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脉络膜微血管内皮细胞的培养及相关研究 被引量:2
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作者 赵炜 王雨生 惠延年 《眼科新进展》 CAS 2004年第3期227-230,共4页
脉络膜新生血管与眼部多种疾病有关 ,而脉络膜微血管内皮细胞是研究脉络膜新生血管的重要工具。目前已有数种脉络膜微血管内皮细胞体外培养体系 。
关键词 细胞培养 脉络膜微血管内皮细胞 脉络膜新生血管
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牛脉络膜微血管内皮细胞纯化和体外培养的改良方法
2
作者 赵炜 王雨生 +1 位作者 朱洁 惠延年 《眼科新进展》 CAS 2008年第3期161-165,共5页
目的建立快速、简便地培养脉络膜微血管内皮细胞的方法,为脉络膜新生血管疾病的研究提供细胞模型。方法显微分离牛脉络膜微血管,采用1g·L-1胶原酶一步法消化,并采用免疫磁珠分选脉络膜微血管内皮细胞,使用内皮细胞培养基进行原代... 目的建立快速、简便地培养脉络膜微血管内皮细胞的方法,为脉络膜新生血管疾病的研究提供细胞模型。方法显微分离牛脉络膜微血管,采用1g·L-1胶原酶一步法消化,并采用免疫磁珠分选脉络膜微血管内皮细胞,使用内皮细胞培养基进行原代培养。利用光学和电子显微镜进行形态学观察,利用Von Willebrand因子免疫荧光染色及Dil-Ac-LDL吞噬实验进行细胞学鉴定,利用管腔形成实验观察内皮细胞形成管腔能力。结果采用本研究改良的方法可以获得纯度高达95%的脉络膜微血管内皮细胞,外观呈细长形,融合后呈典型铺路石样外观。电子显微镜观察可见胞浆内靠近核膜外的Weibel-Palade小体(棒状小体);免疫荧光显示Von Willebrand因子表达阳性,Dil-Ac-LDL吞噬实验阳性;在凝胶中可以形成明显管腔结构。结论本研究改良的方法成功地分离并纯化了牛脉络膜微血管内皮细胞,可在短期内快速简便地获得足够数量的内皮细胞。 展开更多
关键词 脉络膜微血管内皮细胞 细胞培养
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糖基化终产物对脉络膜微血管内皮细胞增生和管腔形成的影响(英文) 被引量:3
3
作者 王雨生 Ulrike Friedrichs +2 位作者 Wolfram Eichler Stephan Hoffmann Peter Wiedemann 《国际眼科杂志》 CAS 2005年第2期209-216,共8页
目的:研究糖基化终产物(advanced glycationendproducts, AGEs)在年龄相关性黄斑变性发生中的作用。方法:使用lycopersiconesculentum agglutinin包被磁珠的改良方法分离牛脉络膜微血管内皮细胞(bovine choroidalendothelialcells, CEC)... 目的:研究糖基化终产物(advanced glycationendproducts, AGEs)在年龄相关性黄斑变性发生中的作用。方法:使用lycopersiconesculentum agglutinin包被磁珠的改良方法分离牛脉络膜微血管内皮细胞(bovine choroidalendothelialcells, CEC),采用抗VIII因子免疫细胞化学法和摄取低密度脂蛋白(dil-acetylated low-density lipoprotein,dil-ac-LDL)法进行细胞鉴定。将50g/L牛血清白蛋白和150g/L葡萄糖在37℃孵育6wk 以制备AGEs,通过抗-AGEs 抗体点杂交法定性分析。用MTT 法(3,(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyl te-trazolium bromide assay)测定CEC 增生,用Vit-rogen凝胶系统观察管腔形成情况。结果:培养细胞中90%以上呈因子阳性,并具有摄取dil-ac-LDL的能力,表明具有内皮细胞的特征。制备的AGEs 与抗-AGEs 抗体具有亲和力。浓度在62.5~500mg/L范围内的AGEs 处理CEC 3d 后,细胞增生呈剂量依赖性增加。碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor, bFGF)可明显增强CEC 中管腔样结构的形成(P <0.05),但500mg/L和50mg/L的AGEs 对CEC 管腔形成无明显影响(P >0.05)。结论:AGEs 可以促进CEC 的增生,但对其管腔形成无影响。提示AGEs 通过增强CEC 增生,可能是渗出型AMD 发病中潜在的启动因子之一? 展开更多
关键词 糖基化终产物 管腔形成 血管内皮细胞增生 碱性成纤维细胞生长因子 脉络膜微血管内皮细胞 年龄相关性黄斑变性 免疫细胞化学法 AGEs 低密度脂蛋白 VIII因子 牛血清白蛋白 factor EC增生 cells 剂量依赖性 CEC 改良方法
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紫檀芪对高糖介导的人视网膜微血管内皮细胞内皮间充质转化的抑制作用
4
作者 汪小兰 杨瀚毅 +6 位作者 张益萌 刘思达 陈城明 谢婷珂 陈奕玄 宁佳怡 韩静 《国际眼科杂志》 2025年第3期359-364,共6页
