(2)提取并鉴定BMSCs-EXOs。(3)C2... 目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)来源的外泌体(exsomes,EXOs)对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导的C2C12肌管萎缩的影响。方法(1)分离提取培养C57BL/6J小鼠BMSCs。(2)提取并鉴定BMSCs-EXOs。(3)C2C12细胞成肌分化。(4)将肌管细胞分为对照组(Control,2%马血清培养基培养48 h)、地塞米松组(DEX、浓度为10μmol·L^(-1)的DEX干预肌管48 h)、外泌体组(EXOs、外泌体干预肌管48 h)、外泌体抑制剂组(GW4869、10μmol的GW4869干预BMSCs后提取的外泌体干预肌管48 h)。48 h后测量各组肌管直径,CCK-8法检测各组细胞活力,Western blot检测各组肌肉萎缩及成肌分化相关蛋白的表达量。结果BMSCs呈长梭形,BMSCs-EXOs在透射电镜下为圆形的双层膜结构,直径约200 nm,且高表达CD9、CD63和CD81。相比于Control组,DEX组细胞活性降低(P<0.01),肌管细胞直径减少(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和MuRF-1(P<0.01)的表达明显上调,MYOD(P<0.01)蛋白表达降低;相比于DEX组,BMSCs-EXOs组细胞活性升高(P<0.01),肌管细胞直径增加(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和MuRF-1(P<0.01)的表达明显下调,MYOD(P<0.01)蛋白表达升高;相比于BMSCs-EXOs组,BMSCs-EXOs(GW4869)组细胞活性降低(P<0.05),肌管细胞直径减少(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和MuRF-1(P<0.05)的表达上调,MYOD(P<0.01)蛋白表达降低。结论骨髓间充质干细胞来源的外泌体(BMSCs-EXOs)可抑制地塞米松诱导的C2C12肌管萎缩。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 外泌体 地塞米松 肌管 肌肉萎缩 C2C12
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过表达Klotho的犬脂肪间充质干细胞源的外泌体对犬急性肾损伤的治疗作用
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作者 王晨蕾 郭鑫瑞 +3 位作者 贺海洋 刘阳 马保华 彭莎 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2978-2989,共12页
本研究旨在探究过表达Klotho的犬脂肪间充质干细胞来源的外泌体(exosomes from canine adipose derived mesenchymal stem cells overexpressing Klotho,KL-Exos)对犬急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的治疗作用。构建过表达Klotho... 本研究旨在探究过表达Klotho的犬脂肪间充质干细胞来源的外泌体(exosomes from canine adipose derived mesenchymal stem cells overexpressing Klotho,KL-Exos)对犬急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的治疗作用。构建过表达Klotho的重组质粒pCDH-EF1-copGFP-T2A-PURO-Klotho(EF1-KL重组质粒),并转染至犬脂肪间充质干细胞(canine adipose derived mesenchymal stem cells,cADMSCs),超速离心细胞培养液上清收集KL-Exos。选取8只一岁左右体况相近的雄性中华田园犬,随机分为4组,分别为正常对照组(NC)、急性肾损伤组(AKI)、Exos治疗组(Exo)和KL-Exos治疗组(KL-Exo)。AKI组、Exo组和KL-Exo组注射硫酸庆大霉素,剂量为60 mg·(kg·次)^(-1),每日两次,连续5 d;Exo组和KL-Exo组于第6、9、12天分别注射300μg的Exos或KL-Exos进行治疗,NC组和AKI组注射同等剂量的生理盐水。治疗完成后分别依次通过影像学、血清学、解剖学、组织学和分子生物学方法检测相关指标来综合评价治疗效果。测序结果表明,成功构建了EF1-KL重组质粒。相较于转染空载体组,转染EF1-KL重组质粒的cADMSCs的Klotho表达水平显著上调(P<0.001),提示成功建立了过表达Klotho的cADMSCs(KL-cADMSCs)。