检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

基因导入的脂质体转染法和磷酸钙转染法之比较被引量：14: 1; 作者李华刘维全 +1 位作者王太一殷震《中国实验动物学杂志》 2000年第2期65-68,共4页; 将外源基因导入真核细胞的方法很多。我们通过对绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因在真核细胞中表达的研究 ,比较了较常用的两种方法—脂质体转染法和磷酸钙转染法。研究结果表明 :脂质体转染法的转染效率较磷酸钙转染法高 ,且简单易行 ,是外... 展开更多; 关键词磷酸钙转染法脂质体转染法真核细胞体外培养细胞转染效率研究结果表达绿色荧光蛋白(GFP) 报告基因外源基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

脂质体及电穿孔法对大鼠雪旺细胞转染效率的比较与分析被引量：3: 2; 作者菅辉玲黄瑾 +1 位作者程江高蕊《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期826-828,837,共4页; 目的对比脂质体与电穿孔法及不同载体对大鼠雪旺细胞的转染效率,为进一步研究神经胶质细胞奠定实验基础。方法以大鼠雪旺细胞为研究对象,采用脂质体法和电穿孔法分别转染绿色荧光蛋白(GFP)载体和羧基荧光素(FAM)标记的miRNA mimics,比... 展开更多; 关键词大鼠雪旺细胞电穿孔法脂质体转染法; 在线阅读下载PDF 职称材料

脂质体介导转染法原理及其研究进展被引量：2: 3; 作者周雪雁关伟军《中国家禽》北大核心 2005年第7期43-45,共3页; 关键词脂质体转染法技术原理组成制备作用机制改进方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

改良鱼精蛋白-脂质体-寡聚核苷酸复合体法转染卵巢癌SKOV3细胞被引量：1: 4; 作者陆建萍孙红 +1 位作者曹长春欧周罗《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第1期46-49,共4页; 目的:优化鱼精蛋白-脂质体-寡聚核苷酸(oligodeoxynuleotides,ODN)复合体(liposome—protamine—ODN,LPD)法以提高SKOV3细胞的转染效率,并探讨该转染法对细胞体外增殖能力的影响。方法:参照文献设计核转录因子-κB(NF-κB)诱捕物ODN和... 展开更多; 关键词鱼精蛋白-脂质体-寡聚核苷酸转染法卵巢肿瘤肿瘤细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

脂质体介导转染法原理及其研究近展被引量：4: 5; 作者周雪雁关伟军 +1 位作者马月辉刘桂林《上海畜牧兽医通讯》 2004年第4期5-6,共2页; 关键词脂质体介导转染法技术原理组成制备转基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

CTLA-4/Ig融合蛋白在COS-7中的表达、纯化及鉴定被引量：6: 6; 作者易绍萱吴军 +6 位作者王锡华李彦刘志刚姜庆罗高兴周立新肖光夏《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期523-526,共4页; 目的　探讨pCTLA 4/Ig融合蛋白表达载体在哺乳动物细胞中的表达及表达产物的鉴定、纯化 ,为其功能研究和临床应用奠定基础。方法　将pCTLA 4/Ig表达质粒转染COS 7细胞 ,双抗体夹心ELISA检测细胞培养上清中融合蛋白表达 ;ProteinA亲和层... 展开更多; 关键词 CTLA-4融合蛋白 COS-7细胞脂质体转染法; 在线阅读下载PDF 职称材料

人血管生成抑制因子canstatin基因的克隆及真核表达被引量：1: 7; 作者单志新林秋雄 +5 位作者余细勇刘媛符永恒谭虹虹郑猛林曙光《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B06期4-6,共3页; [目的]为研究canstatin对动脉粥样硬化斑块的稳定作用,克隆人canstatin基因,并在COS7细胞中表达出具有生物活性的canstatin。[方法]利用RT-PCR技术,从人脐静脉血管内皮细胞中扩增canstatin cDNA,并定向克隆入真核表达载体pSeeTag2C中... 展开更多; 关键词人脐静脉血管内皮细胞真核表达 COS7细胞人血血管生成抑制因子扩增增殖定向克隆 DNA 脂质体转染法; 在线阅读下载PDF 职称材料