目的:探讨紫檀芪对高糖环境下诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)内皮间充质转化(EndMT)的潜在抑制作用。方法:采用CCK-8测定法确定紫檀芪处理HRMECs的最适浓度,选择了12.5、25μmol/L的浓度进行后续实验。将HRMECs分为对照组、高糖... 目的:探讨紫檀芪对高糖环境下诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)内皮间充质转化(EndMT)的潜在抑制作用。方法:采用CCK-8测定法确定紫檀芪处理HRMECs的最适浓度,选择了12.5、25μmol/L的浓度进行后续实验。将HRMECs分为对照组、高糖组、高糖联合12.5μmol/L紫檀芪处理组以及高糖联合25μmol/L紫檀芪处理组。通过Western blot法检测各组细胞中HDAC7表达以及与EndMT相关的标志蛋白水平;Transwell迁移实验和划痕愈合实验评估各组细胞的迁移能力;管腔形成实验用于评价细胞的血管生成能力。结果:CCK-8实验结果表明紫檀芪在22.07μmol/L浓度时能将HRMECs细胞活性抑制50%。Western blot分析显示,相较于对照组,高糖培养的HRMECs中HDAC7、ZEB1、Vimentin和Snail的表达水平显著升高(均P<0.01),而VE-cadherin和CD31的表达显著降低(均P<0.01)。相较于高糖组,12.5、25μmol/L紫檀芪的处理能够显著降低高糖条件下的HDAC7、ZEB1、Vimentin和Snail的表达(均P<0.01),25μmol/L紫檀芪能够增强VE-cadherin和CD31的表达(均P<0.01)。划痕实验结果显示,高糖处理组的HRMECs显示出较对照组显著增加的细胞迁移率(P<0.05),而25μmol/L紫檀芪的应用均显著抑制了HRMECs在高糖条件下的细胞迁移(P<0.01)。Transwell迁移实验结果显示,高糖组的细胞迁移率显著高于对照组(P<0.01),且12.5、25μmol/L紫檀芪处理后细胞迁移率较高糖组明显降低(均P<0.01)。管腔形成实验表明,高糖环境下HRMECs的管腔形成能力显著增强(P<0.01),并且12.5、25μmol/L紫檀芪均能有效抑制这一效应(均P<0.01)。结论:紫檀芪能抑制高糖介导的HRMECs的EndMT及HDAC7的表达,并抑制细胞迁移及管腔形成能力。 展开更多
关键词 紫檀芪 糖尿病视网膜病变 人视网膜微血管内皮细胞 内皮间充质转化 组蛋白去乙酰化酶7
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卡巴胆碱对失血性休克大鼠肺微血管内皮细胞功能的影响
5
作者 陈超 王化冰 +3 位作者 索小燕 李征 张辉 李方方 《河南医学研究》 CAS 2024年第11期1935-1939,共5页
目的 观察大鼠失血性休克时卡巴胆碱对肺微血管内皮细胞的作用。方法 将30只健康雄性SD大鼠(SPF级)按每组10只随机分为假休克组(SS组)、失血性休克组(HS组)、失血性休克+卡巴胆碱组(CBL组)。失血性休克动物模型按照Wiggers改良法制作,... 目的 观察大鼠失血性休克时卡巴胆碱对肺微血管内皮细胞的作用。方法 将30只健康雄性SD大鼠(SPF级)按每组10只随机分为假休克组(SS组)、失血性休克组(HS组)、失血性休克+卡巴胆碱组(CBL组)。失血性休克动物模型按照Wiggers改良法制作,各组模型制备完毕后6 h,经右侧股动脉采血,检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,取右肺下叶肺组织检测Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)、E-选择素蛋白质水平,取右肺下叶行透射电镜检查肺微血管内皮细胞超微结构。结果 SS组表达少量的TNF-α、SSeCKS、E-选择素,HS组和CBL组表达升高(P<0.05),与HS组相比,CBL组表达降低(P<0.05)。SS组肺微血管内皮细胞细胞膜表面光滑,细胞膜、细胞质、细胞核形态结构正常;HS组肺微血管内皮细胞出现细胞水肿、坏死和凋亡表现(细胞膜表面皱折、细胞膜表面凹凸不平、细胞器水肿、异染色质染色加深边集等);CBL组较SS组,细胞有所损伤,但好于HS组。结论 大鼠失血性休克时卡巴胆碱对肺微血管内皮细胞具有保护作用,也可通过抑制炎症细胞合成和释放炎症介质减轻对血管内皮细胞的损伤。 展开更多
关键词 失血性休克 微血管内皮细胞 卡巴胆碱 SSECKS E-选择素
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基于内皮细胞功能障碍探讨糖尿病微血管病变“微型癥瘕”病机理论的科学内涵 被引量:3
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作者 魏金艳 赵进喜 +4 位作者 黄为钧 罗文轩 王世东 苏冠旬 傅强 《环球中医药》 CAS 2024年第7期1345-1348,共4页
基于中医理论及当前科学研究发现,糖尿病微血管病变内皮细胞功能障碍与中医“微型癥瘕”病机理论存在着深刻的联系。糖尿病热伤气阴,病久入络后可致血脉气血阴阳亏虚,人体正气亏虚,瘕聚阶段无形可查;持续进展可致痰、热、郁、瘀痼结于... 基于中医理论及当前科学研究发现,糖尿病微血管病变内皮细胞功能障碍与中医“微型癥瘕”病机理论存在着深刻的联系。糖尿病热伤气阴,病久入络后可致血脉气血阴阳亏虚,人体正气亏虚,瘕聚阶段无形可查;持续进展可致痰、热、郁、瘀痼结于络脉形成癥积而有形可征。国医大师吕仁和教授称之为“微型癥瘕”病机理论,其中正气亏虚是瘕聚发生的基础,痰热郁瘀是癥积形成的关键,这与微血管在内皮细胞功能异常的基础上进一步进展至结构改变,最终导致糖尿病微血管内皮细胞功能障碍的病理过程相一致。内皮细胞功能异常与结构改变可视为正气亏虚及痰热郁瘀的微观体现,共同诠释糖尿病微血管病变“微型癥瘕”病机理论的科学内涵。此认识可为中医药防治糖尿病微血管病变提供新的研究角度和方向,为临床和科研的开展提供充分的理论支撑。 展开更多
关键词 糖尿病 微血管病变 微型癥瘕 络脉病变 孙络—微血管 内皮细胞功能障碍 氧化应激 炎症反应
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lncRNA SNHG6对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞损伤的影响
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作者 吴海星 周金红 +3 位作者 吴田莉 章沐曦 李小义 张学东 《国际眼科杂志》 CAS 2024年第11期1715-1720,共6页
