6’-O-咖啡酰熊果苷脂质体的制备工艺优化及其活性研究

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作者 刘梦哲 韩康佳 +6 位作者 王文博 杨洋 解思达 赵平 徐俊明 何远平 杨晓琴 《食品工业科技》 北大核心 2025年第13期207-217,共11页

目的:利用Box-Behnken响应面法优化6’-O-咖啡酰熊果苷脂质体的制备工艺,并对其进行结构表征和活性评价。方法:采用乙醇注入法,首先以单因素实验考察大豆卵磷脂与胆固醇质量比、磷酸盐缓冲溶液(PBS)p H、6’-O-咖啡酰熊果苷用量、搅拌... 目的:利用Box-Behnken响应面法优化6’-O-咖啡酰熊果苷脂质体的制备工艺,并对其进行结构表征和活性评价。方法:采用乙醇注入法,首先以单因素实验考察大豆卵磷脂与胆固醇质量比、磷酸盐缓冲溶液(PBS)p H、6’-O-咖啡酰熊果苷用量、搅拌温度和搅拌时间对6’-O-咖啡酰熊果苷脂质体包封率的影响,在单因素实验基础上采用Box-Behnken响应面法优化制备工艺,并对其微观形态、粒径、体外抗氧化活性和体外酪氨酸酶抑制活性进行研究。结果:大豆卵磷脂与胆固醇质量比7.10(g/g),PBS的p H6.90,6’-O-咖啡酰熊果苷用量820μL,在45℃下搅拌30 min,脂质体最大包封率可达80.93%±0.82%,所得脂质体具有囊泡结构,微粒形态完整接近球形,粒径主要集中在78~200 nm,平均粒径为127.42±0.76 nm,多分散性指数为0.259±0.006,电位主要分布在-80~-40 m V范围内。6’-O-咖啡酰熊果苷及其脂质体清除DPPH自由基的IC_(50)值为0.27±0.04和0.26±0.03 mg/m L,清除ABTS+自由基的IC_(50)值为0.13±0.02和0.17±0.03 mg/m L,清除OH自由基的IC_(50)值为0.10±0.03和0.17±0.02 mg/m L,对铁离子总还原能力强度6’-O-咖啡酰熊果苷显著高于其脂质体;6’-O-咖啡酰熊果苷及其脂质体的体外酪氨酸酶单酚酶的最大抑制率分别为48.81%±0.51%和42.56%±1.25%,抑制二酚酶的IC_(50)值分别为0.14±0.02和0.16±0.03 mg/m L。结论:在本实验工艺条件下制备的脂质体6’-O-咖啡酰熊果苷包封率高、粒径小,表现出良好的体外抗氧化活性及酪氨酸酶抑制作用,为6’-O-咖啡酰熊果苷的深度开发利用提供参考依据。 展开更多

关键词 6’-O-咖啡酰熊果苷 脂质体 包封率 抗氧化 酪氨酸酶抑制

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脂质体包裹猪白细胞介素6基因对猪带绦虫抗原基因免疫小鼠的影响 被引量：8

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作者 龙章富 高荣 +4 位作者 孟民杰 武梅 郑勇 刘昆 刘世贵 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第3期25-29,共5页

比较研究了BALb/c小鼠分别肌肉注射猪带绦虫抗原基因VTS76、猪白细胞介素 6(VPIL 6)联合VTS76及其阳离子脂质体包裹质粒等 5个处理的免疫效应。结果表明 ,VTS76联合VPIL 6共注射小鼠的IgG含量和抗体滴度 ,脾细胞增殖反应和IL 2诱生活性... 比较研究了BALb/c小鼠分别肌肉注射猪带绦虫抗原基因VTS76、猪白细胞介素 6(VPIL 6)联合VTS76及其阳离子脂质体包裹质粒等 5个处理的免疫效应。结果表明 ,VTS76联合VPIL 6共注射小鼠的IgG含量和抗体滴度 ,脾细胞增殖反应和IL 2诱生活性以及免疫细胞数量 ,均比注射VTS76的显著增强。经阳离子脂质体包裹的VTS76+VPIL 6在减少质粒用量 80 %时 ,免疫应答水平仍显著高于脂质体包裹VTS76,且明显高于VTS76+VPIL 6,证明VPIL 6能显著增强基因疫苗 (VTS76)免疫小鼠的免疫应答。 展开更多