对该细胞培养液超速离心得到的沉淀进行检测,其粒径在150 nm左右,呈“茶托样”,表达外泌体标志蛋白CD63和Alix,以上结果均证明该沉淀属于外泌体。治疗结果显示,相较于AKI组犬,Exo组和KL-Exo组犬的肾功能显著提高、肾脏的形态质地和组织结构明显恢复好转、肾脏氧化应激程度下降。相较于Exo组犬,KL-Exo组犬的血清肌酐(Cre)浓度(P<0.0001)和尿素氮(Bun)浓度(P<0.0001)极显著下降;B超检查未见明显的肾脏积液;肾脏呈红褐色,质地柔软光滑;苏木精-伊红(HE)染色结果显示,肾小管排列整齐,未见淤血等病变;肾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)浓度显著升高(P<0.0001),过氧化氢(H_(2)O_(2))(P<0.0001)和丙二醛(MDA)(P<0.01)浓度显著下降;肾脏中kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)的基因表达水平显著上调(P<0.05),核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)的基因表达水平的下调趋势更加明显。KL-Exos主要通过减少肾脏组织氧化应激,提高机体抗氧化能力来治疗犬的AKI,Keap1-Nrf2信号通路可能是KL-Exos治疗AKI的关键通路。 展开更多
关键词 KLOTHO 外泌体 脂肪间充质干细胞 急性肾损伤 犬
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负载姜黄素的犬脂肪间充质干细胞来源外泌体对皮肤损伤愈合的效果及机制研究
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作者 王苗 伏庭书 +4 位作者 陈梦炜 周宏达 柏小楠 马保华 彭莎 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期4042-4052,共11页
本研究旨在探讨负载姜黄素(curcumin,CUR)的犬脂肪间充质干细胞来源的外泌体(exosomes derived from adipose mesenchymal stem cells,cADMSC-EXO)对皮肤损伤修复的效果及可行性。将小鼠和犬随机分为四组:对照组(CON)、外泌体治疗组(EXO... 本研究旨在探讨负载姜黄素(curcumin,CUR)的犬脂肪间充质干细胞来源的外泌体(exosomes derived from adipose mesenchymal stem cells,cADMSC-EXO)对皮肤损伤修复的效果及可行性。将小鼠和犬随机分为四组:对照组(CON)、外泌体治疗组(EXO)、姜黄素治疗组(CUR)和负载姜黄素的外泌体组(EXO-CUR)。制作直径1 cm(小鼠)和1.5 cm(犬)的背部全层皮肤损伤模型,并在第1、3、5、7、9天进行皮下注射。结果发现,相较于CON组和其他单独治疗组,负载CUR的cADMSC-EXO能够加速小鼠和犬皮肤损伤模型的伤口愈合,显著促进皮肤组织结构的恢复。其通过上调皮肤愈合相关基因(VEGFA、FGF 2)和抗炎因子IL-10的表达,促进损伤修复;同时下调疤痕相关基因(SOX9、TGF-β1、Twist 1)并上调TGF-β3的表达,减少瘢痕形成。此外,小鼠血清中皮肤愈合因子(VEGF、FGF2)水平升高,氧化应激相关因子ROS减少,GSH水平增加;炎症因子(IL-1β、TNF-α)含量降低。负载CUR的cADMSC-EXO能够有效促进皮肤损伤的修复,且相较于单独使用CUR或者EXO效果更佳。 展开更多
关键词 皮肤损伤 脂肪间充质干细胞 外泌体 姜黄素 小鼠 犬
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人脂肪间充质干细胞外泌体对去势小鼠骨质疏松的预防
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作者 盛春辉 张晓 +1 位作者 吕珑薇 周永胜 《北京大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期217-226,共10页