目的:探讨lncRNA SNHG6对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)损伤的影响及其可能的作用机制。方法:采用高糖诱导hRMECs建立细胞损伤模型。高糖(HG)组将hRMECs培养在浓度为25 mmol/L D-葡萄糖的DMEM培养基24 h;正常(NG)组将hRMEC... 目的:探讨lncRNA SNHG6对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)损伤的影响及其可能的作用机制。方法:采用高糖诱导hRMECs建立细胞损伤模型。高糖(HG)组将hRMECs培养在浓度为25 mmol/L D-葡萄糖的DMEM培养基24 h;正常(NG)组将hRMECs培养在浓度为5.5 mmol/L D-葡萄糖的DMEM培养基;按照实验设计分别将si-NC、si-SNHG6、si-SNHG6和anti-miR-NC、si-SNHG6和anti-miR-186-5p转染至hRMECs,随后25 mmol/L D-葡萄糖孵育24 h,分别记为HG+si-NC组、HG+si-SNHG6组、HG+si-SNHG6+anti-miR-NC组、HG+si-SNHG6+anti-miR-186-5p组。qRT-PCR法检测lncRNA SNHG6、miR-186-5p的表达量;双荧光素酶报告实验检测lncRNA SNHG6与miR-186-5p的靶向关系;MTT法与流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;ELISA法检测IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10的水平;采用试剂盒检测SOD的活性和MDA的水平;Western blot检测cleaved-caspase3、Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果:HG组与NG组比较lncRNA SNHG6表达升高,miR-186-5p表达降低(均P<0.05);lncRNA SNHG6可靶向结合miR-186-5p。转染si-SNHG6后细胞增殖抑制率、凋亡率、cleaved-caspase3、Bax蛋白水平,IL-1β、TNF-α、IL-8含量以及MDA活性降低(P<0.05),而Bcl-2蛋白、IL-10含量以及SOD的活性升高(P<0.05)。共转染si-SNHG6和anti-miR-186-5p后,细胞增殖抑制率、凋亡率、cleaved-caspase3、Bax、IL-1β、TNF-α、IL-8以及MDA升高(P<0.05),而Bcl-2蛋白、IL-10和SOD降低(P<0.05)。结论:干扰lncRNA SNHG6表达可通过促进miR-186-5p表达而抑制高糖诱导的hRMECs凋亡、炎症反应及氧化应激。 展开更多
关键词 人视网膜微血管内皮细胞 lncRNA SNHG6 miR-186-5p 细胞增殖 凋亡 炎症 氧化应激
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蓝舌病病毒感染对绵羊微血管内皮细胞中Ⅰ型干扰素应答的影响
8
作者 罗世美 陈韵伊 +7 位作者 李其沙 周艳梅 胡雪柔 李铭悦 魏子昱 李芳 马鲜平 易华山 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5631-5640,共10页
蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)是一种严重危害绵羊等反刍动物的虫媒病毒,而绵羊微血管内皮细胞(sheep lung microvascular endothelial cells,SLMECs)构成肺半选择性屏障,为研究BTV感染与SLMECs干扰素抗病毒免疫应答的分子机制。本... 蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)是一种严重危害绵羊等反刍动物的虫媒病毒,而绵羊微血管内皮细胞(sheep lung microvascular endothelial cells,SLMECs)构成肺半选择性屏障,为研究BTV感染与SLMECs干扰素抗病毒免疫应答的分子机制。本研究通过BTV噬斑试验以感染复数(MOI)为1的BTV诱导18、24、36 h的SLMECs,通过实时荧光定量PCR分析干扰素相关通路基因mRNA表达特征,以及Western blot分析MDA5、TRAF3、RIG-I和TBK1蛋白表达。结果表明,在诱导36 h时,干扰素信号通路基因mRNA表达的变化最明显,RIG-I、MDA5、IKKε、IFN-β、TBK 1和TRAF 6基因mRNA上调表达,差异极显著;而IFN-α、VISA、USP 18基因mRNA下调表达,差异极显著;在蛋白水平上MDA5、TBK1、RIG-I和TRAF3蛋白都上调表达。本研究发现BTV可感染SLMECs诱导Ⅰ型干扰素免疫应答,为进一步分析IFN-I信号通路的激活在抗BTV感染天然免疫应答中的作用机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒 Ⅰ型干扰素 绵羊肺微血管内皮细胞
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丹参通络解毒汤含药血清调控MALAT1对缺氧/复氧大鼠心肌微血管内皮细胞的保护作用及机制研究 被引量:3
9
作者 夏旭婷 李昇聪 +2 位作者 李鑫辉 蒋啸 李彩云 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第1期110-116,共7页