关键词 小鼠 猪 白细胞介素-6基因 阳离子脂质体 猪带绦虫抗原基因 免疫应答 免疫增强剂 疫苗

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IL-1β,IL-6反义寡核苷酸脂质体抑制兔后发性白内障 被引量：3

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作者 邓小艳 蔡小军 柯治生 《眼科新进展》 CAS 2006年第5期348-350,共3页

目的探讨IL-1β、IL-6反义寡核苷酸脂质体抑制后发性白内障的可行性和有效性。方法将20只健康新西兰大白兔双眼行透明晶状体囊外摘出术,均设左眼为实验眼,术后前房立即注射IL-1β、IL-6反义寡核苷酸脂质体,右眼为对照眼,术后前房注射单... 目的探讨IL-1β、IL-6反义寡核苷酸脂质体抑制后发性白内障的可行性和有效性。方法将20只健康新西兰大白兔双眼行透明晶状体囊外摘出术,均设左眼为实验眼,术后前房立即注射IL-1β、IL-6反义寡核苷酸脂质体,右眼为对照眼,术后前房注射单纯脂质体。分别于术前1d、术后1d、3d、1周、2周、1月、2月和3月抽取房水,用ELISA双抗体免疫夹心法检测IL-1β、IL-6的含量,定期裂隙灯检眼镜观察后囊混浊情况,术后3月行组织病理学检查。结果(1)术后3月实验眼与对照眼发生晶状体后囊膜混浊的眼数分别为16眼及20眼,差异有极显著意义(P=0.002<0.01);(2)实验眼和对照眼房水中IL-1β的浓度均值分别为(8.570±1.686)×10-9g·L-1、(11.900±3.873)×10-9g·L-1,有显著性差异(P=0.002<0.01),IL-6的浓度均值分别为(12.530±4.068)×10-9g·L-1、(16·600±6·636)×10-9g·L-1,亦有显著性差异(P=0.033<0.05);(3)光镜和电镜下实验眼晶状体后囊膜细胞增生不活跃,未发现眼内毒性反应。结论前房注射IL-1β、IL-6反义寡核苷酸脂质体对后发性白内障可能有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 IL-1Β IL-6 反义寡核苷酸类 脂质体 后发性白内障

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白细胞介素-6反义寡核苷酸脂质体预防后发性白内障的初步研究 被引量：2

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作者 邓小艳 蔡小军 柯治生 《医学研究生学报》 CAS 2005年第12期1083-1086,i0018,共5页

目的:探讨白细胞介素-6(IL-6)反义寡核苷酸脂质体预防后发性白内障的可行性和有效性。方法:30只健康新西兰大白兔随机分为三组,每组10只,所有白兔左眼均行透明晶状体囊外摘除术。反义组术眼前房注射IL-6反义寡核苷酸脂质体;单纯组术眼... 目的:探讨白细胞介素-6(IL-6)反义寡核苷酸脂质体预防后发性白内障的可行性和有效性。方法:30只健康新西兰大白兔随机分为三组,每组10只,所有白兔左眼均行透明晶状体囊外摘除术。反义组术眼前房注射IL-6反义寡核苷酸脂质体;单纯组术眼前房注射单纯脂质体;对照组不注射任何药物。分别于术前1天,术后1、3、7、14和30天抽取房水,用ELISA双抗体免疫夹心法检测房水中IL-6的含量,定期裂隙灯显微镜及检眼镜观察眼前节及眼底变化情况,术后3个月行数码裂隙灯后囊照相和组织病理学检查。结果:①术后3个月反义组、单纯组及对照组分别有7、10及10只眼发生晶状体后囊膜混浊,差异有显著性意义(P=0.037)。②术后反义组的IL-6平均浓度低于单纯组及对照组,其差异有显著性意义(P<0.05),单纯组与对照组间无显著性差异。③临床观察和组织病理学检查未发现眼内毒性反应。结论:IL-6反义寡核苷酸脂质体对后发性白内障可能有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 白细胞介素-6 寡核苷酸类 反义 脂质体 白内障 后发性