目的:研究人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hASCs)外泌体对骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响,以及对雌激素缺乏引起的骨质疏松的预防效果。方... 目的:研究人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hASCs)外泌体对骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响,以及对雌激素缺乏引起的骨质疏松的预防效果。方法:采用超速离心法提取hASCs分泌的外泌体,然后提取骨质疏松小鼠BMSCs,并将这些细胞暴露于含有hASCs外泌体的成骨诱导培养基中作为实验组,同时使用不含hASCs外泌体的成骨诱导培养基对BMSCs进行成骨诱导作为对照组,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和定量分析以及实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qPCR)检测评估hASCs外泌体对BMSCs成骨分化的影响。将标记有荧光信号的hASCs外泌体通过尾静脉注射入小鼠体内,观察外泌体的体内分布情况。切除小鼠双侧卵巢构建小鼠雌激素缺乏模型,术后两周将小鼠分为3组:实验组为雌激素缺乏小鼠接受hASCs外泌体注射;阴性对照组为雌激素缺乏小鼠接受磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffered saline,PBS)注射;阳性对照组为假手术(Sham)小鼠接受PBS注射,每3天注射1次,共注射8次后收集小鼠股骨,拍摄显微CT(micro computed tomography,micro-CT),计算骨密度并进行骨形态学分析。结果:使用超速离心法成功提取hASCs外泌体。hASCs外泌体使骨质疏松小鼠BMSCs的ALP染色加深,ALP活性增强,成骨相关基因表达上调。注射hASCs外泌体的雌激素缺乏小鼠较注射PBS的雌激素缺乏小鼠股骨骨小梁更为致密,骨密度增大,并且与Sham组相比并未出现明显的骨密度降低。结论:hASCs外泌体不仅能在体外促进骨质疏松小鼠BMSCs的成骨分化,还能在体内有效预防去势小鼠骨质疏松的发生,这些发现为hASCs外泌体作为一种新型的生物治疗手段在骨质疏松症的预防中的应用提供了科学依据。 展开更多
关键词 间充质干细胞 成骨分化 外泌体 骨质疏松
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间充质干细胞外泌体与阿尔茨海默病研究进展
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作者 刘思睿 王亚东 +2 位作者 陈祉伊 韩景献 张雪竹 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第9期113-121,共9页
随着世界老龄化的发展,阿尔茨海默病(AD)已成为严重危害人类健康的疾病。鉴于AD的发病机制十分复杂,现阶段临床上尚缺乏能够有效干预疾病进程的治疗方案。间充质干细胞来源的外泌体(MSC⁃Exos)因其强大的再生特性与修复功能而出现在医学... 随着世界老龄化的发展,阿尔茨海默病(AD)已成为严重危害人类健康的疾病。鉴于AD的发病机制十分复杂,现阶段临床上尚缺乏能够有效干预疾病进程的治疗方案。间充质干细胞来源的外泌体(MSC⁃Exos)因其强大的再生特性与修复功能而出现在医学新视角,它具有来源于供者、低免疫原性、易于保存、天然载体、肿瘤形成风险低等特点,在治疗AD和后遗症康复中展现出巨大潜力。基于此,本文介绍了AD的病理机制和间充质干细胞外泌体的特点,并对MSC⁃Exos抗炎、免疫调节、相关信号通路调节等作用治疗AD展开详细综述,讨论最新的相关研究进展,以期为AD的治疗方法提供新方向。 展开更多
关键词 外泌体 间充质干细胞 阿尔茨海默病
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骨髓间充质干细胞外泌体通过TLR4/NF-κB信号通路减轻小鼠脓毒症肺损伤
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作者 卢建双 王蓓蓓 +2 位作者 邹婷 朱艳可 孙媛媛 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第8期1596-1604,共9页
目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)外泌体(MSC-derived exosomes,MSC-Exos)通过靶向Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路对小鼠脓毒症肺损伤的影响。方法:通... 目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)外泌体(MSC-derived exosomes,MSC-Exos)通过靶向Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路对小鼠脓毒症肺损伤的影响。方法:通过超速离心从骨髓MSCs中获得MSC-Exos。使用透射电子显微镜(transmission electron microscopy,TEM)、纳米粒子追踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)和Western blot分别检测外泌体形状、粒径大小及CD63、TSG101、HSP-70的表达。