目的研究丹参通络解毒汤含药血清调控转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)对缺氧/复氧大鼠心肌微血管内皮细胞(CMECs)的保护作用及机制。方法体外培养大鼠CMECs,构建缺氧/复氧损伤细胞模型,转染过表达/沉默空白MALAT1慢病毒,将细胞分为过表... 目的研究丹参通络解毒汤含药血清调控转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)对缺氧/复氧大鼠心肌微血管内皮细胞(CMECs)的保护作用及机制。方法体外培养大鼠CMECs,构建缺氧/复氧损伤细胞模型,转染过表达/沉默空白MALAT1慢病毒,将细胞分为过表达空白+中药组、过表达MALAT1+中药组、过表达MALAT1组、沉默空白+中药组、沉默MALAT1组、沉默MALAT1+中药组,分别予相应血清培养,免疫荧光染色检测Beclin-1蛋白表达,Western blot检测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(SRPK1)、丝氨酸丰富剪接因子1(SRSF1)、血管内皮生长因子(VEGF)及Bax蛋白表达,RT-PCR检测MALAT1、SRPK1、SRSF1 mRNA表达。结果与过表达空白+中药组比较,过表达MALAT1+中药组Beclin-1蛋白表达升高,SRPK1、SRSF1、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01),VEGF蛋白表达显著降低(P<0.01),MALAT1、SRPK1、SRSF1 mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01);与过表达MALAT1组比较,过表达MALAT1+中药组Beclin-1蛋白表达降低,SRPK1、SRSF1、Bax蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05),VEGF蛋白表达显著升高(P<0.01),MALAT1、SRPK1、SRSF1 mRNA表达显著降低(P<0.05);与沉默空白+中药组比较,沉默MALAT1+中药组Beclin-1蛋白表达降低,SRPK1、SRSF1、Bax蛋白表达显著降低(P<0.01),VEGF蛋白表达显著升高(P<0.01),MALAT1、SRPK1、SRSF1 mRNA表达显著降低(P<0.01);与沉默MALAT1组比较,沉默MALAT1+中药组Beclin-1蛋白表达降低,SRPK1、SRSF1、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05),VEGF表达显著升高(P<0.01),MALAT1、SRPK1、SRSF1 mRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论上调MALAT1表达可促进缺氧/复氧损伤模型CMECs自噬,丹参通络解毒汤含药血清能通过抑制MALAT1表达抑制自噬、促进血管新生,其机制可能与下调SRPK1、SRSF1表达有关。 展开更多
关键词 丹参通络解毒汤 缺氧/复氧 心肌微血管内皮细胞 自噬 MALAT1 SRPK1 SRSF1
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虫草素对高糖培养的恒河猴脉络膜-视网膜血管内皮细胞血管新生的影响 被引量:1
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作者 朱小丽 孙小凤 赖铭莹 《国际眼科杂志》 CAS 2016年第7期1237-1241,共5页
目的:观察虫草素对高糖培养的恒河猴脉络膜-视网膜血管内皮细胞(RF/6A)血管新生作用的影响,探讨其可能的作用机制。方法:培养RF/6A细胞,分为正常对照组(NC组)、高糖对照组(HG组)、高糖加不同浓度的虫草素组(HG+10μg/m L组、HG+50μg/m ... 目的:观察虫草素对高糖培养的恒河猴脉络膜-视网膜血管内皮细胞(RF/6A)血管新生作用的影响,探讨其可能的作用机制。方法:培养RF/6A细胞,分为正常对照组(NC组)、高糖对照组(HG组)、高糖加不同浓度的虫草素组(HG+10μg/m L组、HG+50μg/m L组、HG+100μg/m L组)。采用CCK8法检测各组细胞的增殖活性;采用Transwell实验检测各组细胞的迁移;采用Matrigel检测各组管腔形成的情况;采用Western-blot检测各组细胞中VEGF和VEGFR2蛋白表达的情况。结果:与NC组相比,HG组RF/6A的增殖活性增加(P<0.05)。不同浓度的虫草素对RF/6A的增殖均有抑制作用,随着虫草素浓度增加,细胞活性下降。HG+10μg/m L组、HG+50μg/m L组、HG+100μg/m L组的增殖活性抑制率分别为(10.2±0.9)%、(23.4±1.5)%、(31.1±1.2)%,与HG组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。NC组、HG组、HG+10μg/m L组、HG+50μg/m L组、HG+100μg/m L组细胞迁移个数分别为55.6±2.70、87.4±2.40、65.4±2.7、57.8±2.38、62.4±2.77个。与NC组相比,HG组迁移细胞数量增加(P<0.05);不同浓度虫草素组细胞迁移数量随着虫草素浓度的增加而减少,与HG组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。NC组、HG组、HG+10μg/m L组、HG+50μg/m L组、HG+100μg/m L组的细胞管腔形成个数分别为18.7±2.08、25.7±1.52、19.9±1.57、16.3±2.51、5.7±1.72个。与NC组相比,HG组细胞管腔形成个数增加(P<0.05);不同浓度虫草素组细胞管腔形成个数随着虫草素浓度的增加而减少,与HG组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。与NC组相比,HG组VEGF和VEGFR2蛋白表达的量增加(P<0.05);不同浓度虫草素组中细胞内VEGF和VEGFR2蛋白表达的量均低于高糖对照组(P<0.05)。结论:虫草素可能通过抑制高糖下VEGF和VEGFR2蛋白的表达,抑制RF/6A细胞增殖、迁移和管腔形成,进而抑制血管新生。 展开更多