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卡氮芥脂质体对鼠C_(6)胶质细胞瘤内化疗的研究 被引量：1

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作者 刘占川 闫世军 +1 位作者 刘莉 李同光 《白求恩医科大学学报》 CSCD 2000年第2期152-153,共2页

目的 :研究卡氮芥脂质体 ( BL)对鼠 C6胶质细胞瘤的化疗作用。方法 :30只 Wistar大鼠做实验动物 ,C6胶质细胞脑内移植建立鼠 C6胶质细胞瘤模型、卡氮芥脂质体肿瘤内注射 ,观察化疗作用。结果 :BL组与氯乙亚硝脲 ( BCNU)组存活期存在统... 目的 :研究卡氮芥脂质体 ( BL)对鼠 C6胶质细胞瘤的化疗作用。方法 :30只 Wistar大鼠做实验动物 ,C6胶质细胞脑内移植建立鼠 C6胶质细胞瘤模型、卡氮芥脂质体肿瘤内注射 ,观察化疗作用。结果 :BL组与氯乙亚硝脲 ( BCNU)组存活期存在统计学差异 ( P<0 .0 5)。 BL组与空白对照组存在显著性差异 ( P<0 .0 1 ) ,BCNU组与空白组存在显著性差异 ( P<0 .0 1 )。结论 :BL脑肿瘤内注射 ,控制 BCNU的释放 ,提高 BCNU的药效 ,有效延长荷瘤鼠的存活期。 展开更多

关键词 卡氮芥 脂质体 C6胶质细胞瘤内化疗

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脂质体介导B7基因在C6胶质瘤细胞中表达的实验研究

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作者 李永宁 幸兵 +3 位作者 任祖渊 苏长保 王任直 马文斌 《中国实验动物学杂志》 2001年第1期35-38,共4页

目的　通过脂质体介导基因转移方法 ,将含B7基因的重组逆转录病毒表达质粒导入C6细胞中 ,使之能有效的表达B7分子 ,探索胶质瘤免疫基因治疗的新方法。方法　用脂质体将pLXSN -B7重组表达质粒导入Wistar大鼠胶质瘤细胞系C6中 ,经G418筛... 目的　通过脂质体介导基因转移方法 ,将含B7基因的重组逆转录病毒表达质粒导入C6细胞中 ,使之能有效的表达B7分子 ,探索胶质瘤免疫基因治疗的新方法。方法　用脂质体将pLXSN -B7重组表达质粒导入Wistar大鼠胶质瘤细胞系C6中 ,经G418筛选出阳性克隆。通过PCR、狭缝杂交及B7单克隆抗体免疫荧光方法检测B7基因在C6细胞中的整合、转录及表达情况。结果　PCR可从B7基因转导的C6细胞 (C6pLXSN -B7)基因组中扩增出 0 8Kb的B7基因片断 ;以B7为探针狭缝杂交显示C6pLXSN -B7细胞中有B7基因的转录 ;以抗 -B7单克隆抗体进行的免疫荧光检测显示C6pLXSN -B7细胞表面有B7分子的表达 ,而对照组肿瘤细胞 (C6pLXSN、C6 )则无B7分子的表达。结论　脂质体介导B7基因转移方法可将B7基因完整整合到C6细胞基因组中并使之能稳定、有效的表达。 展开更多

关键词 B7基因 表达 C6细胞 脂质体介导 B7分子 C6胶质瘤细胞 单克隆抗体 转录 阳性克隆 基因组

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用NF-IL-6表达质粒脂质体复合物对裸鼠荷人结肠癌的系统性基因治疗实验初报

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作者 孙丽 傅蓓蓓 刘定干 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第4期291-291,共1页

人白介素6核转录因子(NF-IL-6,又称C/EBPβ)是一个重要的免疫调控因子;它和肿瘤有着密切的关系.