人牙本质涎蛋白在COS-7细胞中的表达: 8; 作者张莹史俊南 +3 位作者汪平顾淑萍范继红费俭《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期415-417,共3页; 目的 :构建人牙本质涎蛋白 (humandentinsialoprotein ,hDSP)真核表达载体 ,用瞬时系统表达目的基因。方法 :将hDSP全长基因定向克隆入真核表达质粒载体pcDNA3 ,构建pcDNA3 hDSP重组质粒 ,脂质体转染法转染COS 7细胞 ,48～ 72h收集细... 展开更多; 关键词人牙本质涎蛋白 COS-7细胞表达脂质体转染法; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基因导入的脂质体转染法和磷酸钙转染法之比较被引量：14: 1; 作者李华刘维全王太一殷震; 机构中国医科大学实验动物部中国人民解放军军需大学基因工程实验室; 出处《中国实验动物学杂志》 2000年第2期65-68,共4页; 文摘将外源基因导入真核细胞的方法很多。我们通过对绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因在真核细胞中表达的研究 ,比较了较常用的两种方法—脂质体转染法和磷酸钙转染法。研究结果表明 :脂质体转染法的转染效率较磷酸钙转染法高 ,且简单易行 ,是外源基因导入体外培养细胞内较理想的方法。; 关键词磷酸钙转染法脂质体转染法真核细胞体外培养细胞转染效率研究结果表达绿色荧光蛋白(GFP) 报告基因外源基因; Keywords liposomes calcium phosphate transfection GFP gene; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学] Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脂质体及电穿孔法对大鼠雪旺细胞转染效率的比较与分析被引量：3: 2; 作者菅辉玲黄瑾程江高蕊; 机构石河子大学医学院生物化学教研室石河子大学第一附属医院检验科华中科技大学同济医学院; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期826-828,837,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30960173) 石河子大学“263”青年骨干教师资助计划项目(No.YX08018)~~; 文摘目的对比脂质体与电穿孔法及不同载体对大鼠雪旺细胞的转染效率,为进一步研究神经胶质细胞奠定实验基础。方法以大鼠雪旺细胞为研究对象,采用脂质体法和电穿孔法分别转染绿色荧光蛋白(GFP)载体和羧基荧光素(FAM)标记的miRNA mimics,比较和分析两者的转染效率。结果脂质体转染法成功转染GFP质粒大鼠雪旺细胞的效率为(15.6±2.3)%,转染miRNA mimics的效率为(36.8±3.5)%;采用电穿孔法转染GFP质粒的效率高达(40.6±3.3)%,而该法转染miRNA mimics的效率则非常低。结论大鼠雪旺细胞的转染效率可能与转染方式、被转染物的大小和形式有关。; 关键词大鼠雪旺细胞电穿孔法脂质体转染法; Keywords rat Schwann cell electroporation lipofection; 分类号 Q503 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脂质体介导转染法原理及其研究进展被引量：2: 3; 作者周雪雁关伟军; 机构山西农业大学中国农业科学院畜牧所; 出处《中国家禽》北大核心 2005年第7期43-45,共3页; 关键词脂质体转染法技术原理组成制备作用机制改进方法; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名改良鱼精蛋白-脂质体-寡聚核苷酸复合体法转染卵巢癌SKOV3细胞被引量：1: 4; 作者陆建萍孙红曹长春欧周罗; 机构复旦大学妇产科医院复旦大学中山医院复旦大学肿瘤医院; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第1期46-49,共4页; 基金上海市卫生局"百人计划"基金98BR040赞助; 文摘目的:优化鱼精蛋白-脂质体-寡聚核苷酸(oligodeoxynuleotides,ODN)复合体(liposome—protamine—ODN,LPD)法以提高SKOV3细胞的转染效率,并探讨该转染法对细胞体外增殖能力的影响。