关键词 虫草素 高糖培养 恒河猴脉络膜-视网膜血管内皮细胞 血管内皮生长因子 血管新生
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补肾安胎冲剂对人胎盘微血管内皮细胞VEGF/PI3K/Akt信号通路表达的影响
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作者 李元琪 李伟莉 +3 位作者 储继军 余欣慧 吴俊 陆莎莎 《环球中医药》 CAS 2024年第12期2441-2448,共8页
目的基于VEGFR-2沉默探讨补肾安胎冲剂(后文简称BSAT)对人胎盘微血管内皮细胞(human placental microvascular endothelial cells,HPMVECs)的影响,通过血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)/磷脂酰肌醇3激酶(phos... 目的基于VEGFR-2沉默探讨补肾安胎冲剂(后文简称BSAT)对人胎盘微血管内皮细胞(human placental microvascular endothelial cells,HPMVECs)的影响,通过血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)/磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(protein kinase B,Akt)通路探索其治疗复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)的作用机制。方法在体外构建人胎盘微血管内皮细胞,随后采用转染小干扰RNA(siRNA)技术沉默VEGFR-2基因表达,并给予补肾安胎冲剂含药血清或空白血清干预,将人胎盘微血管内皮细胞分为空白血清组(PBS+空白血清)、siRNA空白血清组(PBS+VEGFR-2 siRNA+空白血清)、siRNA NC空白血清组(PBS+NC siRNA+空白血清)、siRNA药物血清组(PBS+VEGFR-2 siRNA+BSAT含药血清)、药物血清组(PBS+BSAT含药血清)予对应处理,实时荧光定量PCR、免疫荧光法及Western blot分别检测VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt mRNA及蛋白表达,观察在VEGFR-2基因沉默时,补肾安胎冲剂是否能通过PI3K/Akt通路介导血管新生。结果空白血清组和siRNA NC空白血清组相比,VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt mRNA及蛋白无明显差异(P>0.05);药物血清组细胞VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt mRNA及蛋白的表达明显高于空白血清组(P<0.05)。与空白血清组相比,siRNA空白血清组VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt mRNA及蛋白的表达明显下降(P<0.01)。siRNA药物血清组与siRNA空白血清组相比,VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt有明显上升(P<0.01),补肾安胎冲剂能显著提高VEGF/PI3K/Akt的低表达。结论补肾安胎冲剂通过激活HPMVECs中VEGFR-2,靶向上调PI3K/Akt表达,介导血管新生,促进母胎界面血管重构,从而对RSA发挥治疗作用。 展开更多
关键词 补肾安胎冲剂 复发性流产 胎盘微血管内皮细胞 磷脂酰肌醇3激酶/丝苏氨酸蛋白激酶信号通路 血管内皮生长因子
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丹参通络解毒汤含药血清调控miR-126表达对缺氧/复氧大鼠心肌微血管内皮细胞自噬的影响 被引量:1
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作者 颜梦凡 刘泳钊 +1 位作者 李彩云 李鑫辉 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第11期136-141,共6页
目的探究丹参通络解毒汤含药血清调控miR-126对缺氧/复氧大鼠心肌微血管内皮细胞(CMECs)自噬的影响。方法体外培养CMECs构建缺氧/复氧损伤细胞模型,通过慢病毒转染miR-126抑制基因,将细胞分为空白组、模型组、药物组、沉默组、空载组、... 目的探究丹参通络解毒汤含药血清调控miR-126对缺氧/复氧大鼠心肌微血管内皮细胞(CMECs)自噬的影响。方法体外培养CMECs构建缺氧/复氧损伤细胞模型,通过慢病毒转染miR-126抑制基因,将细胞分为空白组、模型组、药物组、沉默组、空载组、沉默+药物组,试剂盒检测CMECs上清液乳酸脱氢酶(LDH)含量,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测细胞miR-126 mRNA表达,Western blot检测自噬相关蛋白Atg5、Beclin1、p62表达。结果与空白组比较,模型组细胞上清液LDH含量显著升高,细胞凋亡率显著升高,miR-126 mRNA表达显著降低,Atg5、Beclin1蛋白表达显著升高,p62蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,药物组、沉默+药物组细胞上清液LDH含量显著降低,细胞凋亡率显著降低,miR-126 mRNA表达显著升高,Atg5、Beclin1蛋白表达显著降低,药物组p62蛋白表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);沉默组细胞上清液LDH含量、细胞凋亡率及Atg5、Beclin1蛋白表达显著升高,miR-126 mRNA表达显著降低(P<0.01)。