通过盲肠结扎和穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)建立C57BL/6小鼠脓毒症肺损伤模型。CLP后3 h进行MSC-Exos腹腔注射。在CLP后6、12、24和72 h收集血液和肺组织样本。使用ELISA法检测白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)、IL-6、IL-1β和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis fac‑tor-α,TNF-α)的浓度。使用HE染色评估小鼠肺组织损伤情况。RT-qPCR和Western blot检测TLR4/NF-κB通路表达情况。结果:通过TEM、Western blot和NTA鉴定表明成功获取外泌体。小鼠在CLP组术后12 h开始出现肺损伤表现,至72 h时最明显。TNF-α在CLP后6 h显著升高,IL-1β、IL-10和IL-6水平在CLP后12 h显著升高,所有细胞因子均在72 h达到高峰。MSC-Exos干预组与CLP组相比,肺损伤程度显著降低(P<0.05)。MSC-Exos干预组IL-10、IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度在CLP后12 h达到峰值,随后逐渐下降,并最终在CLP后72 h恢复到初始水平。CLP组TLR4和NF-κB表达在6 h显著增加,在72 h达到峰值。MSC-Exos干预组的TLR4和NF-κB表达水平在24 h达到峰值,72 h降到正常。结论:骨髓MSC-Exos可能通过下调TLR4/NF-κB信号通路,调节炎症细胞因子水平,显著减轻脓毒症肺损伤。 展开更多
关键词 间充质干细胞 外泌体 脓毒症肺损伤 炎症 TLR4/NF-κB信号通路
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肿节风总黄酮影响骨髓间充质干细胞及其外泌体促进巨核细胞分化的作用及机制
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作者 刘慧珍 卢晓南 +4 位作者 柳歌 蔡关庆 李平安 曾英坚 尚广彬 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第11期1618-1626,共9页
目的 探索肿节风总黄酮(TFFSG)影响免疫性血小板减少症(ITP)状态骨髓间充质干细胞(BMSCs)及其外泌体(BMSCs-Exos)促进巨核细胞分化成熟的效应及机制。方法 SD大鼠BMSCs为研究对象,分为空白对照组、ITP-BMSCs模型组、肿节风总黄酮低(1.95... 目的 探索肿节风总黄酮(TFFSG)影响免疫性血小板减少症(ITP)状态骨髓间充质干细胞(BMSCs)及其外泌体(BMSCs-Exos)促进巨核细胞分化成熟的效应及机制。方法 SD大鼠BMSCs为研究对象,分为空白对照组、ITP-BMSCs模型组、肿节风总黄酮低(1.95μg/mL)、中(3.90μg/mL)、高(7.80μg/mL)剂量干预组。分别检测各组BMSCs细胞凋亡率及相关蛋白,B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(BAX)和胱天蛋白酶-3(Caspase-3)的表达情况。提取空白对照组外泌体(NC-BMSCs-Exos)、ITPBMSCs模型组外泌体(APS-BMSCs-Exos),肿节风总黄酮中剂量组的外泌体(TFFSG-BMSCs-Exos),各组外泌体5μg/mL与巨核系Dami细胞共培养96 h,流式细胞术检测各组细胞巨核系分化标志分子(CD41a、CD42b、CD61)表达和多倍体细胞(≥4 N)比例,Western Blot检测各组细胞p-MEK1/2、MEK1/2和p-ERK1/2、ERK1/2的表达。结果 与ITP-BMSCs模型组相比,肿节风总黄酮低、中、高3个剂量组BMSCs凋亡率均显著下降(P <0.01),肿节风总黄酮的中、高剂量组BAX和Caspase-3的表达显著下调,而Bcl-2的表达则显著上调(P <0.05,P <0.01)。与ITP-BMSCs-Exos组比较,TFFSG-BMSCs-Exos组的Dami细胞巨核系分化标志分子CD41a^(+)、CD42b^(+)、CD61^(+)和多倍体细胞(≥4 N)比例显著增加(P <0.05),p-MEK1/2/MEK1/2和p-ERK1/2/ERK1/2表达明显上调(P <0.05)。结论 肿节风总黄酮能抑制体外ITP状态BMSCs凋亡,同时可以通过BMSCs-Exos上调MEK1/2/ERK1/2信号通路促进巨核细胞分化和多倍体化成熟。 展开更多
关键词 免疫性血小板减少症 骨髓间充质干细胞 外泌体 肿节风总黄酮
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