关键词 NF—IL—6 表达 质粒脂质体复合物 结肠癌 系统性基因治疗 实验

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脂质体介导的体内外细胞因子基因转移效果的初步研究 被引量：1

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作者 王全兴 曹雪涛 +2 位作者 章卫平 王建莉 叶天星 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第3期213-217,共5页

本研究用反相蒸发技术制备出包裹IL-2 DNA或IL-6 DNA的脂质体,将其与体外培养的靶细胞共育,或将其直接注射至小鼠腹腔内及荷瘤小鼠的瘤体内,研究其介导体内外基因转移的效果,结果表明我们研制的脂质体不但能将目的基因转移至体外培养的... 本研究用反相蒸发技术制备出包裹IL-2 DNA或IL-6 DNA的脂质体,将其与体外培养的靶细胞共育,或将其直接注射至小鼠腹腔内及荷瘤小鼠的瘤体内,研究其介导体内外基因转移的效果,结果表明我们研制的脂质体不但能将目的基因转移至体外培养的靶细胞中,并可通过腹腔内注射及瘤体内注射后,在腹腔内及肿瘤原位直接将IL-2和IL-6基因转移至腹腔细胞及肿瘤细胞中,稳定表达IL-2和IL-6。 展开更多

关键词 体内 IL-2 基因转移 脂质体介导 腹腔内 IL-6 靶细胞 目的基因 DNA 共育

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转染HPV16E6基因人树突状细胞疫苗的制备及生物学特性 被引量：2

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作者 任会均 张锦堃 +2 位作者 陈东晓 李军 魏锡云 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1032-1035,1040,共5页

目的制备来源于人外周血并转染HPV16E6基因的树突状细胞(DC)疫苗,检测其细胞形态、分子表型及诱导的免疫效应。方法细胞因子扩增人外周血DC,Lipofectamine转染HPV16E6制备DC疫苗。动态形态学观察,免疫细胞化学及流式细胞术检测分子表达... 目的制备来源于人外周血并转染HPV16E6基因的树突状细胞(DC)疫苗,检测其细胞形态、分子表型及诱导的免疫效应。方法细胞因子扩增人外周血DC,Lipofectamine转染HPV16E6制备DC疫苗。动态形态学观察,免疫细胞化学及流式细胞术检测分子表达,体外诱导并测定CTL活性。结果转染DC呈形态迥异的多突起状,其E6蛋白、CD80、CD86和CD83分子的表达率依次为47.3%、82.5%、79.8%和85.7%,诱导杀伤Caski细胞的活性明显高于对照组(P<0.01)。结论转染DC疫苗保持了功能成熟DC的形态特征,且内源性表达E6蛋白,能诱导高效的特异性抗肿瘤免疫应答。 展开更多

关键词 树突状细胞 E6基因 基因转染 脂质体 CASKI细胞

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反义IL-6寡核苷酸对实验性系膜增生性肾炎IL-6,IL-6mRNA表达的影响 被引量：2

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作者 黄胜 孙林 叶任高 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期35-38,45,共5页