与药物组比较,沉默组、沉默+药物组细胞上清液LDH含量和细胞凋亡率显著升高(P<0.05,P<0.01),miR-126 mRNA表达显著降低(P<0.01),沉默组Atg5、Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.01),p62蛋白表达显著降低(P<0.01)。与沉默组比较,空载组、沉默+药物组细胞上清液LDH含量、细胞凋亡率及Atg5、Beclin1蛋白表达显著降低(P<0.01),miR-126 mRNA和p62蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论丹参通络解毒汤含药血清能抑制缺氧/复氧损伤引起的CMECs自噬,抑制细胞凋亡,进而保护CMECs,其机制可能与促进miR-126表达有关。 展开更多
关键词 丹参通络解毒汤 MIR-126 缺氧/复氧 自噬 心肌缺血再灌注损伤 心肌微血管内皮细胞
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Chemerin对恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞血管形成的影响及其机制研究
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作者 朱红军 赵萌 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2021年第10期939-942,共4页
目的探究Chemerin对恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞RF/6A血管形成的影响及其可能作用机制。方法RF/6A细胞随机分为3组,其中CO组正常培养RF/6A细胞24 h;CH组RF/6A细胞与10μg·L^(-1) Chemerin混合培养24 h;CN组在CH组基础上+200μmol&... 目的探究Chemerin对恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞RF/6A血管形成的影响及其可能作用机制。方法RF/6A细胞随机分为3组,其中CO组正常培养RF/6A细胞24 h;CH组RF/6A细胞与10μg·L^(-1) Chemerin混合培养24 h;CN组在CH组基础上+200μmol·L^(-1)N-乙酰半胱氨酸混合培养24 h。通过荧光探针-二氢乙啶(DHE)法、MTT法、细胞划痕实验、基质胶(Matrigel)法、Western blot等检测CO组、CH组、CN组RF/6A细胞活性氧(ROS)表达水平、增殖情况、迁移能力、管腔形成、p38MAPK蛋白表达的差异。结果CH组RF/6A细胞中ROS表达水平、细胞增殖数量均显著高于CO组、CH组(均为P<0.05)。CO组、CH组、CN组RF/6A细胞迁移面积(像素)分别为31268±1397、56489±2653、39684±1864,细胞管腔形成数量分别为(1.06±1.12)个、(6.04±2.24)个、(3.08±3.67)个,3组间细胞迁移面积、管腔形成数量比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示,CH组RF/6A细胞中p38MAPK蛋白相对表达量显著高于CO组、CN组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论Chemerin对RF/6A细胞血管形成有促进作用,其机制与ROS介导的MAPK通路激活有关。 展开更多
关键词 CHEMERIN 活性氧 恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞 血管形成
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胼酞嗪对眼血流和激光诱导的脉络膜新生血管及体外培养的内皮细胞的影响(英文) 被引量:1
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作者 江伟 邱春亿 《国际眼科杂志》 CAS 2008年第12期2359-2363,共5页
目的:研究胼酞嗪对兔脉络膜血流和激光诱导的鼠脉络膜新生血管及人脐静脉内皮细胞管状结构形成的影响。方法:雌性新西兰白兔左眼眼内压升高至40mmHg后,滴入10g/L胼酞嗪滴眼液,采用彩色微球技术测量眼血流变化。用Nd:YAG激光诱导雄性Brow... 目的:研究胼酞嗪对兔脉络膜血流和激光诱导的鼠脉络膜新生血管及人脐静脉内皮细胞管状结构形成的影响。方法:雌性新西兰白兔左眼眼内压升高至40mmHg后,滴入10g/L胼酞嗪滴眼液,采用彩色微球技术测量眼血流变化。用Nd:YAG激光诱导雄性Brown Norway大鼠至Bruch膜破裂,而后分别予生理盐水或5,10和20g/L胼酞嗪滴眼液点眼,3次/d,连续4wk。采用眼底荧光血管造影和脉络膜平片测量新生血管的面积。此外亦用不同浓度的胼酞嗪作用于培养之人脐静脉内皮细胞并探讨对其管状结构形成的影响。结果:10g/L胼酞嗪滴眼液滴入眼内压为40mmHg的兔眼30,60min后,脉络膜血流明显增加。眼底荧光血管造影和脉络膜平片测量均显示,经过4wk药物治疗,5,10,20g/L胼酞嗪滴眼液均明显抑制了鼠眼CNV的形成。3~30mg/L胼酞嗪对在基质凝胶中培养了48h的人脐静脉内皮细胞的管状结构的形成有抑制作用。结论:胼酞嗪可以抑制体内脉络膜新生血管及体外培养的人脐静脉内皮细胞管状结构的形成,并增强缺血后的兔脉络膜血流。胼酞嗪有望成为治疗年龄相关性黄斑变性的药物。 展开更多
关键词 胼酞嗪 脉络膜 新生血管 人脐静脉内皮细胞 年龄相关性黄斑变性
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ZA-76对大鼠脉络膜新生血管形成、兔眼血流及血管内皮细胞的影响