方法:参照文献设计核转录因子-κB(NF-κB)诱捕物ODN和对照物Scrambled ODN,并用FITC标记。LPD表面+/-电荷比例设计为1,2,4,6,并按转染液中是否含有小牛血清分成2组。用荧光光度计、流式细胞仪测定转染效率。用MTT法观察LPD法对SKOV3细胞在体外增殖的影响。结果:SKOV3细胞经LPD法转染,+/-电荷比例为4时转染效率最高,达96.41％,而无鱼精蛋白-脂质体的裸露ODN细胞转染效率为12.87％,两者差异有统计学上的高度显著性意义。培养液中10％小牛血清对转染效率无明显影响。结论:适宜电荷比例的LPD法是一种不受血清影响的高效率转染方法,有望用于体内转染。; 关键词鱼精蛋白-脂质体-寡聚核苷酸转染法卵巢肿瘤肿瘤细胞; Keywords protamine-liposome-oligodeoxynuleotides transfer ovarian neoplasms tumor cells; 分类号 R737.31 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脂质体介导转染法原理及其研究近展被引量：4: 5; 作者周雪雁关伟军马月辉刘桂林; 机构中国农业科学院畜牧兽医研究所; 出处《上海畜牧兽医通讯》 2004年第4期5-6,共2页; 关键词脂质体介导转染法技术原理组成制备转基因; 分类号 Q819 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名CTLA-4/Ig融合蛋白在COS-7中的表达、纯化及鉴定被引量：6: 6; 作者易绍萱吴军王锡华李彦刘志刚姜庆罗高兴周立新肖光夏; 机构第三军医大学附属西南医院烧伤研究所; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期523-526,共4页; 基金国家自然科学基金资助重大项目!(399934302) 军队杰出人才基金资助项目!(1996); 文摘目的　探讨pCTLA 4/Ig融合蛋白表达载体在哺乳动物细胞中的表达及表达产物的鉴定、纯化 ,为其功能研究和临床应用奠定基础。方法　将pCTLA 4/Ig表达质粒转染COS 7细胞 ,双抗体夹心ELISA检测细胞培养上清中融合蛋白表达 ;ProteinA亲和层析纯化 ,SDS PAGE、Western印迹、3H TdR掺入等进行分子量、纯度、抗原特异性及生物学活性鉴定。结果　在pCTLA 4/Ig质粒转染后的 48h和 96h上清中 ,均能检测到CTLA 4/Ig融合蛋白表达 ;经亲和层析纯化后 ,在SDS PAGE胶上出现一条分子量约 5 0× 10 3 的与预期分子量大小相符的蛋白条带 ,该蛋白能与抗人CTLA 4单抗特异结合 ;该纯化融合蛋白能抑制人MLR ,抑制率为6 0 %～ 70 %。结论　在哺乳动物细胞中成功地表达并纯化了有生物学活性的重组人CTLA 4/Ig融合蛋白。; 关键词 CTLA-4融合蛋白 COS-7细胞脂质体转染法; Keywords CTLA 4 fusion protein affinity chromatography gene expression purification activity identification; 分类号 Q510.3 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人血管生成抑制因子canstatin基因的克隆及真核表达被引量：1: 7; 作者单志新林秋雄余细勇刘媛符永恒谭虹虹郑猛林曙光; 机构广东省心血管病研究所分子药理室广东省人民医院医学研究中心; 出处《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B06期4-6,共3页; 基金广东省自然科学科学基金团队资助项目(015015)广东省自然科学科学基金资助项目(033189)广东省科技计划项目(B02160-03)广东省卫生厅科研基金资助项目(B2003002); 文摘 [目的]为研究canstatin对动脉粥样硬化斑块的稳定作用,克隆人canstatin基因,并在COS7细胞中表达出具有生物活性的canstatin。[方法]利用RT-PCR技术,从人脐静脉血管内皮细胞中扩增canstatin cDNA,并定向克隆入真核表达载体pSeeTag2C中。用脂质体转染法,将重组质粒pSecTag2C-canstatin转入COS7细胞。