[目的]观察反义IL-6寡核苷酸经左肾动脉注入系膜增殖性肾小球肾炎SD大鼠后对肾小球系膜区IL-6 mRNA及蛋白水平的影响。[方法]30只SD大鼠接受葡萄球菌内毒素静脉注射、牛血清白蛋白隔日口服、完全弗氏佐剂及不完全弗氏佐剂皮下注射,并加... [目的]观察反义IL-6寡核苷酸经左肾动脉注入系膜增殖性肾小球肾炎SD大鼠后对肾小球系膜区IL-6 mRNA及蛋白水平的影响。[方法]30只SD大鼠接受葡萄球菌内毒素静脉注射、牛血清白蛋白隔日口服、完全弗氏佐剂及不完全弗氏佐剂皮下注射,并加做肝左叶切除术,制作系膜增生性肾小球肾炎动物模型。经FAM标记的反义寡核苷酸肾小球定位后,将IL-6反义、正义、及错义寡核苷酸由左肾动脉注入肾脏,并用右肾作对照,分别作常规组织病理,免疫组织化学及原位杂交检测。[结果]FAM标记的IL-6反义寡核苷酸经左肾动脉注入后1h,系膜区可检测到少量表达,6 h后肾系膜区表达明显增加。反义寡核苷酸治疗组的SD大鼠IL-6。IL-6 mRNA表达被显著抑制(P<0.01),但IL-6正义及错义寡核苷酸对IL-6、IL-6 mRNA表达无明显影响(P>0.05)。3组蛋白尿及病理改变均无显著差异(P>0.05)。[结论]脂质体介导的反义寡核苷酸(IL-6)能在肾小球表达。IL-6反义寡核苷酸治疗显著抑制系膜增生性肾炎SD大鼠IL-6、IL-6 mRNA表达,但IL-6正义、及错义寡核苷酸无此作用。 展开更多

关键词 反义IL-6寡核苷酸 系膜增生性肾炎 白细胞介素6 脂质体 动物模型

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棉铃虫细胞色素P450 CYP6B6基因启动子活性检测条件的优化

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作者 李芬 刘小宁 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期167-172,共6页

旨在用阳离子脂质体介导携带有pGL3-Basic报告基因的棉铃虫细胞色素P450 CYP6B6启动子pGL-CYP6B6-promoter重组质粒转染Sf9细胞,对启动子活性的检测条件进行优化。将长度为999 bp的棉铃虫CYP6B6基因启动子亚克隆至荧光素酶报告载体pGL3-... 旨在用阳离子脂质体介导携带有pGL3-Basic报告基因的棉铃虫细胞色素P450 CYP6B6启动子pGL-CYP6B6-promoter重组质粒转染Sf9细胞,对启动子活性的检测条件进行优化。将长度为999 bp的棉铃虫CYP6B6基因启动子亚克隆至荧光素酶报告载体pGL3-Basic上,提取无细胞内毒素的质粒,转染处于对数生长期的昆虫细胞Sf9,通过检测荧光素酶的表达量验证启动子的活性。对转染后的检测时间、加入转染质粒的量,转染质粒与内对照质粒pRL-TK的比例分别进行了优化,进而确定检测的最优条件。结果表明,转染后的最适检测时间为24 h,转染质粒的最适用量为3.2μg,报告质粒与内对照质粒用量的比例为10 1时转染效率最高。 展开更多

关键词 细胞色素P450 CYP6B6基因启动子 SF9细胞 脂质体 转染 活性检测

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小鼠NGF基因真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达 被引量：7

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作者 宋玫 陈绍宗 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期124-126,129,共4页

目的 :构建小鼠 β NGF基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH 3T3细胞系中NGF的表达情况。方法 :用基因重组技术 ,将小鼠 β NGF的成熟cDNA序列及其前导序列 ,克隆到真核表达载体 pcDNA3.1+中 ,用限制性内切酶酶切鉴定重组体。利用脂... 目的 :构建小鼠 β NGF基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH 3T3细胞系中NGF的表达情况。方法 :用基因重组技术 ,将小鼠 β NGF的成熟cDNA序列及其前导序列 ,克隆到真核表达载体 pcDNA3.1+中 ,用限制性内切酶酶切鉴定重组体。利用脂质体FuGENETM6方法 ,转染NIH 3T3细胞。转染后 72h ,用G4 18筛选阳性克隆并培养至 2 0d。对阳性克隆培养上清中NGF的表达用Westernblot分析并观察该上清中NGF对PC12细胞突起生长的作用。结果 :β NGF基因在NIH 3T3细胞中获得表达。阳性克隆培养上清能促进PC12细胞突起生长。结论 :重组真核表达载体 pcDNA3.1+/NGF构建成功 ,NGF蛋白在NIH 3T3细胞中表达 ,并具有良好的生物学活性 。 展开更多

关键词 Β-神经生长因子 真核表达载体 NIH3T3细胞系 基因转染 脂质体FuGENE^TM6

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