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作者 徐新荣 张奕华 +1 位作者 吉洁 彭司勋 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第9期815-819,共5页
目的观察ZA-76对激光诱发大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)形成、高眼压兔眼血流及人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖的影响。方法氪激光诱发雄性棕色挪威大鼠CNV。30只(60眼)... 目的观察ZA-76对激光诱发大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)形成、高眼压兔眼血流及人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖的影响。方法氪激光诱发雄性棕色挪威大鼠CNV。30只(60眼)模型大鼠随机分为治疗组和对照组,每组15只(30眼)。治疗组在光凝后第2天开始腹腔注射20g·L-1ZA-76(20mg·kg-1),对照组给予等体积的溶媒二甲基亚砜,每天1次,时间均为4周。光凝后2周、4周分别行眼底照相和眼底荧光血管造影,评估CNV的形成率。光凝后4周处死大鼠,取材作病理切片,用于HE染色及免疫组织化学检测VEGF、COX-2的表达;用彩色微球技术检测20g·L-1ZA-76(50μL)对高眼压兔眼血流的影响;MTT法检测不同浓度ZA-76(100mg·L-1、200mg·L-1、400mg·L-1)对HUVEC细胞增殖的影响。结果治疗组光凝后2周、4周CNV形成率分别为80.83%、79.58%,明显低于对照组的94.58%、95.00%(均为P<0.01);治疗组VEGF、COX-2阳性染色密度分别为(51.13±6.15)mm-2、(37.22±5·18)mm-2,低于对照组[分别为(71.55±9.89)mm-2、(58.78±7.02)mm-2(均为P<0.01)];治疗组脉络膜血流在30min、60min、120min均明显高于对照组;不同浓度ZA-76干预48h,各浓度组ZA-76对HUVEC细胞增殖抑制作用均强于对照组,以400mg·L-1ZA-76作用更显著。结论 ZA-76能抑制激光诱导大鼠CNV形成,抑制VEGF、COX-2的表达;抑制血管内皮细胞增生;改善脉络膜血流。 展开更多
关键词 ZA-76 脉络膜新生血管 眼血流 人脐静脉内皮细胞
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人参皂甙Rb1和黄芪多糖对微血管内皮细胞分泌NO、IL-6和TNF-α的影响 被引量:23
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作者 解慧梅 胡格 +6 位作者 索占伟 刘易通 尹龙 于同泉 路平 穆祥 黄会岭 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期903-907,共5页
取中药提取物人参皂甙Rb1和黄芪多糖作用于体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞,用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)、ELISA法测定白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化,为分析其免疫作用机制提供试验依据。微血管内皮细胞在... 取中药提取物人参皂甙Rb1和黄芪多糖作用于体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞,用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)、ELISA法测定白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化,为分析其免疫作用机制提供试验依据。微血管内皮细胞在人参皂甙Rb1和黄芪多糖的作用下,细胞分泌NOI、L-6和TNF-α均增多,并且随着浓度的增加内皮细胞分泌量也增加。 展开更多
关键词 黄芪多糖 人参皂甙RB1 微血管内皮细胞 NO IL-6 TNF—α
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微血管内皮细胞功能的研究进展 被引量:13
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作者 王新 韦旭斌 +2 位作者 索占伟 穆祥 谭建华 《动物医学进展》 CSCD 2005年第12期44-48,共5页
文章回顾了微血管内皮细胞功能的研究概况。微血管内皮细胞是位于循环血液与组织液之间的单层扁平上皮细胞,不但构成了微血管通透性的主要物理屏障,保证微血管内、外正常的物质交换,而且是一种多功能的分泌细胞,通过合成并释放多种舒张... 文章回顾了微血管内皮细胞功能的研究概况。微血管内皮细胞是位于循环血液与组织液之间的单层扁平上皮细胞,不但构成了微血管通透性的主要物理屏障,保证微血管内、外正常的物质交换,而且是一种多功能的分泌细胞,通过合成并释放多种舒张因子和收缩因子以维持正常的血管紧张度;通过合成、释放多种促凝血因子和抗凝血因子,维持血液的正常状态和动态平衡。还通过其屏障和分泌功能,影响着炎症反应的发生、发展,并通过多种途径参与调节机体的免疫应答。微血管内皮细胞结构的完整性被破坏,分泌功能失调,势必导致相应组织器官的功能障碍而引发多种病理过程,从而会引发内皮细胞机能障碍和休克、感染、肿瘤、创伤、水肿、急性炎症等多种疾病。 展开更多
关键词 微血管 内皮细胞 功能
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LPS对大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌NO的影响 被引量:10