培养48 h后,对转化的COS7细胞行PCR 和Western-blot鉴定,用MTT法检测canstatin对人脐静脉血管内皮细胞增殖的抑制作用。[结果]从人脐静脉血管内皮细胞中扩增出canstatin cDNA片段。测序结果显示,克隆的canstatin cDNA长684 bp,序列与文献报道一致。从pSecTag2C-canstatin转化的COS7细胞中能特异地扩增出canstatin基因片段,Westem-blot结果显示,转化的COS7细胞中有特异的34 kDa的 canstatin表达。MTT检测显示,表达canstatin的COS7细胞上清能呈剂量依赖性地抑制脐静脉血管内皮细胞的增殖。[结论] 构建了真核表达重组质粒pSecTag2C-canstatin,在COS7中表达出具有生物活性的人canstatin。; 关键词人脐静脉血管内皮细胞真核表达 COS7细胞人血血管生成抑制因子扩增增殖定向克隆 DNA 脂质体转染法; 分类号 R730 [医药卫生—肿瘤] Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人牙本质涎蛋白在COS-7细胞中的表达: 8; 作者张莹史俊南汪平顾淑萍范继红费俭; 机构西安第四军医大学口腔医学院上海细胞生物学研究所基因工程组; 出处《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期415-417,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目 (3980 0 1 55); 文摘目的 :构建人牙本质涎蛋白 (humandentinsialoprotein ,hDSP)真核表达载体 ,用瞬时系统表达目的基因。方法 :将hDSP全长基因定向克隆入真核表达质粒载体pcDNA3 ,构建pcDNA3 hDSP重组质粒 ,脂质体转染法转染COS 7细胞 ,48～ 72h收集细胞及培养上清 ,Westernblot和免疫组化检测表达产物。结果 :酶切鉴定表明重组表达载体构建成功 ;Westernblot检测显示在 60 0 0 0处出现一条清晰的特异性免疫阳性条带 ;免疫组化染色显示细胞胞质内有大量棕黄色颗粒 ,进一步证明该转染方法可行 ,转染效率较高。结论 :hDSP全长基因可以在COS 7细胞获得瞬时高效表达。; 关键词人牙本质涎蛋白 COS-7细胞表达脂质体转染法; Keywords Sialoglycoproteins COS-7 cell Transient expression; 分类号 Q813 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基因导入的脂质体转染法和磷酸钙转染法之比较	李华刘维全王太一殷震	《中国实验动物学杂志》	2000	14	在线阅读下载PDF 职称材料
2	脂质体及电穿孔法对大鼠雪旺细胞转染效率的比较与分析	菅辉玲黄瑾程江高蕊	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	脂质体介导转染法原理及其研究进展	周雪雁关伟军	《中国家禽》北大核心	2005	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	改良鱼精蛋白-脂质体-寡聚核苷酸复合体法转染卵巢癌SKOV3细胞	陆建萍孙红曹长春欧周罗	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	脂质体介导转染法原理及其研究近展	周雪雁关伟军马月辉刘桂林	《上海畜牧兽医通讯》	2004	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	CTLA-4/Ig融合蛋白在COS-7中的表达、纯化及鉴定	易绍萱吴军王锡华李彦刘志刚姜庆罗高兴周立新肖光夏	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2000	6	在线阅读下载PDF 职称材料
7	人血管生成抑制因子canstatin基因的克隆及真核表达	单志新林秋雄余细勇刘媛符永恒谭虹虹郑猛林曙光	《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
8	人牙本质涎蛋白在COS-7细胞中的表达	张莹史俊南汪平顾淑萍范继红费俭	《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2004	0	在线阅读下载PDF 职称材料