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作者 段慧琴 乔健 +3 位作者 张永东 索占伟 穆祥 许剑琴 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期974-976,共3页
The effect of lipopolysaccharide(LPS)on the production of NO in primary cultures of rat intestinal mucosa microvascular endothelial cells(RIMEC)was investigated . RIMEC weve in culture exposed to the inflammatory cyto... The effect of lipopolysaccharide(LPS)on the production of NO in primary cultures of rat intestinal mucosa microvascular endothelial cells(RIMEC)was investigated . RIMEC weve in culture exposed to the inflammatory cytokine LPS. Stable NO production, which accumulated in the culture medium without LPS in a linear way for 24 h . LPS induced NO production in RIMEC in a time-dependent manner. These data indicate that LPS triggered endothelial cells activation, the production of NO was enhanced. 展开更多
关键词 一氧化氮 微血管内皮细胞 脂多糖
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黄芪多糖对体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞增殖的影响 被引量:14
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作者 张磊 胡格 +4 位作者 索占伟 段慧琴 伊鹏霏 胡屹屹 穆祥 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第3期80-83,共4页
研究黄芪多糖对体外培养的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(rat intestinal mucosa microvascular endothelial cells,RIM-MVECs)增殖的影响。应用不同浓度的黄芪多糖作用于体外培养的RIMMVECs。通过MTT法检测黄芪多糖对RIM-MVECs增殖的影响... 研究黄芪多糖对体外培养的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(rat intestinal mucosa microvascular endothelial cells,RIM-MVECs)增殖的影响。应用不同浓度的黄芪多糖作用于体外培养的RIMMVECs。通过MTT法检测黄芪多糖对RIM-MVECs增殖的影响。不同浓度的黄芪多糖对细胞增殖的影响不同:黄芪多糖浓度在25~800mg/L时可明显促进细胞的增殖(P<0.05或0.01);浓度为1.6×103mg/L时对细胞的增殖无影响;浓度在3.2×103~25.6×103mg/L时对细胞生长具有抑制作用(P<0.05或0.01)。黄芪多糖有促进体外培养RIMMVECs的增殖作用,此作用对保护内皮损伤、加速内皮修复有重要作用。 展开更多
关键词 黄芪多糖 微血管内皮细胞 增殖作用
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小檗碱、绿原酸和黄芩苷对LPS损伤大鼠肠黏膜微血管内皮细胞表达ICAM-1的影响 被引量:8
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作者 张涛 黄会岭 +3 位作者 胡格 段慧琴 滕可导 穆祥 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期499-502,共4页
为研究中药有效成分小檗碱、绿原酸和黄芩苷的抗炎机制,通过体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(Rat intestinal mucosa microvascular endothelial cells,RIMMVECs)建立LPS损伤模型,采用免疫细胞化学方法观察了3种中药成分对LPS损伤RIMM... 为研究中药有效成分小檗碱、绿原酸和黄芩苷的抗炎机制,通过体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(Rat intestinal mucosa microvascular endothelial cells,RIMMVECs)建立LPS损伤模型,采用免疫细胞化学方法观察了3种中药成分对LPS损伤RIMMVECs表达ICAM-1的影响,并对染色结果进行了图像灰度分析与统计学检验。研究发现,RIMVECs正常状态下低水平表达ICAM-1,用LPS刺激后ICAM-1的表达明显升高,而中药有效成分小檗碱、绿原酸和黄芩苷能够抑制LPS诱导的RIMVECs强阳性表达ICAM-1。结果表明,小檗碱、绿原酸和黄芩苷的抗炎作用与其下调ICAM-1的表达密切相关,为阐明其抗炎机制提供了数据。 展开更多
关键词 小檗碱 绿原酸 黄芩苷 细菌脂多糖 微血管内皮细胞
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